Maturação Linfocitária T e B Flashcards
Processo através do qual os linfócitos progenitores no timo e na medula óssea diferenciam em linfócitos maturos que populam os tecidos linfóides periféricos.
Maturação
Tipos de células B
Foliculares
Zona Marginal
B-1
Tipos de linfócitos T alfa beta
CD4+ e CD8+
Tipos de linfócitos T não alfa beta
NKT
Gamma delta
O que vem primeiro? O pré-linfócito ou o pró-linfócito?
O pró-linfócito é mais precoce
Que tipo de células B são geradas no fígado fetal?
Células B-1
Quais são as células B mais produzidas na medula óssea
Foliculares (+++) - circulantes
Zona marginal
Que tipo de linfócitos T são mais produzidos no fígado fetal?
Linfócitos T gamma delta
Que sinais é que um progenitor linfóide comum pode receber para seguir a via Pro-B?
EBF
E2A
Pax5
Que estímulos é que uma célula T pode receber para se diferenciar em célula linfóide inata?
Id2
Que estímulos é que uma percursora pode receber para se diferenciar em Pro-T?
Notch 1
GATA3
Em células alfa beta T em maturação, qual é o gene do TCR primeiramente disponível?
Locus Beta
As Rag-1 e Rag-2 são essenciais ao desenvolvimento de que linhagem?
Linfócitos B.
A IL-7 é importante na proliferação de que células?
Progenitoras de células T
Quem produz IL7?
Células estromais da medula.
Células epiteliais
Outras células do timo
Qual é a origem da imunodeficiência combinada severa ligada ao X? (X-SCID)
Mutações na cadeia gamma comum, uma proteína utilizada pelos recetores de IL2, IL7 e IL15
O que acontece na imunodeficiência combinada severa ligada ao X? (X-SCID)
Bloqueio no desenvolvimento de células T e NK, mas não na célula B.
A IL-15 é particularmente importante para o desenvolvimento de que célula do sistema imune?
NK
Quando é que ocorre o maior momento de proliferação de uma célula T ou B em desenvolvimento?
Quando já tem a recombinação dos genes codificantes de uma das cadeias do recetor T ou B.
(os sinais gerados por pré-recetores de antigénios são mais fortes do que os das citocinas como IL7)
Que fenómenos estão por trás da diferenciação CD4 vs CD8 na linhagem T alfa beta?
Epigenética. O gene CD4 fica inacessível na linhagem CD8
A deleção do Dicer (importante na génese de miRNA) resulta em que distúrbio da linhagem T?
Perda de células Treg
Qual é o distúrbio da linhagem B que acontece na deleção do Dicer?
Bloquei na transição pró-B a pré-B por estimulação da apoptose em pré-B
Qual é que é a chave da geração do reportório diverso dos linfócitos?
A recombinação dos genes recetores de antigénios.
Como é que os fenómenos de recombinação de DNA nos genes de recetores de antigénios são influenciados pela presença de antigénios?
Não são. Os diversos recetores de antigénios são gerados e expressos ANTES do contacto com antigénios.
Os recetores de antigénios (e os próprios pré-recetores) têm um papel para além de reconhecer antigénios ligados a MHCs. Qual é esse papel?
Durante a maturação linfocitária, os recetores de antigénios dão sinais de sobrevivência e maturação aos linfócitos.
Qual é o primeiro checkpoint da maturação linfocitária?
Expressão de uma cadeia de recetor de antigénio (pré-recetor)
Qual é o segundo checkpoint da maturação linfocitária?
Expressão do recetor de antigénio completo.
Qual é o terceiro checkpoint da maturação linfocitária?
Seleção positiva e negativa
Que cadeia contém o pré-TCR?
TCR beta
Que cadeia contém o pré-BCR?
Cadeia pesada Ig u
Como é que ocorre a recombinação dos recetores de antigénios?
Quando começam a ser expressas as cadeias dos recetores de antigénios, há fenómenos de de adição e remoção de bases aleatorizadas, com junção de segmentos de DNA no locus, para maximizar a variabilidade entre recetores.
Nas células B em maturação, qual é o primeiro gene a sofrer recombinação?
IgH (cadeia pesada de imunoglobulina) - futura IgM
O que acontece se o processo de recombinação da TCR beta ou da Ig u acontecer “out-of-frame”?
Uma recombinação out-of-frame significa que aconteceu fora dos codões com capacidade de transcrição. Estas células não expressam o pré-recetor membranar, não recebem sinais de sobrevida e morrem por apoptose.
O que acontece a uma célula imatura que já expressa um recetor de antigénios completo, mas que reconhece fortemente antigénios “self”?
Tem duas hipóteses:
Morre por apoptose
OU
Alteram os recetores de antigénios (só em algumas células B)
Processo que facilita a sobrevivência de células linfóides potencialmente úteis.
Seleção POSITIVA
Na linhagem T, a seleção positiva garante a seleção de células T que…
Reconhecem recetores MHC self.
As células T maturas reconhecem antigénios apresentados por células com MHC self.
