Brainscape's Knowledge GenomeTM

Browse over 1 million classes created by top students, professors, publishers, and experts.


See full index

Cours H2021 > Protéines - Cours JPE (Intra) Électrophorèse et prt > Flashcards

Protéines - Cours JPE (Intra) Électrophorèse et prt Flashcards

1
Q

Discuter de l’élimination des protéines

A
  • Élimination rénale (< 60 kDa)
    • Réabsorption et catabolisme
    • Prt majeure dans urine = Albumine
  • Foie
  • Pertes pathologiques (urine, selles, peau, sang)
  • Catabolisme cellulaire
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Le catabolisme des acides aminés comprend 3 étapes. Lesquelles?

A
  1. Transamination
  2. Désamination (produit NH3)
  3. Cycle de l’urée
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Vrai ou Faux : le sérum contient plus de protéines que le plasma

A

FAUX

Le plasma en contient plus : Contient le fibrinogène et les protéines de la coagulation

[] prt sérum = 0,96 [] plasma

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Quelle est la concentration de protéines totales dans l’organisme?

A

70 g/L

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Quelle est la concentration de ces protéines dans l’organisme?

  • Préalbumine
  • Albumine
  • A1AT
  • Alpha-1 glycoprotéine acide
  • Haptoglobine
  • Alpha-2 macroglobuline
  • Transferrine
  • Complément (C3/C4)
  • Ig (G/A/M)
A
  • Préalbumine : 0,25 g/L
  • Albumine : 45 g/L
  • A1AT : 1,5 g/L
  • Alpha-1 glycoprotéine acide : 0,5 g/L
  • Haptoglobine : 1,5 g/L
  • Alpha-2 macroglobuline : 3 g/L
  • Transferrine : 2,5 g/L
  • Complément (C3/C4) : 1,2/0,4 g/L
  • Ig (G/A/M) : 12/2/1 g/L
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Qu’elle est l’utilité principale de l’électrophorèse des protéines sériques?

A

Recherche de dysprotéinémies monoclonales

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Quelle est la première étape pour l’interprétation d’une électrophorèse des protéines sériques? Quelle est les principale erreur associée?

A
  • S’assurer d’avoir le dosage des protéines totales
  • S’assurer que le dosage est juste
    • 1ere erreur : tube décongelé et non brassé
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Quelle est l’utilité de l’électrophorèse des isoenzymes?

A

Différencier l’origine tissulaire de certaines isoenzymes

  • CK et LD : coeur vs muscle
  • PAL : foie vs os
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

***Nommer 3 méthodes qui permettent la différenciation des isoenzymes de l’ALP et les résultats associés

A
  1. Traitement à la neuraminidase
    • Clivage de l’acide sialique terminal de l’ALP hépatique
    • Change la charge de l’ALP (ac sialique = négatif)
    • négativité : osseuse > hépatique
  2. Traitement à la chaleur
    • Inactivation de ALP foie, os et intestin
    • ALP oncofoetale, foetale et placentaire résistent
  3. Ajout d’une lectine
    • Lectine lie l’ALP osseuse
    • ALP osseuse retardée sur gel (reste à l’anode)
    • Permet séparation et quanfitication de ALP hépatique et macrohépatique
      • Déduction de ALP osseuse (calcul)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Vrai ou faux : L’ALP macro-hépatique est une macroenzyme

A

FAUX

Correspond à une ALP exprimée a/n des canules hépatiques

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Vrai ou Faux : La formation d’une macroenzyme peut affecter l’activité de l’enzyme

A

VRAI

Ex : Lipase +++ et Amylase nulle

Perte d’activité de l’amylase (macroenzyme)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Quel est l’algorithme du CHUM pour l’investigation d’un dosage en alpha 1 anti-trypsine?

A
  1. Dosage sérique de l’A1AT (néphélé) et CZE-HR
  2. Génotypage si
    • AAT < 1,15 g/L et CZE-HR normale
    • AAT < 2 g/L et CZE-HR inflammatoire
  3. Phénotypage si
    • Discordance entre dosage et génotypage
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Quelle est la méthode utilisée pour le phénotypage de l’A1AT?

A

Focalisation isoélectrique

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Quel est l’avantage du phénotypage de l’A1AT par rapport au génotypage?

A

Le génotypage investigue seulement 2 variants causant un déficit en A1AT : Variant S et variant Z

  • Le phénotypage permet d’observer la présence d’un variant associé à un déficit en A1AT (autre que S ou Z)
    • Migration différentielle des variants p/r à A1AT MM
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Quel est le prétaitement de l’échantillon associé à une électrophorèse des protéines urinaires?

