Immuno : Anticorps Flashcards
1
Q
Que sont les immunoglobulines ?
A
- Glycoprotéines
- Protéines sériques
2
Q
Par quelle cellules sont produites les immunoglobulines ?
A
Lymphocytes B
3
Q
Par quelles cellules sont sécrétées les AC ?
A
Plasmocytes
4
Q
Pourquoi les plasmocytes sécrètent des AC ?
A
En réponse à une substance étrangère
5
Q
Où trouve-t-on les immuoglobulines ?
A
- Plasma
- Liquides biologique
- Sécrétion
6
Q
Différence entre immunoglobuline et AC ?
A
Immunoglobuline → Biochimistes
Anticorps → Immunologiste
=> C’est la même chose
7
Q
Rôle des AC ?
A
Protection de l’organisme contre les infections microbiennes
8
Q
Quelles sont les protéines sériques majoritaire que l’on trouve dans le sérum ?
A
- Albumine
- Globuline : γ, α1, α2, β
9
Q
Rôle de l’albumine ?
A
Maintient de la pression osmotiques indispensable à la bonne répartition des liquides entre les vaisseaux et les tissus
10
Q
Caractéristiques des globulines ?
A
- Groupe hétérogène de protéines
- grande et + soluble que l’albumine
11
Q
Que sont les γ globulines ?
A
Les immunoglobulines !
12
Q
Utilité de l’électrophorèse des globine et l’albumine ?
A
Diagnostique certaines maladie du système immunitaire → Immunité humorale +++
13
Q
Que signifie une variation du taux d’albumine ?
A
Maladie rénale ou hépatique
14
Q
Que signifie une variation des globuline alpha ?
A
Déficit immunitaire
15
Q
Que signifie une variation des globulines gamma ?
A
Désordre immunologique
16
Q
Qu’a permit de définir l’hétérogénéité de immunoglobuline ?
A
→ 5 classes d’immunoglobulines :
* IgG
* IgA
* IgM
* IgE
* IgD
17
Q
Localisation des immunoglobulines ?
A
Région gamma globuline
18
Q
Combien de pneumocoques différents existe-t-il ?
A
80 → Définis selon les antigènes capsulaires
19
Q
Quels sont les pneumocoques les plus virulents ?
A
I, II et III
20
Q
Qu’est-ce que la maladie de Kahler ?
A
Myélome multiple
21
Q
Qu’est-ce qu’un myélome ?
A
Prolifération monoclonale d’un plasmocyte qui ne produit qu’un seul type d’AC
22
Q
Part des protéines du myélome chez un patient atteint du myélome multiple ?
A
95% des immunoglobulines sérique
23
Q
Quantité de LB produit par jour ?
A
1 à 2 milliards
24
Q
Particularité des LB produits ?
A
Ils ont tous un AC unique
25
Quels sont les possibles scénarios lors de la reconnaissance d'un AG par un LB ?
* AG reconnu, LB s'excitent, se prolifèrent et s'arrête → Apoptose
* AG reconnu, LB s'excitent, se prolifèrent, par cytokines transformation en plasmocyte, sécrétion d'AC → élimination du pathogène
* AG reconnu, prolifération, transformation plasmocytes, acquisition gène oncotique → immortels → Myélome
26
Caractéristiques des plasmocytes des myélomes ?
Sécrétion excessive des immunoglobulines → urine des patients → Protéine de Bence-Jones
27
Qu'a permis l'étude du myélome multiple ?
Purification et cristalisation de la structure de base des immunoglobulines
28
Pourquoi ne peut on pas laisser les AC sous forme linéaire lors de leur production ?
Elle risque d'être dégradée
29
Comment les immunoglobulines se protège ?
En se mettant sous forme d'hélice alpha et feuillets bêtas → Structure secondaire, tertiaire ou quaternaire
30
Comment obtient on les structures 3D des AC ?
Par cristallographie
31
Structure des AC ?
* 2 chaines lourdes identiques
* 2 chaines légères identiques
* 1 partie variable sur chaque chaine
→ 4 chaines polypeptidiques
* Groupement glucidique
* Ponts disulfures
32
Quelles sont les classes de régions constantes des chaines légères ?
