Le Système HLA Flashcards
Le ____________ est le résultat d’une réponse immunitaire contre des antigènes de transplantation ou d’histocompatibilité exprimés à la surface cellulaire de l’organe greffé.
rejet de greffe
On appelle __________ un tissu transplanté toléré par le receveur.
histocompatible
Deux tissus histocompatibles sont dit _____________________.
antigéniquement semblables
Un groupe d’antigène de transplantation très immunogènes et très polymorphes est qualifié de majeur vu son ________________ et ________________.
- Rapidité du rejet;
- Forte réponse allogénique humorale et cellulaire entre individus incompatibles lors d’une greffe.
Les antigènes de transplantation majeur font partie d’un système appelé ________________.
Complexe Majeur d’Histocompatibilité (CMH)
Les CMH existe chez tous les vertébrés. (V/F)
V
Les produits du CMH ou molécules HLA ont pour fonctions essentielles: ___________________et ______________________.
- Education des thymocytes:
Sélection des lymphocytes T capables de reconnaitre un peptide antigénique associé à une molécule HLA;
Elimination des lymphocytes T autoréactifs;
-Contribution à la réponse immunitaire.
Les produits du CMH contribuent à la réponse immunitaire _________________ en ____________ et ____________ en _______________.
- Adaptative : Présentation de peptides immunogènes aux lymphocytes T à TCRαβ;
- Innée: Régulation de la cytotoxicité des cellules NK.
Les molécules du CMH jouent un rôle essentiel dans l’immuno-suveillance lors des ____________ et ____________.
infections;
transformations malignes.
L’expression du CMH (I/II) est restreinte aux cellules présentatrices d’antigènes.
CMH II
L’expression du CMH (I/II) est ubiquitaire chez les cellules nuclées.
CMH I
Structure du CMH I: __________________________________.
Chaîne alpha (α) et une chaîne bêta-2 microglobuline (β2M);
La chaîne alpha comporte trois domaines : l’α1, l’α2, et l’α3.
Structure du CMH II: __________________________________.
Deux chaînes, alpha (α) et bêta (β);
La chaîne α comporte deux domaines : l’α1 et l’α2, tandis que la chaîne β comporte deux domaines : le β1 et le β2.
Les régions de codage pour les complexes majeurs d’histocompatibilité (CMH) de classe I et de classe II se trouvent sur le chromosome __ chez les humains.
06
Les gènes codant pour les chaînes alpha du CMH de classe I se trouvent dans le locus du CMH de classe I, également connu sous le nom de région ______, ______, _________chez les humains.
HLA-A, HLA-B, HLA-C
Les gènes codant pour les chaines du CMH-II: ______, ______, _____, ________.
DP, DM, DQ, DR.
Les antigènes HLA impliqués dans l’appariement du greffons sont principalement: ______, ______, ________, _______.
A, B, DRβ1 et DQβ1.
La probabilité pour deux enfants d’une même fratrie d’être HLA identiques est de __%.
25%
La probabilité pour deux enfants d’une même fratrie d’être HLA semi-identiques est de __%.
50%
La probabilité pour deux enfants d’une même fratrie d’être HLA différents est de __%.
25%
Dans la transmission d’haplotype HLA, la probabilité de crossing over entre A et B est de __%.
0.8%
Dans la transmission d’haplotype HLA, la probabilité de crossing over entre DR et B est de __%.
01%
Au total, un individu hétérozygote peut exprimer __ à __ molécules HLA.
12 à 14
Au total, un individu hétérozygote peut exprimer 12 à 14 molécules HLA: _______, _______, ____, ____, _____, _______.
2 molécules HLA-A, 2 HLA-B, 2 HLA-C, 2 à 4 DR, 2 DQ, et 2 DP.
Le phénotype ________ se réfère à un type spécifique de profil génétique impliquant les gènes HLA (Human Leukocyte Antigen) et le gène IFN (Interferon).
HLA IFN
Le polymorphisme extrême du CMH s’explique par _________________ et ______________.