A
  • Concentration d’une urine 24h de 1 à 100x
  • Application de 3-5 µL d’urine concentré
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Que devons-nous regarder lors d’une électrophorèse des protéines urinaire pour s’assurer de l’intégrité de l’échantillon?

A

La présence d’albumine.

  • Toujours faire une bandelette urinaire
  • Si l’albumine n’est pas visible : erreur manuelle ou interférence
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
17
Q

***Discuter des patrons différentiels obtenus en électrophorèse des protéines urinaires en cas de protéinurie glomérulaire (sélective vs non sélective) et tubulaire

A
  • Protéinurie normale : Alb seulement
  • Protéinurie glomérulaire : Prt de MW > Alb
    • Sélective : quelques prt
    • Non-sélective : Plusieurs prt de MW élevé
  • Protéinurie tubulaire : Prt MW < Alb
  • Chaines légères libres : MW < Alb

**Sens de migration : MW élevé -> Mw faible (Anode -> Cathode)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
18
Q

Discuter de la composition du LCR

A
  • Composition du sérum, mais 200x moins concentré
  • B2-transferrine : présence discrète ds LCR vs absente du sérum en condition normale
  • 60-80% du glucose sanguin
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
19
Q

Quelle est la différence entre la B2-transferrine et la transferrine?

A

La B2-transferrine ne contient pas d’acides sialiques

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
20
Q

Comment le LCR est-il formé?

A
  • Sang artériel filtré par la barrière hématoencéphalique :
    • Production du LCR par filtration sélective
  • Réabsorption du LCR par les villosités arachnoïdiennes
    • Production de sang veineux a/n des sinus
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
21
Q

Quel est l’ordre de prélèvement des tubes lors d’une ponction lombaire?

A
  1. Hémato :
    • Numération cellulaire
  2. Biochimie
    • Protéines et glucose (P/r à éch sanguin)
  3. Microbiologie :
    • Culture et coloration
    • Analyse de sédiments
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
22
Q

Quelle est l’utilité clinique de l’électrophorèse des protéines du LCR?

A
  • Recherche de bande oligoclonale d’IgG intrathécale
  • Toujours faire un sérum en parallèle pour comparer les patrons
    • Recherche patron qui est absent du sérum
  • Focalisation isoélectrique
  • Bandes IgG oligoclonales :
    • Sclérose en plaque si > 2 bandes
    • Atteinte infectieuse systémique (CMV, HIV, syphillis)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
23
Q

Quel est le test diagnostique d’une fistule de LCR?

A
  • Électrophorèse des protéines pour échantillon sanguin et liquide d’écoulement (nasal/oreille)
    • Agarose ou capillaire
  • Présence de B2-transferrine dans le liquide d’écoulement Dx pour une fistule
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
24
Q

Quels sont les biomarqueurs associés à un Dx d’alzheimer?

A
  • Neurofilaments ↑
  • Amyloïde ↓ (précipite pour former plaques)
  • Tau ↑
25
Q

Vrai ou faux : L’albumine est une glycoprotéine

A

FAUX

26
Q

Nommer des conditions qui sont associées à une augmentaiton de la perméabilité vasculaire

A
  • Choc septique
  • Trauma
  • Syndrome de détresse respiratoire
  • Brulure
  • Angio-oedème
27
Q

Vrai ou faux : L’hyperalbuminémie est associé à une cause pathologique

A

FAUX

Déshydratation. HyperAlb transitoire (hémoconcentration)

28
Q

Nommer des causes d’hypoalbuminémie

A
  • Analbuminémie congénitale
  • Maladie inflammatoire
  • Malabsorption
  • dénutrition
  • Pertes rénales (atteinte glomérulaire)
  • Pertes GI
    • maladie inflammatoire
    • Hémorragie digestive
    • Diarrhée profuse
  • Perte par la peau
  • Redistribution corporelle pathologique
    • oedème, ascite
  • Compensation pour augmentation de la pression oncotique
29
Q

Nommer 3 méthodes de dosage de l’albumine

A
  • Néphélémétrie
  • Bromocrésol vert ou pourpre
  • Électrophorèse
30
Q

Quelles sont les 2 fonctions de la céruloplasmine?

A
  1. Activité ferroxydase
    • Oxydation de Fe2+ → Fe3+
  2. Transport du Cu
31
Q

Compléter la phrase :

L’haptoglobine a une activité __________ puisqu’elle lie d’Hb libre et previent l’utilisation du ____________ par les ___________

A

L’haptoglobine a une activité bactériostatique puisqu’elle lie d’Hb libre et previent l’utilisation du fer par les bactéries

32
Q

Qu’est-ce que l’hémopexine?

A

Protéine de phase aigue positive qui prévient la perte de fer en captant l’hème libérée

33
Q

Quelle est l’utilité clinique principale de la transthyrérine?

