Protéines Cours 6A - Système du complément Flashcards
1
Q
Quelle est la définition du complément?
A
Ensemble de protéines plasmatiques et membranaires et de récepteurs cellulaires qui assurent un lien entre l’immunité innée et l’immunité adaptative
- > 30 protéines
- Synthétisées par le foie et par les cellules impliquées dans la réponse inflammatoire
2
Q
****Quelles sont les 3 grandes voies d’activation du complément?
A
-
Voie classique
- Complexes Ab-Ag
-
Voie des lectines
- Présence de lectines à la surface des pathogènes
-
Voie alternative
- Dépend seulement de la surface des pathogènes
- Pas besoin d’Ab
3
Q
***Quelles sont les 3 conséquences de l’activation du complément?
A
- Recrutement de cellules inflammatoires
-
Opsonisation des pathogènes
- Favorise phagocytose (pathogène recouvert de molécules du complément
- Lyse des agents infectieux
4
Q
Vrai ou faux : La voie classique du complément est activée par les complexes Ag-Ab et la CRP liée à la surface des bactéries
A
VRAI
5
Q
***Quels Ig activent le complément de façon préférentielle?
A
Les IgM
**Les IgG sont également capables, mais ça en prend 2!
6
Q
Quelles sont les premières étapes de l’activation du complément par la voie classique?
A
-
C1q lie un IgM ou un IgG (via région Fc)
- Prend 2 IgG
- Autoactivation de C1r
- Clivage et activation de C1s par C1r
- C1s activé clive C4
- C4a : médiateur de l’inflammation (circulation)
- C4b : Liaison au pathogène (opsonisation)
- C4b lie C2
-
C2 est clivé par C1s
- C2a : S’associe avec C4b à la surface du pathogène
- C2b : va en circulation
- C2a + C4b = C3 convertase
7
Q
Dans quel contexte le complément est-il activé par la voie des lectines?
A
- Activation par la liaison de lectines sur des mannoses à la surface d’organismes étrangés
- Indépendant des Ab
- Principalement des levures
8
Q
Quelles sont les premières étapes de l’activation du complément par la voie des lectines?
A
- Lectines (MBL) complexé avec MASP-1 et MASP-2 lie un mannose à la surface du pathogène
-
C4 est clivé
- C4a : médiateur de l’inflammation (circulation)
- C4b : Lie la surface du pathogène
-
C2 est clivé
- C2a : s’associe à C4b à la surface du pathogène
- C2b : en circulation
- C4b + C2a = C3 convertase
9
Q
Quel est le contexte d’activation du complément par la voie alternative?
A
- Activation spontanée de C3 par des protéines à la surface des pathogènes
- Ne requiert pas la formation de complexes Ag-Ab
- N’importe quel matériau in vivo peut activer le complément (Ex : prothèse)
10
Q
Quelles sont les premières étapes de l’activation du complément par la voie alternative?
A
-
Hydrolyse spontannée de C3
- C3a : circulation
- C3b : Se lie à la surface du pathogène
- Facteur B se lie à C3b
-
Facteur D clive Facteur B lorsque lié à C3b
- Facteur Ba : circulation
- Facteur Bb : reste lié à C3b
- C3b + facteur Bb = C3 convertase
- C3b + C3b + facteur Bb = C5 convertase
11
Q
Quel est le rôle de la C3 convertase formée par les 3 voies d’activation du complément?
A
-
C3 convertase clive le C3 :
- C3a : Anaphylatoxine, favorise inflamamtion
- C3b : Participe à la cascade d’activation
-
Fixation de C3b à la surface du pathogène
- mène à l’opsonisation
-
génère l’activité de la C5 convertase
- C4b-C2a-C3b
- C3b-Bb-C3b
-
C5 convertase clive C5
- C5a : Anaphylatoxine la + importante
-
C5b : Se lie à la surface du pathogène
- Noyau pour le complexe d’attaque membranaire
12
Q
Quelle est l’étape ultime de l’activation du complément (indépendamment de la voie d’activation)?
A
Formation du complexe d’attaque membranaire
13
Q
Quelles sont les étapes de la formation du complexe d’attaque membranaire (MAC)?