*Nombre de loci: 6 séries alléliques : A, B, C, DR, DQ, DP;
*Nombre élevé de formes alléliques (reflet de différences nucléotidiques) à chaque locus.
Les _____________sont des fragments d’antigènes qui sont spécifiquement reconnus par le système immunitaire d’un individu donné, souvent en raison de sa configuration HLA unique.
épitopes privés
Les __________sont des fragments d’antigènes qui sont reconnus de manière similaire par le système immunitaire de plusieurs individus, indépendamment de leurs caractéristiques génétiques HLA individuelles.
épitopes publics
Les ________________ sont une méthode utilisée en immunologie pour subdiviser les antigènes HLA en groupes sérologiques en fonction de la réactivité des anticorps dans les tests sérologiques de typage HLA.
splits sérologiques
Il existe environs __ spécificités sérologiques HLA.
100
La méthode d’amplification PCR pour les HLA de classe I cible généralement les exons __ et __.
2 et 3
Les différents types de techniques utilisées dans le typage HLA, basées sur la PCR: __________, _________, ___________.
–PCR-SSO (PCR-sequence specific probes);
–PCR-SSP(PCR-sequence specific primers);
–PCR-SBT(Sequence Based Typing).
Il existe ________ allèles HLA I recensés en 2017.
11553
Il existe ________ allèles HLA II recensés en 2017.
4082
Le polymorphisme est important surtout sur les locus _______ et ________.
HLA-B (4459);
HLA-DRB (1977).
Le Nombre de combinaisons possibles d’allèles de classe I et II dépasse ___.
10^19
_________________décrit la tendance des allèles HLA spécifiques à être hérités ensemble plus fréquemment que ce à quoi on s’attendrait de manière aléatoire.
Le déséquilibre de liaison
_______________ et ___________ sont des facteurs influençant le déséquilibre de liaison.
Ethnicité;
Proximité génétique (D’autant plus forts que les loci sont proches).
Le déséquilibre de liaison est très fort entre ____ et ______.
DR et DQ
Exemples: (DQ2 avec DR7, DR9, DR17), (DQ4 avec DR4, DR8, DR18)
Le déséquilibre de liaison est un marqueur utile en ______________.
anthropologie
La nomenclature HLA en sérologie: ____________________.
HLA + lettre précisant le locus + numéro spécifique
Exemple: HLA A2
La nomenclature HLA en biologie moléculaire: __________________.
Lettre précisant locus + Numéro du motif générique + numéro du motif allélique
Exemple: A 02:01
Il existe deux typages en biologie moléculaire pour le système CMH: ___________ et ____________.
Définition générique à basse résolution (02 digits);
Définition allélique à haute résolution (04 digits).
La définition générique est utilisée pour ___________________ et _____________.
Transplantation d’organes;
Sélection des donneurs de CSH apparentés.
La définition allélique est utilisée pour ________________________.
Sélection des donneurs de CSH non apparentés.
Les conséquences du polymorphisme HLA: ________________, _______________, ________________.
- Grande diversité de molécules HLA = Capacité de présentation d’un grand nombre de peptides = meilleure défense contre les pathogènes;
- Déclenchement d’une réponse proliférative et cytotoxique très violente entre individus HLA incompatibles lors d’une allogreffe;
- Phénomènes d’allo-immunisation anti HLA (transfusion grossesse, transplantations antérieures.)
Les domaines __ des molécules HLA I, les domaines __ et __des molécules HLA II et _____ se replient de façon conventionnelle à celle de la famille des Ig (2 feuillets β plissés à 4 et 3 brins antiparallèles stabilisés par un pont S-S).
α3;
α2 et β2;
β2m.
Les domaines α3 des molécules HLA I, les domaines α2 et β2 des molécules HLA II et β2m se replient de façon conventionnelle à celle de la famille des Ig (______________________________).
2 feuillets β plissés à 4 et 3 brins antiparallèles stabilisés par un pont S-S
Le gène codant pour HLA I contient ___ exons séparés par __ introns.
8 exons;
7 introns.
Le polymorphisme de séquences de HLA I concentré dans les exons __ et __.