A
  • Évaluation du statut nutritionnel
  • t1/2 = 2 jours (reflet changement rapide)
34
Q

***Nommer des facteurs non-spécifiques au statut nutritionnel qui modifient la concentration sanguine de la transthyrétine

A

Augmentation :

  • Maladie rénale chronique
  • Néphropathie diabétique
  • Tx à l’aspirine

Diminution :

  • Dénutrition
  • Maladie hépatique
  • Inflammation aiguë
35
Q

***Discuter de l’absorption du fer a/n intestinal

A
  • Transporteur DMT1 a/n apical
    • Transport du fer ferreux à l’intérieur de la cellule intestinale (entérocyte)
  • Ferroportine a/n basolatéral
    • Transport du fer ferreux vers la circulation
  • Fer ferreux oxydé en Fe3+ puis transporté par transferrine
    • Hephaestine, Céruloplasmine
  • Hepcidine :
    • Rétrorégule l’expression des Ferroportine et DMT1 lorsque les réserves de fer sont adéquates

**Absorption intestinale facilitée par : Alcool, Vit C, fructose, absorption antagonisée par calcium

36
Q

Vrai ou faux : La transferrine est un bon marqueur nutritionnel

A

VRAI

t1/2 7-8 jours, influencée par statut nutritionnel

37
Q

***Discuter de la régulation de la synthèse de la transferrine

A
  • Réactant de phase aiguë NÉGATIF
  • Synthèse régulée par la biodisponibilité du fer
    • Fer ↑ : transferrine ↓
    • Fer ↓ : transferrine ↑
38
Q

Quelle est l’utilité clinique de la mesure de la saturation de la transferrine?

A

Saturation associée à différentes pathologies selon si elle est faible ou élevée

  • Saturation élevée : surcharge en fer
    • Hémochromatose
    • surcharge en fer
    • Anémie (hémolytique)
    • Polytransfusion
  • Saturation basse : Déficit en fer
    • Anémie ferriprive
    • Grossesse
    • Perte en fer
    • Inflammation
    • Infection
39
Q

Quelle est l’utilité clinique du dosage de la ferritine?

A

Indiqué pour détecter une carence en fer (plutôt que le fer)

40
Q

Compléter la phrase :

La ________ est l reflet des réserves corporelles en fer

A

La ferritine est l reflet des réserves corporelles en fer

41
Q

Comment la saturation de la transferrine peut-elle être estimée (pas un dosage quantitatif)?

A

Par CZE-HR:

  • Saturation : augmentation de la bosse juste avant Tf
42
Q

***Décrire la concentration des marqueurs de l’homéostasie du fer en cas de :

  • anémie ferriprive
  • Hémochromatose
  • Anémie hypoproliférative
A

Anémie ferriprive :

  • Transferrine : ↑
  • Fer, ferritine, Sat Tf : ↓

Hémochromatose :

  • Fer, Sat Tf, ferritine : ↑
  • Transferrine : ↓

Anémie hypoproliférative :

  • Fer, transferrine, ferritine : ↓
  • Sat Tf : +/- normale
43
Q

Nommer des causes d’hypotransferrinémie

A
  • Inflamamtion
  • Maladie hépatique chronique
  • Malnutrition
  • Pertes protéiques (syndrome néphrotique)
  • Atransférrinémie congénitale
44
Q

*** Dans un électrophorèse des protéines sériques, quelles protéines seront augmentées et quelles seront diminuées en contexte d’inflammation aiguë

A

Augmentée :

  • A1AT
  • Haptoglobine
  • Complément
  • CRP
  • AAG

Diminuée :

  • Albumine
  • Transferrine
  • Transthyrétine
  • RBP
45
Q

***Nommer différents types d’électrophorèse et leur principe de séparation (taille, charge pI)

A
  • Acétate de cellulose : charge
  • Agarose : charge
  • PAGE : Taille et charge
  • SDS-PAGE : taille
  • CZE : Charge
  • Focalisation isoélectrique : pI
46
Q

Quel est le principe de l’électrophorèse de zone?

A
  • Tampon à pH élevé : Tampon barbital pH 8,6
  • Les protéines sériques sont majoritairement chargées négativement
    • Charge globale négative différente
    • Migration des protéines à des vitesses différentes
  • Les ions du tampon sont impliquée dans l’établissement du pH et du transport du courant électrique
47
Q

Comment la force ionique influence-t-elle la migration électrophorétique?

A
  • Augmentation de la force ionique = masque la macromolécule face au champ électrique
    • Augmente la résolution
    • Diminue la vitesse de migration
    • Produit de la chaleur
      • Refroidissement du système nécessaire

**Force ionique mise à profit en CZE-HR

48
Q

Quelles sont les 2 équations de la migration électrophorétique ?