A
- C5b + C6 + C7 + C8 + C9
- Plusieurs molécules C9 pour former le pore membranaire
14
Q
Nommer des rôles biologiques du complément
A
-
Opsonisation
- Macrophage reconnait C3b à la surface
-
Production d’anaphylatoxines
- Médiateurs de l’inflammation : C3a, C4a, C5a
-
Lyse cellulaire
- Pore : C5b-C6-C7-C8-C9
-
Amélioration de la réponse des cellules B
- Améliore production d’Ab (C3d)
-
Contrôle de la formation et clairance des complexes immuns
- Macro complexe Ag-Ab-C3b
- Mécanisme principal de clairance complexe immun
-
Clairance des cellules nécrosées ou en apoptose
- Cibles d’opsonisation (Cb3)
-
Protection anti-virale
- Opsonisation de particules virales
- Activation voie classique et lectines
15
Q
***Nommer des régulateurs de l’activation du complément
A
- C4BP
- Facteur H
- C1-INH
- Facteur I
- DAF
16
Q
Quel est le rôle principal des régulateurs de l’activation du complément?
A
Empêcher l’action du complément contre les cellules du soi
- Les régulateurs sont présents à la surface des cellules du soi
17
Q
Quels sont les 3 types de mécanismes des molécules régulatrices de l’activation du complément?
A
-
Dissociation des convertases
- C1-INH
- C4BP
- Facteur H
- DAF
-
Dégradation des facteurs à la surface cellulaire
- Facteur I
-
Agissent comme cofacteur de la dissociation et de la dégradation
- C4BP
- Facteur H
18
Q
Vrai ou faux : Les régulateurs de l’activation du complément sont spécifiques à certaines voies
A
VRAI
19
Q
**** Quelle est la spécificité de chacun des régulateurs de l’activation du complément?
A
- C4BP : Lectine + classique
- Dissocie C4b-C2a
-
C1-INH : Classique
- Dissocie C1qrs
-
Facteur H : Alternative
- Dissocie C3b et Bb
-
Facteur I : Toutes
- Dégrade C4b et C3b
-
DAF : Toutes
- Dissocie C3b et Bb
- Dissocie C4b-C2a
-
CD59 : Toutes
- Empêche formation du MAC (C5 à C9)
20
Q
Quelles sont les différentes méthodes d’analyse disponibles pour l’investigation du complément?
A
- Méthodes fonctionnelles pour l’activité totale
- Méthodes immunologiques pour doser un élément en particulier
- Activité spécifique d’un facteur
- Analyse des produits d’activation
- Dosage des autoanticorps anti-complément
- Expression des marqueurs de surface et identification de la déposition du complément à la surface cellulaire
- Séquençage génétique
- Monitoring de l’éculizumab
21
Q
*** Qu’est-ce que le test CH50?
A
Investigation du complément
- Essai hémolytique
- Activation totale de la voie classique
- Mesure de l’activité de C1 à C9
- Faire différentes dilutions du sérum pour obtenir 50% de lyse
- Lyse de RBC de mouton sensibilisé
- Liposomes
- Détermine quelle quantité de sérum est nécessaire pour obtenir lyse
22
Q
***Qu’est-ce que le test AH50?
A
Investigation du complément
- Essais hémolytique
- Activation totale de la voie alternative
- EGTA pour inactiver voie classique
- Détermine la dilution du sérum qui donne 50% d’hémolyse
23
Q
Comment l’activité d’un élément d’une voie d’activation du complément peut-elle être évaluée (méthode analytique)?
A
- Reconstruction de l’activité hémolytique d’un sérum de patient
- 2 approches
- Sérum patient + sérum déficient en 1 prt + CH50
- Sérum patient + prt du complément + CH50
24
Q
Quelles sont les considérations analytiques pour le dosage d’éléments relatif au complément?
A
- Complément très sensible à l’activation in vitro
- Chaleur
- Exposition prolongée à T° ambiante
- Complexes immuns ou agglutinines froides
- Sérum frais et réfrigéré < 48h ou congelé à -70°C
25
Quels auto-anticorps anti-complément est-il possible de doser?