* Kappa
* Lambda
33
Quelles sont les combinaisons possible de chaines légères ?
* Kappa-Kappa
* Lambda-Lambda
34
Prédominance de la chaine Kappa chez l'Ho et la souris ?
60/70%
35
Quelles sont les région hypervariable des domaines variable des AC ?
→ 3
* CDR1
* CDR2
* CDR3
36
Quel est le rôle des régions CDR ?
Site de liaison à l'AG → le paratope de l'AC
37
Qu'est-ce que la région "Fr" de la partie variable des AC?
Framwork region ou région charpente → partie avec le - de variabilité
38
De quelle nature sont les liaisons entre les épitopes et les paratopes ?
Liaison H → facilement réversible → nécessité d'une bonne affinité
39
Localisation des chaines disulfures dans l'AC ?
* 1 entre les chaines légère
* (Au moins) 2 entre les chaines lourdes
40
Localisation du groupement glucidique de l'AC ?
Sur la portion Fc de la chaine lourde
41
Caractéristiques du paratope ?
Structure 3D complémentaire à celle de l'épitope
42
Autre nom du complexe "antigène-anticorps" ?
Complexe immun
43
Localisation des parties constantes sur les chaines lourdes et légères ?
C-terminal
44
Localisation des parties variables sur les chaines légères et lourdes ?
N-terminal
45
Quels sont les domaines de la chaine légère ?
→ 2
* VL → variable
* CL → constant
46
Quels sont les domaines des chaines lourdes ?
* 1 VH → variable
* 3/4 CH → constants
47
Quels sont les différents CH présents sur les chaines lourdes ?
* CH1
* CH2
* CH3
(* CH4 → seulement IgM/IgE)
48
Que permet la région charnière ?
Flexibilité de l'AC pour aller chercher un AG
49
Quelles sont les parties qui diffèrent entre les différentes classe d'AC ?
Les parties constantes de la chaine lourde
50
Localisation des ponts disulfures intracaténaires ?
Sur les chaines lourdes et légères
51
Que forment les pont disulfure intracaténaires ?
Des domaines → 80 AA environ
52
Nombre de domaines sur les chaines lourdes ?
4 ou 5 → IgM et IgE
53
Nombre de domaines sur les chaines légères ?
2
54
Autre nom de la partie constante des chaines lourdes ?
Fc → fraction cristallisable
55
Localisation précise de la glycosylation des AC?
Domaine CH2
56
Que permet la glycosylation des AC ?
* Elimination des complexes immuns
* Solubilité des Ig
* Augmentation de la demie-vie de des AC
57
Quelle est la fonction des parties constantes des AC ?
Reconnaissance des AG
58
Quelle est la fonction des parties constante des AC ?
Fonction effectrice → transmission du message
59
Comment varient les chaines lourdes des AC ?
Selon les différentes classes et sous classes d'immunoglobulines
60
Nombre d'AA qui constituent chaque chaine lourde ?
450 AA
61
PM de chaque chaine lourde ?
50 KDa
62
Comment sont reliée les chaines lourdes entre elles ?
Par 1 ou plusieurs liaisons COVALENTES → ponts disulfures
63
Variabilité des chaines légères ?
Nulle → pas de différence entre les différentes classes d'AC
64
Nombre d'AA constituants les chaines légères ?
220 AA
65
PM des chaines légères ?
25 KDa
66
Localisation des ponts disulfures sur les chaines légères ?
* Inter chaine → liaison aux chaines lourdes
* Intra chaine
67
Part des Chaines légères Kappa chez l'Ho ?
2/3
68
Part des chaines lambda chez l'HO ?
1/3
69
Définition des domaines globulaires ?
Chaque domaine pris individuellement
70
Définition des domaines fonctionnels ?
2 domaines face à face → Au même niveau sur 2 chaines
71
Quelles sont les particularité des LB ?
* Ig et AC sur leur surface
* Possède 10^5 BCR sur sa membrane
* Capable de reconnaitre un AG dans la circulation par BCR
72
Qu'est-ce que le BCR ?
Immunoglobuline membranaire
73
Comment avec 23 000 gènes nous parvenons à produire 1 à 2 milliards d'AC par jour ?
