Diagnóstico microbiológico Flashcards
Medios de agar cromogénicos
Estos medios de cultivo contienen sustancias cromógenas que cuando son hidrolizadas por enzimas microbianas específicas producen compuestos coloreados. En la actualidad se comercializan varios medios cromogénicos que permiten la identificación presuntiva de variadas especies bacterianas y de hongos, tales como: cromoagar para vibriones, cromoagar para infecciones de orina y cromoagar para diferentes especies de Candida, entre otros
Batería bioquímica: identificación de bacilos Gram (-)
Existen un conjunto de medios de cultivo que son muy usados para la identificación de bacilos Gram (-), principalmente enterobacterias. La siembra de esta batería de pruebas bioquímicas debe realizarse a partir de colonias aisladas. Después de 18-24 horas de incubación se efectúa la lectura y mediante una tabla es posible interpretar los resultados e identificar género y especie (no siempre es posible identificar especie por este método). Las principales pruebas son: agar TSI, agar LIA, medio MIO, agar citrato y agar urea.
TSI (Triple-Sugar-Iron Agar)
• Permite estudiar la capacidad de producir ácido y gas a partir de glucosa, lactosa y sacarosa. • Si la bacteria produce H2S se evidencia por la presencia de un precipitado negro. Lo que ocurre en un medio ácido. • Si la bacteria produce gas se observa como burbujas en el fondo del tubo.
LIA (Lysine-iron-agar)
• Permite diferenciar los microorganismos que producen descarboxilación o desaminación de la lisina. • Se puede detectar también la producción de H2S y la producción de gas.
MIO (Movilidad-indol-ornitina)
• Es un medio semisólido. • Permite evidenciar la movilidad, la producción de indol (derivado de la utilización del aminoácido triptófano) y la descarboxilación de ornitina.
Urea
• Contiene urea y rojo fenol como indicador. Si el bacilo Gram negativo posee la enzima ureasa, degrada la urea produciendo amonio el cual alcaliniza el medio y éste vira a rosado.
Citrato
• Permite evidenciar el uso de citrato por parte de la bacteria, como única fuente de carbono.
DETECCIÓN DIRECTA MEDIANTE MÉTODOS TRADICIONALES
Paciente-toma de muestra y transporte-observación microscópica directa-cultivo-identificación (observación microscópica, pruebas fisiológicas/bioquímicas, serotipificación)-estudio de susceptibilidad antimicrobianos
CATALASA:
Es una enzima que contiene un grupo heme como grupo prostético y que, en presencia de peróxido de hidrógeno, cataliza que el H2O2 se desdoble en agua y oxígeno, con el consiguiente desprendimiento de burbujas.
SUSCEPTIBILIDAD A OPTOQUINA (DISCOS DE 5 ug):
Esta prueba emplea un antibiótico cuyo empleo es sólo como diagnóstico en el laboratorio. Cepas de Streptococcus pneumoniae son sensibles a este antibiótico.
COAGULASA:
Enzima que es capaz de coagular el plasma humano citratado o de conejo. Esta enzima activa la protrombina del plasma produciendo en consecuencia un coágulo de fibrina.
HEMOLISINAS:
Enzimas que destruyen los glóbulos rojos (lisis), liberando la hemoglobina. - hemólisis (total): Ej.: Streptococcus pyogenes - hemólisis (parcial): Ej.: Streptococcus pneumoniae - hemólisis (no hemólisis): Ej.: Enterococcus spp.
CRECIMIENTO E HIDRÓLISIS DEL AGAR BILIS-ESCULINA:
Interpretación: Streptococcus grupo D y Enterococcus, crecen en un medio con concentración alta de bilis (5%). Por otro lado, se observa su acción sobre la esculina que se transforma en esculetina, la cual reacciona con los iones férricos del medio formando un complejo de esculetina-fierro de color negro o café.
PYR-A:
Discos para el diagnóstico rápido de Streptococcus pyogenes y Enterococcus spp. La prueba PYR es positiva para Streptococcus pyogenes y Enterococcus. Positivo: disco color rosado a rojo. Negativo: disco y/o solución color amarillo a incoloro.
Pruebas bioquímicas en formato de galerías multiprueba de lectura visual.
Actualmente se pueden realizar un gran conjunto de pruebas bioquímicas en paralelo en un tipo de formato denominado galería de multiprueba. Estas galerías contienen entre 10-50 celdillas con medios de cultivo liofilizados y cada celdilla diseñada para cuantificar una prueba bioquímica diferente. Cada celdilla debe ser inoculada individualmente con un cultivo estandarizado según instrucciones del fabricante.
