Avaliação da Resposta Imune I Flashcards
O que é um imunoensaio?
Ensaios que detetam ou quantificam um analito numa amostra biológica usando o princípio da reação antigénio-anticorpo
Técnicas de imunoensaios com reações de precipitação
Dupla difusão Imunodifusão radial Imunoeletroforese contracorrente Imunoeletroforese Imunoeletroforese Rocket Imunofixação
A técnica de imunodifusão radial avalia…
A presença e concentração do antigénio
Quando é que usamos imunodifusão radial?
Quantificação de Ig
Quantificação de factores de complemento (e outras proteínas séricas)
Qual é o problema da imunodifusão radial?
É uma técnica manual, mais demorada e cara.
Qual é a diferença entre reações de precipitação e de aglutinação?
Precipitação - moléculas solúveis
Aglutinação - Elementos particulados (células aglomeradas - vê-se a olho nu)
Aglutinina por excelência
IgM
Aglutinina pobre
IgG
A tipagem AB0 é feita com recurso à…
Aglutinação
Aglutininas
Anticorpos usados nas reações de aglutinação
A tipagem AB0 é feita com recurso a aglutinação em 4 poços. O que está em cada um desses poços?
1) Antigénio A
2) Antigénio B
3) Antigénio A e B
4) Nenhum antigénio
As reações de aglutinação usam-se para..
Tipagem AB0
Tipagem Rhesus
Identificação microbiana
Identificação de anticorpos contra antigénios bacterianos
Ao contrário da imunodifusão, as reações de aglutinação são…
Qualitativas, não quantitativas. Só dizem se o anticorpo existe.
A nefelometria mede…
Intensidade da luz refratada. (quanto mais luz refratada existe, mais imunocomplexos!)
A turbidimetria mede…
Intensidade da luz transmitida. (quanto mais luz transmitida, menos imunocomplexos)
A turbidimetria é mais vantajosa que a nefelometria quando..
A concentração de antigénios do sangue do doente é mais baixa
Por que motivo a nefelometria e a turbidimetria são tão usados para quantificação de antigénios e proteínas?
São automatizados
A nefelometria e turbidimetria são usadas para…
Doseamento de Ig
Doseamento de factores de complemento
Doseamento de proteínas de fase aguda
O que são factores reumatoides?
Anticorpos anti porção Fc da IgG utilizados no rastreio da artrite reumatóide.
Para além dos factores reumatoides, quais são os anticorpos pesquisados na artrite reumatoide?
Anti péptido cíclico citrulinado (CCP)
Nos ensaios competitivos, estamos a testar…
Se o doente tem anticorpos no soro.
Nos ensaios sandwich estamos a testar…
Se o doente tem antigénios no sangue
Qual é o Enzyme Immuno Assay mais usado?
ELISA
Enzimas usadas nos EIA
Fosfatase alcalina
Peroxidase de rábano
Glicose-6-fosfato desidrogenase
Beta-galactosidase
Aplicações do EIA (ELISA)
Doseamento de Ig Avaliação dos fatores do complemento Monitorização de serologia infeciosa (HIV, HBV, HCV, HAV, CMV, Rubéola, Toxoplasma) Monitorização de imunização Marcadores tumorais Dosear hormonas
O ELISpot avalia…
Produção de citocinas e perforinas
O que significa FIA?
FluroImmunoAssay
Quais são os 4 elementos da FIA?
Antigénio em fase sólida
Anticorpos da amostra
Anticorpos com enzima conjugada
Substrato fluorgénico
Principal aplicação de FPIA
Hormonas tiroideias (T4)
Aplicação da FEIA
IgE total e específica IgG e IgA Proteína catiónica eosinofílica Triptase Anticorpos autoimunes
Por que motivo a FEIA permite o doseamento de IgE específicas?
Porque na placa vamos ter alergénio!
O ISAC serve para…
Avaliação de IgE, IgG e IgA específicas
Qual é a grande vantagem do ISAC?
Permite testar vários tipos de antigénios/alergénios simultaneamente