→ Théorie du réarrangement
74
Comment est ciblée la variabilité d'un AC par rapport à un autre ?
Sur la partie variable
75
Comment est formé la partie variable d'un AC ?
Par le réarangement des différents segments des gènes des AC → V, D et J
76
Localisation des gènes V,D et J des AC chez l'Ho ?
Xsome 14
77
Principe di réarrangements des gènes de la partie variable des AC ?
Ensemble de jonction entre 3 segments V, D (et J → chaine lourde)
78
Nombre de segments V ?
50aine
79
Nombre de segment D ?
25
80
Nombre de segments J ?
6
81
Comment se fait le réarrangement des gènes V, D et J ?
Choix d'un seg D → Collage à un seg J → Obtention réarrangement DJ → Choix seg V →Collage à seg DJ → Partie variable VDJ → Collage à Cµ
82
Quels sont les AC naturellement produit ?
IgM
83
Pourquoi les AC IgM sont les AC produit naturellement ?
Car on colle au segment VDJ le segment constant le + proche → Cµ
84
Différence entre le réarrangement des gènes VDJ pour les chaines lourdes et légères ?
* Même fonctionnement sauf que pour chaine légère → Seulement segment V et J
* V et J sont différents entre la chaine lourde et légère
85
Comment sont déterminer la classe et la sous classe d'un AC ?
Par la nature de la partie constante des chaines lourde
86
Qu'est-ce que l'isotypie ?
Chez tous les individus de la même espèces : classes et sous classes possèdent des caractéristiques communes
87
Quelles sont les classes d'Ig existantes ?
* IgG
* IgM
* IgA
* IgE
* IgD
88
Quel gène code pour les IgG ?
Gamma
89
Quel gène code pour les IgA ?
Alpha
90
Quel gène code pour les IgM ?
Mu (µ)
91
Quel gène code pour les IgE ?
Epsilon
92
Quel gène code pour les IgD ?
Delta
93
Quel sont les AC ayant des sous classes ?
* IgG
* IgA
94
Quelles sont les sous classe d'IgG ?
→ 4
* IgG1 → Chaine lourde γ1
* IgG2 → γ2
* IgG3 → γ3
* IgG4 → γ4
95
Quelle sont les sous classes d'IgA ?
* IgA1→ chaines lourdes α1
* IgA2→ α2
96
Caractéristiques des IgG ?
* Classe principale d'AC
* 1/2 vie plasmatique = 21 J → 3 semaines
* Concentration : 6 à 16 mg/mL
97
Qu'est-ce qui différencie les sous classe d'IgG ?
Les charnières → nb de ponts disulfures
98
Caractéristiques des IgA ?
* 2ème classe d'AC sérique
* Concentration = 1 à 4 mg/mL
* Demie-vie : 3 à 4 J
99
Sous quelles formes retrouve-t-on les IgA ?
* Monomère
* Dimère
100
Structure des IgA dimérique ?
2 parties liée par chaine J (et parfois pièce sécrétoire)
101
Pourquoi la forme dimérisée des IgA existe ?
Pour protéger les IgA des enzymes protéolytiques)
102
Localisation de la forme monomérique des IgA ?
Sérum
103
Localisation de la forme dimérique des IgA ?
* Sérum
* Sécrétion ++++
104
Caractéristique de la chaine J ?
* Peptide riche en cystéines
* 137 AA
* PM = 15 kDa
* Origine plasmocytaire
105
Différence entre les dimère d'IgA dans le sérum et dans les sécrétion ?
Dans les sécrétion chaine J + pièce sécrétoire !
106
Caractéristique de la pièce sécrétoire ?
* Glycoprotéine
* 70 kDa
107
Rôle de la pièce sécrétoire ?
Protection de IgA contre les enzyme protéolitiques
108
Quand se fait l'ajout de la pièce sécrétoire sur les IgA ?
Durant son transfert à travers la cellule épithéliale
109
Comment les IgA sont captés par les cellules épithéliale ?
Par un récepteur poly → plgR
110
Quelles sont les formes existante d'IgM ?
* Monomérique
* Pentamérique
111
Localisation de la forme monomérique des IgM ?