* Ab Anti-C1-INH
* C3NeF
* C4NeF
* Ab anti-C1q
26
Comment est-il possible de doser les complexes immuns circulants (CIC)?
* Méthode basée sur la reconnaissance de C1q ou de C3
27
Quel est l'impact de l'augmentation de l'activation du complément?
Inflammation non-spécifique
28
Nommer des pathologies associées au complément
* Infectieuses
* Bactériennes
* virales
* Maladies rhumatologiques
* Maladies rénales
* Maladies hématologiques
29
\*\*\*Nommer 2 maladies rénales issues du désordre du complément
* Glomérulonéphrite membrano-proliférative (GNMP)
* C3 bas
* Ab anti-C3 convertase
* Syndrome urémique hémolytique (HUS)
* Facteur H déficient
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\*\*\*Qu'est-ce que la glomérulonéphrite membrano-proliférative?
_Caractéristiques_ :
* Dépôts sous-endothéliaux dans les parois capillaires
* Prolifération cellulaire mésangliale
* Prrésence en immunofluorescence de dépôts granuleux le long des parois capillaires et dans le mésangium
_Classification_ :
* Histologique : type I-II-III
* Selon métanisme physiopatho
* Associée à des complexes immuns (qui active complément)
* Associée à des anomalies d'activation du complément
31
\*\*\*Quelles sont les différences entre les 3 types de glomérulonéphrite membranoproliférative?
**_Type I_** :
* Complexes immuns circulants et dépôts
* Augmentation de l'activation de la voie classique
* Test labo :
* **↓ C3, C4, C2, C1q, B**
* **CIC +**
* **C4NeF (Nfc)** +
* **CH50 ↓ et AH50 N**
**_Type II_** :
* Pas de complexes immuns circulants
* Activation anormale de la voie alternative
* Tests de labo :
* **CIC -**
* **C3NeF (NFa) +**
* **↓ C3 et H**
* **AH50 ↓ et CH50 N**
**_Type III_** :
* Activation de la voie alternative et du MAC
* Tests de labo :
* **NFt +**
* **↓ C3, C5 et MAC (C6-7-8-9)**
* **AH50 ↓ et CH50 ↓**
32
\*\*\* Proposer un algorithme différentiel pour la glomérulonéphrite membranoproliférative (GNMP)
**_Suspicion de GNMP_** : Présence de dépôts granuleux le long des parois vasculaires
1. Doser **AH50 et CH50**
* CH50 ↓, AH50 N : Voie classique affectée
* AH50 ↓, CH50 N : Voie alterne affectée
* AH50 ↓, CH50 ↓ : Voie commune affectée
2. Dans voir classique doser **C4NeF ou CIC**
* C4NeF ↑ / CIC + : Type I
3. Dans voie alterne doser **Facteur H**
* Facteur H ↓ : Type II
4. Dans voie commune doser **C5 ou MAC (C6-7-8 ou 9)**
* C5 ou MAC (C6-7-8 ou 9) ↓ : Type III
\*\* Combiné avec imagerie et histologie pour visualiser les dépôts
33
\*\*\*\*Qu'est-ce que le syndrome urémique hémolytique (HUS)?
_Triade_ :
* Anémie hémolytique microangiopathique
* Thrombocytopénie
* Insuffisance rénale aiguë
34
\*\*\*\* Quels sont les 2 types de syndrome urémique hémolytique?
1. "**Régulier**" : Maladie de hamburger
* Avec diarrhée
* Causé par E. coli
2. **Atypique**
* Sans diarrhée
* Activation incontrôlée du complément
* Mutation régulateur du complément (facteur H, I ou MCP)
* Sur activation du complément mène à des dommages aux tissus
35
\*\*\*\*Proposer un algorithme différentiel pour différencier les 2 types de syndrome urémique hémolytique et pour caractériser le HUS atypique
1. Recherche de toxine produite par E. coli
* Présente : HUS régulier suspecté
* Absente : Investigation HUS atypique
2. Doser C3
* Normal : HUS atypique peu probable
* ↓ : Continuer
3. Doser facteur H
* ↓ : Mutation facteur H
* Normal : Doser facteur I
* ↓ : Mutation facteur I
* Normal : Doser MCP
* ↓ : Mutation MCP
## Footnote
***\*\*\*Investigation des 3 types de mutation les plus fréquentes. Tests génétiques***
36
\*\*\*Nommer des maladies hématologiques causées par un débalancement du complément
* Angio-oedème
* Hémoglobinurie paroxystique nocturne
37
Qu'est-ce que l'angio-oedème?