A

µ = l*d / (t*V)

vitesse migration (l/t) / force du champ électrique (V/d)

  • l = distance parcourue
  • d = longueur du gel
  • t = temps d’électrophorèse
  • V = voltage du système

Unités : cm2/Vs

µ = Q /6 πnr

  • Q = Charge nette de la molécule
  • n = viscosité du milieu
  • r = rayon ionique de la molécule
49
Q

Compléter la phrase :

Les électrophorèses sont généralement effectuées à _________ constant, mais en clinique on les fait à __________ constant

A

Les électrophorèses sont généralement effectuées à intensité constant, mais en clinique on les fait à voltage constant

50
Q

***Expliquer le principe de l’électroendo-osmose

A

Seul mode électrophorétique où les molécules migrent de l’anode vers la cathode

  • à pH basique (8,6 tampon barbital), le support solide contient des silanols libres déprotonés (O-)
  • Il se forme 3 couches ioniques différentes :
    • Une couche ionique positive STATIQUE à la surface du support solide
      • Stern Layer
    • Une couche de diffusion où il y a plus de cations que d’anions
    • Une couche mobile ou les cations = anions
  • Les couches statique et de diffusion étant davantage composées d’ions positifs, les anions dans la couche mobile seront davantage retenus que les cations
  • Crée un fort mouvement de solution (cation) vers la cathode (en sens contraire du champ électrique)
51
Q

Quest-ce que l’électrophorèse capillaire?

A

Combinaison de la chromatographie et de l’électrophorèse

52
Q

Quelles sont les limites de la chromatographie et de l’électrophorèse sur gel pour l’investigation des protéines?

A

Chromatographie :

  • RÉsolution pas optimale
  • Absorption de protéines
  • Dénaturation de protéines

Électrophorèse sur gel :

  • Temps d’exécution important
  • coloration nécessaire (semi-quantitaitf)
  • +/- Répétabilité
53
Q

Quels sont les avantages de l’électrophorèse capillaire p/r à la chromatographie et l’électrophorèse sur gel?

A
  • Automatisé
  • Détection en cours d’analyse (détecteur UV)
  • Quantitatif
  • Reproductibilité de séparation
54
Q

Quels tests réflexes sont pertinents à faire suite à une électrophorèse capillaire (le cas échéant)?

A
  • Dosage de la Tf, saturation Tf, fer
    • SI estimation
55
Q

***Nommer des bénéfices cliniques additionnels propres à la CZE-HR

A
  • États cliniques mixtes plus facile à investiguer
  • Capacité de détection d’un faible pic monoclonal
  • Permet distinction d’un patron oligoclonal
  • Déficience en AAT : Meilleure exactitude clinique
    • Migration différentielle des variants potentiellement observable
    • Reconnaissance de conditions qui peuvent influencer [] AAT
    • quantification possible
  • Permet de différencier hémolyse in vivo de in vitro
    • Complexe Hb-Hapto observable (bosse avant alpha2-macro)
  • Meilleure exactitude pour ID syndrome néphrotique
    • ↑ modérée alpha2 macro
  • Permet d’estimer quantitativement la transferrine
    • Saturation de la transferrine visible
  • Permet l’étude du complément
    • C3 instable -> C3d
    • ↓ C3 avec ↑ C3d = complément dégradé
    • ↓ C3 sans ↑ C3d = pas d’↑ du complément
56
Q

***Nommer des caractéristiques exploitables de la CZE-HR

A
  • Automatisé
  • Grande quantité d’info sur plusieurs prt spécifiques
  • Grand nbre d’état clinique percevables, identifiables ou confirmé
  • Résolution accrue
  • Sensibilité accrue
  • Exploitation hors gammapathie
    • Anémie ferriprive
    • Anémie chronique, surcharge en fer
    • Hémolyse intravasculaire
57
Q

Nommer des interférences possibles en CZE-HR

A
  • En alpha 1 : Agent de contrastre et lipémie
  • En bêta-gamma : CRP et fibrinogène
58
Q

Distinguer un syndrome néphrotique d’une inflammation aiguë (patron d’électrophorèse: bandes alb, a1, a2, b, gamma)

A

Syndrome néphrotique

  • Albumine : ↓
  • Alpha 1 : N
  • Alpha 2 : ↑ (alpha2 macro ↑, remplace Alb)
  • bêta : ↑
  • Gamma : ↓

Inflammation aiguë :

  • Albumine : ↓
  • Alpha 1 : ↑
  • Alpha 2 : ↑
  • bêta : N-↑
  • Gamma : N

Cours H2021 (25 decks)

Brainscape helps you reach your goals faster, through stronger study habits.
© 2024 Bold Learning Solutions. Terms and Conditions