Surface de la membrane des LB
112
Localisation de la forme pentamérique des IgM ?
Dans le sérum → Forme sécrété par les plasmocytes
113
Comment se fait la forme pentamérique de l'IgM ?
* 5 mono reliés par ponts disulfures
* Chaine J à l'extrémité de 2 monomères
114
Caractéristiques des IgM ?
* Concentration : 0,5 à 3,5 mg/mL
* Demie vie : 3 à 4 J
115
Par des IgD parmi les immunoglobulines sériques ?
- de 1%
116
Caractéristiques de IgD ?
* Coexprimés à la surface des LB
* Concentration : 20 à 50 µg/mL
* demie-vie : 3/4 J
117
Rôle des IgD ?
HYPOTHESE :
Charnière hyperflexible permet la recherche des AG très espacés ou très rapprochés
118
Caractéristiques des IgE ?
* Défense parasitaire
* Concentration : 10 à 100 ng/mL
119
Rôle (actuellement en France) es IgE ?
Allergie (→ Ils s'ennuient car plus de parasites)
120
Variation des ponts disulfures des au niveau des charnières des IgG ?
2 à 11 ponts disulfures
121
Part des différents IgA ?
* IgA1 → 90%
* IgA2 → 10%
122
Différence entre IgA1 et IgA2 ?
Absence de pont disulfure entre chaine lourde et légère pour l'IGA2
123
Comment IgA s'adapte pour réduire se vulnérabilité au protéase microbienne ?
* IgA1 → Charnière fortement glycosysée
* IgA2 → région charnière tronquée
124
Rôle des IgG ?
* Défense de l'organisme contre les maladies infectieuses
125
Pourquoi la part des IgG est si importante dans le cadre de la grossesse ?
La mère est capable de transmettre les IgG&, 3 et 4 pour protéger l'enfant après sa naissance jusqu'à 4 mois
126
Rôles des IgG1, 3 et 4 ?
Défense du fœtus et nourrisson contre l'infection
127
Propriété biologique des IgA ?
* Classe principale des AC dans les sécrétion
* Première ligne de défense locale contre les agents infectieux
128
Quelles sont les sécrétions où sont présentes les IgA ?
* Salive
* Larmes
* Lait
* Sécrétions muqueuse
129
Propriété biologique des IgM ?
* 1er AC synthétisés
* AC faible affinité
* AC naturelles
* Présence transitoire
* Diagnostic des primo-infection
130
Propriété biologique des IgD ?
* Surface des cellules des cellules B (avec IgM)
* Faible concentration dans le sérum
131
Propriété biologiques des IgE ?
* Etat de trace dans le sérum
* Rôle bénéfique dans l'immunité antiparasitaire
* Néfaste dans les allergie de type I
132
Quelles sont les isotypie (Ig) ?
Classes + sous classes d'Ig qui possède des caractères propres dans une espèce donnée → ce sont les isotypes
133
Où se trouve les isotope des Ig ?
Sur la partie constante des chaines lourde et légère (IgA, IgG, IgM...)
134
Qu'arrive-t-il s'il on injecte des isotope d'une espèce à une autre espèce ?
Entraine la synthèse d'AC anti-isotypes
135
Qu'est-ce que l'allotypie (Ig) ?
Variation génétique entre les individus au sien d'une même espèce (2 IgG mais pas même génétique)
136
Localisation des allotypie chez l'Ho ?
Domaines constant des chaines lourds et légers
137
Qu'est-ce que l'idiotypie ?
Variabilité associée au site d'AG
138
Localisation de l'idiotypie ?
Partie variable des chaine lourdes et légères
139
Où se fait la synthèse des chaines lourdes et légères ?
Les 2 sont synthétiser dans le RE
140
Où sont associées les chaines lourdes et légères ?
Dans le RE
141
Où se fait la glycosylation des AG ?
Vésicules golgiennes
142
Que se passe-t-il après la glycolisation des Ig ?
Ils sont soit dirigés vers :
* La sécrétion
* La membrane
143
Rôle de la partie variable de l'AC ?
Reconnaissance de l'AG
144
Rôle de la partie variable de la partie constante de l'AC ?