* Oedème des tissus mous
* Oedème sous-cutané et sous-muqueux
* Enflure près de la bouche
* Mort par oedème
38
\*\*\*\*Quels sont les 3 types d'angio-oedème?
* Type I : héréditaire
* **Concentration** en **C1-INH ↓**
* Type II : Héréditaire
* **Activité** de **C1-INH ↓**
* Type acquis :
* **Ab anti-C1-INH**
39
\*\*\*\*Quels marqueurs du complément devrait-on doser lors de l'investigation de la classification de l'angio-oedème ?
* CH50, C4, C1q et C2 bas
* C3 normal
* Dx différentiel :
* C1-INH (Ag vs activité)
* Ab anti-Ci-INH
40
\*\*\*\*Proposer un algorithme différentiel pour caractériser le type d'angio-oedème
1. Doser CH50
* ↓ pendant la crise
2. Doser C3
* Normal
3. Doser C4, C1q et C2
* Tous abaissés
4. Doser C1-INH (concentration)
* ↓ : **Type I**
* Normal : doser activité
* ↓ : **Type 2**
* Normal : Doser Ab anti C1-INH
* ↑ : **type acquis**
41
Qu'est-ce que l'hémoglobinurie paroxystique nocturne?
* Poussées nocturnes d'hémolyse et d'hémoglobinurie par activation du complément
* Causé par mutation du gène GPI-A
* GPI : glycosyl phosphatidyl inositol
* Protéine d'ancrage membranaire pour les régulateurs (CD59 et DAF) de la cascade du complément
* Régultation moins efficace car non ancré à la membrane
* CD59 : Prévient formation complexe membranaire
* DAF :
* Déplace Bb de C3b (voie alternative)
* Déplace C2a de C4b (lectine et classique)
## Footnote
***\*\*Atteint toutes les voies du complément!***
42
\*\*\*Proposer des tests à faire pour l'investigation de l'hémoglobinurie paroxystique nocturne
**_Cytométrie de flux :_**
* CD16, CD14, DAF et CD59 (dépendants du GPI)
**_FLAER :_**
* Fluorescently labelled Aerolysin
* Prt recombinante qui lie spécifiquement et avec beaucoup d'affinité l'ancre GPI
* Signal ↓ = abscence de GPI
43
\*\*\*Quelle est l'utilité clinique de l'éculizumab?
* Anticorps monoclonal anti-C5 bloquant la voie terminale d'activation du complément
* Principalement utilisé pour traiter les maladies liées à une suractivation de la voie alterne du complément, comme l'hémoglobinurie paroxystique nocturne, les glomérulonéphrites de type membrano-prolifératives et le syndrome hémolytique urémique atypique
44
\*\*\*\*Proposer un algorithme différentiel pour distinguer l'altération de la voie classique, alterne et lectine (ARUP)
Doser CH50, AH50, C3 et C4
**_Voie classique :_**
* CH50 ↓
* AH50 **N**
* C3 N-↓
* C4 ↓
**_Voie lectine_** :
* CH50 ↓
* AH50 **N**
* C3 ↓
* C4 ↓
**_Voie alterne_** :
* CH50 **N**
* AH50 ↓
* C3 ↓
* C4 N
**_Distinction entre mutation génétique et consommation du complément :_** Doser C2, C4, C1
* Si un seul de diminué : mutation génétique
* Si plusieurs de diminués : Consommation du complément
**_Distinction entre activation de la voie initiale ou terminale du complément :_** AH50 et CH50
* Si AH50 ET CH50 ↓ : Consommation du complément dans la portion terminale