Na linhagem B, a seleção positiva preserva…
Células que expressam recetores BCR
Processo que elimina ou altera linfócitos em desenvolvimento cujo recetores ligam-se fortemente a antigénios do self presentes em órgãos linfóides primários.
Seleção NEGATIVA
Fenómeno que elimina por apoptosecélulas T em desenvolvimento com grande afinidade para antigénios self.
DELEÇÃO CLONAL
Fenómeno que permite que células B imaturas façam novas recombinações do gene Ig para evadir a reactividade ao self.
RECEPTOR EDITING
Se falhar, a célula B entra também em deleção clonal, como uma célula T self-reativa.
O que significa recombinação V(D)J?
Recombination of different Variable region gene segments with Diversity and Joining gene segments
Quantos loci estão responsáveis pelo codificação de todas as cadeias pesadas de Ig, pela cadeia kappa e pela cadeia lambda?
3, cada um em diferentes cromossomas.
Onde estão presentes os genes variáveis (V), nos loci Ig?
Na extremidade 5’ de cada locus Ig
Onde estão presentes os genes D (diversity) nos loci de Ig?
Entre os genes V (a 5’) e os J (a 3’)
O locus da cadeia leve kappa tem quantos genes C?
1.
O locus da cadeia leve lambda tem quantos genes C?
4.
O locus da cadeia pesada de Ig tem quantos genes C?
9.
Nas cadeias leves de Ig, quais são os segmentos (VDJ) que codificam as regiões variáveis?
V e J
Na cadeia pesada de Ig, quais são os segmentos (VDJ) que codificam as regiões variáveis?
V, D e J
Em que cromossoma está a cadeia pesada de Ig?
14
Qual cromossoma codifica a cadeia kappa?
2
Qual cromossoma codifica a cadeia lambda?
22
A que corresponde o CDR3 na cadeia pesada?
O CDR3 é uma região determinante de complementaridade, que, na cadeia pesada, corresponde ao segmento D e J, assim como os segmentos de transição entre o V e o D e entre o D e o J.
A que corresponde o CDR3 na cadeia leve?
O segmento entre o J e o V, assim como o próprio J.
Onde estão o CDR1 e CDR2?
No meio do próprio segmento V, tanto nas cadeias pesadas como leves.
No TCR, os segmentos D estão presentes em que loci?
Da cadeia beta e delta
Em cada linfócito, quantos genes V, D e J são selecionados?
Um V, um D e um J, que vão formar uma região variável.
Em que regiões variáveis dos recetores de antigénios não existem segmentos D?
Na cadeia leve de Ig e no TCR alfa e gamma
Nas cadeias com segmentos V, D e J, em que ocorre junção dos três segmentos, distinguem-se duas etapas sequenciais. Quais são?
1º - Junção D+J
2º - Junção V+DJ
Como é que os loci de Ig ou TCR podem estar envolvidos na promoção de oncogenes em contexto tumoral?
Nos linfomas, as regiões de codificação TCR e Ig, por serem regiões normalmente expostas, são alvo de translocação de oncogenes, que, muitas vezes, se aproveitam de enhancers codificados nestes loci.
Quais são os 4 eventos sequenciais da recombinação V(D)J?
1 - Sinapse
2 - Clivagem
3 - Abertura hairpin e end-processing
4 - Joining
Porções do cromossoma onde o gene do recetor de antigénios tornam-se acessíveis à maquinaria de recombinação. Dois segmentos codificantes são cruzados em looping. Que fase de recombinação VDJ é esta?
Sinapse (1ª)
A VDJ recombinase é o complexo enzimático responsável pela clivagem do DNA na recombinação VDJ. Quais são as enzimas que constituem esse complexo?
RAG1 e RAG2, ligam-se aos RSSs e clivam, deixando um hairpin em cada lado
Como é que se garante que um linfócito em proliferação não sofre recombinação VDJ na fase S?
Não se garante, mas as RAG são genes apenas expressos em células B e T em desenvolvimento. As proteínas são expressas em G0 e G1 e depois inativadas em células proliferativas. Isto reduz a possibilidade de quebras de DNA comprometedoras durante a replicação de DNA
Qual é terceira fase da recombinação VDJ?
Hairpin opening and end-processing
Qual é a enzima chave da 3ª fase da recombinação VDJ?
Artemis - endonuclease que abre os hairpins deixados pela VDJ recombinase na segunda fase.
O último passo de recombinação VDJ é o Joining. Qual é o processo de reparação de DNA inerente a este fenómeno?
Nonhomologous end joining.
Nucleótidos P
Pequenas sequências de nucleótidos adicionadas a uma cadeia (VDJ) após a clivagem assimétrica da Artemis, no processo de joining, a partir do modelo da outra cadeia de DNA.
Nucleótidos N
Sequências de nucleótidos adicionadas a uma cadeia (VDJ) no processo de joining, sem relação com um molde.
Qual é a região dos recetores de antigénios com maior variabilidade?
CDR3 (entre V-D, D-J, e os próprios D e J)
Como é que se estuda a clonalidade de uma população linfóide?
Mede-se ou sequencia-se a região CDR3, uma vez que cada clone de linfócitos tem uma região CDR3 específica e própria.