Fonction effectrice
145
Où sont situées les plus grandes variation génétiques des Ig ?
Au niveau des CDRs (1, 2 et 3) de la région variable de la chaine lourde
146
Comment se fait l'interaction AG-AC ?
Par une réaction réversible et une réaction spécifique
147
Pourquoi la réaction AG-Ac est réversible ?
Car le complexe formé tient par des liaisons de faible énergie → Rompue par des variantions des paramètres physisco-chimiques
148
Quels sont les paramètres capable de brisée les liaisons faibles ?
* pH
* T°
* Force ionique
149
Que forme l'interaction AG-AC ?
Un complexe AG-AC
150
Pourquoi la réaction AG-AC est spécifique ?
1 paratope pour 1 épitope
151
Quels sont les buts d'utilisation des propriétés des complexes immun en laboratoire ?
* Méthode qualitative : détection AG-AC
* Méthode quantitative : Dosage AG-AC
152
Quelles sont les méthodes qualitative ou quantitative réalisable sur les AG et AC ?
Détection d'un signal visible
* Directement → précipitation
* Indirectement
153
Quelles sont les méthode indirecte de détection d'un signal visible pour doser/qualifier les AG et AC ?
* Marqueur radio-isotypique
* Marqueur enzymatique
* Marqueur fluorescent
154
Quelles sont les grandes fonctions biologiques des AC ?
1) Neutralisation de l'AG
2) Opsonisation
3) Activation du complément
→ élimination du pathogèneC
155
Comment l'AC participe à l'opsonisation ?
Fixe l'AG et facilite sa tâche pour être phagocyté
156
Quelles sont les molécules qui ont permis d'élucider la relation entre la structure et la fonction de l'AC ?
Enzymes protéolytiques
* Papaïne
* Pepsine
* Béta mercapto éthanol
157
Qu'arrive-t-il quand on met des AC en présence de leur AG spécifique ?
Immunoprécipitation
158
Que se passe-t-il lorsque que l'on traite les AG avec le β-mercapto éthanol ?
Cassage des pont disulfure
159
Qu'obtient on après avoir traité les AC avec du β-mercatpo éthanol ?
2 pic chromatographique :
→ 1 = chaines lourdes : 50 kDa
→ 1 = Chaines légères : 25 kDa
160
Que sa passe-t-il lorsque l'on place les AC traités au β-mercapto éthanol avec leur AG spécifique ?
Il n'y a pas de fixation, il n'y a pas d'immunoprécipitation
161
Sur quelle partie de la structure des AC la papaïne agit ?
Les charnières → Coupe au dessus des ponts disulfures qui relient les 2 chaine H
162
Qu'obtient on lorque l'on traite des AC avec de la papaïne ?
→ 3 fractions :
* 2 segments Fab
* 1 segment Fc
163
Que veut dire Fan ?
Fraction antigène binding
164
Que veut dire Fc ?
Fraction cristalisable
165
Que sont les fragment Fab ?
1 chaine légère + 1 fragment de la chaine lourde → se fixent à l'AG
166
Qu'est-ce que le fragment Fc ?
Moitié C-ter de la chaine lourde → fonctions liées à la classe ou la sous classe
167
Que se passet-t-il lorsque l'on met des AC traité à la papaïne en présence de leur AG spécifique ?
Il y a fixation mais pas d'immunoprécipitation
168
Action de la pepsine sur les AC ?
Coupe l'AC en dessous du/des ponts disulfure qui relient les chaines H
169
Qu'obtient on après l'action de la pepsine sur les AC ?
* 1 gros fragment (Fab')2 = 2 fragments Fab
* 2 produits de dégradation du fragment Fc
170
Que se passe-t-il lorsque l'on met des AC traité à la pepsine en présence de leurs AG spécifiques ?
Il y a fixation, il y a immunoprécipitation
171
Qu'est-il nécessaire pour obtenir une immunoprécipitation ?
Avoir les 2 fragments Fab → (Fab')2
172
Que produit un organisme en présence de fragment Fc étrangers ?
Des AC anti-fragments Fc
173
Que produit un organisme en présence de fragment Fab étrangers ?