02 et 03 (domaines α1 et α2)
La bêta-2-microglobuline (β2m) est codée par un gène distinct appelé le gène B2M, situé sur le chromosome __ chez les humains.
15
Le domaine α1 du HLA I est codé par __________.
Exon 2
Le domaine α2 du HLA I est codé par __________.
Exon 3
Le domaine α3 du HLA I est codé par __________.
Exon 4
Le domaine transmembranaire (TM) du HLA I est codé par __________.
Exon 5
Les molécules HLA de classe I et II sont des _____________________apparentées par leur structure et leur fonction.
glycoprotéines membranaires
Les molécules HLA de classe I et de classe II sont des _________.
dimères
Les molécules HLA appartiennent à la superfamille des _______________.
immunoglobulines
La molécule HLA I comporte une __________ de __kDa, codée par les gènes __, __, __.
chaîne lourde α;
44 kDa;
A, B, C;
La chaîne lourde α de la molécule HLA I est reliée de façon __________ à une chaine _______, _________ et __________: _______________.
non-covalente;
chaine légère, invariante, non glycosylée;
β2microglobuline.
La β2microglobuline possède __ domaines extracellulaires.
01
La chaîne α est une glycoprotéine transmembranaire polymorphe, organisée en ______________________, une __________________ et une _______________________.
3 domaines extracellulaires α1, α2 et α3;
partie transmembranaire;
courte queue intracytoplasmique.
Les molécules HLA II sont des glycoprotéines transmembranaires composées d’une _____________ codées par des gènes _____________ et d’une ____________, codée des gènes ______________, associées d’une façon ___________ à la membrane cellulaire.
chaîne lourde α;
A (DRA1 ; DQA1 ; DPA1);
chaîne légère β;
B : (DRB1; DQB1; DPB1);
non covalente.
Structure HLA II
Chaque chaîne est organisée en domaines : __________________ et _________________, un domaine _________________et un domaine ____________________.
2 domaines externes α1, α2;
2 domaines externes β1, β2;
hydrophobe transmembranaire;
intracytoplasmique C terminal.
Les molécules HLA de classe I et de classe II possèdent une cavité de _____________.
liaison peptidique
Les domaines __________ du HLA I forment la cavité de liaison peptidique.
α1 et α2
Les domaines __________ du HLA II forment la cavité de liaison peptidique.
α1 et β1
La cavité de liaison du peptide antigénique des molécules HLA est constituée par une plate-forme de __ brins antiparallèles encadrés de deux hélices __.
8;
α.
La cavité de liaison est une fente de __ de longueur et __ de largeur.
25 Å de long;
10 Å de large.
La cavité de liaison est en permanence occupée par un ______________.
peptide du soi
Les différents résidus peptidiques vont interagir par l’intermédiaire de liaisons ____________ soit avec la molécule HLA soit avec le récepteur des lymphocytes T (TCR).
hydrogènes
Pour les molécules HLA de classe I, les domaines __ et la ____________ juxta membranaires maintiennent la conformation de la molécule à la membrane.
α3 et β2 microglobuline
Le domaine α3 de la molécule HLA I porte un site d’interaction avec la molécule ____ des lymphocytes T cytotoxiques.
CD8
Pour les molécules HLA de classe II, les domaines __ et __juxta membranaires maintiennent la conformation de la molécule à la membrane.
α2 et β2
Le domaine β2 de la molécule HLA II porte un site d’interaction avec la molécule
___ des lymphocytes T helper.
CD4
Les domaines α1 α2 des molécules HLA de classe I délimitent une ________, qui fixe un peptide d’environ __ acides aminés.
poche close;
09
Les domaines α1β1 des molécules HLA de classe II délimitent une ________aux extrémités, qui fixe des peptides plus superficiels et plus longs de __ à __ acides aminés, qui dépassent les deux extrémités de la cavité de liaison.
poche ouverte;
13 à 25
La liaison des peptides aux molécules HLA se fait par des _________________.
résidus d’ancrage
Pour les molécules HLA de classe I, il existe ___ points d’ancrage du peptide situés dans la poche liant fortement les acides aminés en position _ et _.