Des AC anti-fragment Fab
174
Contre quoi sont produits les AC utilisé dans le cadre de la dégénérescence de la macula liée à l'âge ?
Ce sont des AC anti-VEGF (seulement fragment Fab)
175
Qu'est-ce que la macula ?
Zone qui donne la viqion
176
Part de la population touchée par la dégénérescence de la macula liée à l'âge ?
1/3
177
Quel est la molécule responsable de la dégénérescence de la macula liée à l'âge ?
Une cytokine : VEGF → facteur de croissance de l'épithélium vasculaire
178
Fab est un inhibiteur ou activateur ?
Activateur
179
Fc est un inhibiteur ou un activateur ?
Inhibiteur
180
Que signifit Fc ?
Fonction cristalisable
181
Que comprenne les régions constantes des AC ?
La faction Fc et une partie de la fraction Fab
182
Que comprennent les régions variables d'un AC ?
Une PARTIE de la région Fab
183
D'où viennent les notion de valence, affinité et avidité ?
L'AC ne peut précipiter des AG ayant plusieurs sites de liaisons avec lui
184
Qu'est-ce que la valence d'un AC ?
Nombre de site de liaison par molécule d'AC sur un AG
185
Qu'est-ce l'affinité d'un AC ?
La force d'interaction d'un épitope avec un paratope
186
Qu'est-ce que l'avidité ?
La force globale de liaison d'une molécule d'AC avec un AG
187
Quel est le meilleur AC ?
Celui qui a une super affinité avec l'AG
188
Qu'est-ce l'affinité (en général) ?
Force des interaction non covalente entre un site de fixation d'AG sur un suel site de fication d'AC
189
Qu'est-ce qui détermine l'affinité d'un AC ?
Sa constante d'association Ka
190
Valeur du Ka d'un AC de faible affinité ?
10^4 à 10^5 L/mol
191
Valeur de Ka D'un AC de forte affinité ?
10^9 à 10^11 L/mol
192
Qu'est-ce que l'avidité d'un AC ?
La force d'interaction multiple d'un AC multivalent avec un AG
193
Qu'est-ce que l'affinité de l'AC
Force des interactions non covalentes entre un site de fixation d'AG sur un seul site de fixation d'AC
194
Nombre d'épitope sur un AG ?
1 à des milliers → mosaïque d'épitopes
195
Que sont les AC polyclonaux ?
Mélange d'AC reconnaissant un AG donnée
196
Origine des AC polyclonaux ?
Chaque AC est sécrété par un clone de plasmocyte différent
197
Que sont les AC monoclonaux ?
AC ne reconnaissant qu'un seul type d'épitope sur un AG donné
198
Origine des AC monoclonaux ?
Identique → issus d'un même clone de plasmocyte
199
Quelles sont les caractéristiques des AC polyclonaux ?
Entre eux :
* Affinité différente
* Immunogénicité différente
* Notion linéaire et conformationnelle
* Concentration différente
* Réaction croisée entre les AC
200
Quelle est la nature de la réponse immunitaire in vivo (polyclonale ou monoclonale) ?
Polyclonale SAUF vaccination
201
Que reconnaissent les AC polyclonaux ?
Les différent épitopes d'un même AG
202
Utilisation des AC monoclonaux en biologie et en médecine ?
Outils diagnostic et buts thérapeutique
203
Que signifie "mab" ?
Monoclonal antibody
204
DCI chimérique ?
- ximab
205
DCI humanisés ?
-zumab
206
DCI humain ?
-umab
207
Pourquoi les AC murins ne fonctionnent pas bien ?
Une fois injecté chez l'Ho ils sont détruit par les AC
208
Utilisation spécifique des AC monoclonaux ?
* Test de grosses
* Ttt des hémopathies malignes
* ttt pathologies auto-immune
* Recherche biologie (western blot, ELISA, cyrtométrie ...)
209
Quel sont les molécules utilisées pour générer des AC monoclonaux ?
Hybridomes : LT + myélome
210
Taux de fusion des cellules de rate et myélome ?
1/10^5 cellules → Très faible → production d'AC monoclonaux difficile
211
Comment sont produits les AC monoclonaux aujourd'hui ?
Par génie génétique