02;
2 et 9.
Les résidus d’ancrage assurent la ________ et _________de l’association avec la molécule HLA I.
spécificité et la stabilité
La partie centrale entre les acides aminés 2 et 9 est variable d’un peptide à l’autre et interagit avec la partie centrale du ___.
TCR
Pour les molécules HLA de classe II le peptide interagit, surtout, au niveau de la cavité par le biais de __ ou __ résidus ancrés, situés dans la partie ______ du peptide, dont les _________ plongent dans les poches au fond du sillon.
3 ou 4;
centrale;
chaînes latérales.
Pour les molécules HLA II, les chaines du peptide dirigées vers le haut en position 4 et 5 en particulier interagissent avec le peptide. (V/F)
F: Elles interagissent avec le TCR.
Le polymorphisme des molécules HLA est porté par les domaines ___________.
externes
La variabilité des séquences d’acides aminés à l’origine du polymorphisme qui caractérise les molécules HLA est localisée principalement au niveau des __________ et du __________ constituant le site de liaison du peptide.
hélices et du plancher
Le polymorphisme des molécules HLA A, B et C est au niveau des domaines _________codés par les exons __ et __ des gènes A, B et C.
α1α2;
2 et 3.
Pour les molécules HLA de classe II, le polymorphisme est au niveau des domaines ___ et ___ des deux chaînes (DQ, DP) et le domaine __ de la chaîne β (DR).
α1 et β1;
β1.
Les molécules HLA de classe I sont exprimées à la surface de la plupart de cellules nucléées de l’organisme. (V/F)
V
Les molécules HLA de classe I sont exprimées chez toutes les cellules sanguines sauf __________.
hématies
Il y a très peu d’expression des molécules HLA I sur les cellules du système nerveux central. (V/F)
V
Les molécules HLA __, peu exprimées en surface, sont essentielles dans le processus de reconnaissance des cibles des lymphocytes NK.
C
Les _________ et __________ augmentent l’expression des molécules HLA I.
interférons INF α et β
Les molécules HLA de classe II ont une expression restreinte à ________, _______, __________.
CPA (LB, cellules dendritiques, monocytes)
Sous l’influence de cytokines comme l’_______, _______, _______,_________ ou le _________ et ________, de nombreuses cellules parenchymateuses et les lymphocytes T peuvent synthétiser et exprimer des molécules HLA de classe II.
interféron γ;
IL-4;
IL-13;
GM-CSF;
TNFα;
TNFβ.
Les molécules HLA I présentent des peptides dérivés par protéolyse de protéines d’origine _______, ________ ou ________.
endogène;
du soi (constituants normaux de la cellule);
protéine virale.
HLA I - Transport et association au peptide
Les protéines sont dégradées dans le cytoplasme par des complexes d’enzymes protéolytiques appelés ___________________en peptides d’environ _____ acides aminés.
protéasomes (LMP2, LMP7);
09.
HLA I - Transport et association au peptide
Les AA sélectionnés sont transportés vers le RE par un système transporteur de peptide ____________.
TAP1 et TAP2
HLA I - Transport et association au peptide
Les peptides sont activement introduits dans les cavités du peptide formées par les domaines ___ et ___de la chaine lourde, l’ensemble stabilisé par ___________.
α1 et α2;
β2 microglobuline.
HLA I - Transport et association au peptide
Il y aura ____________ de la chaine __ dans l’appareil de Golgi et enfin expression de la molécule à la membrane.
glycosylation;
α1.
Les molécules HLA II présentent des peptides d’origine _________.
exogène
HLA II - Transport et association au peptide
Les molécules HLA de classe II sont associées à l’intérieur de la cellule à une ___________ codée par un gène situé sur le chromosome __.
chaîne invariante li;
5.
HLA II - Transport et association au peptide
La chaîne invariante li empêche la ______________________.
fixation de peptide dans la cavité α1 β1
HLA II - Transport et association au peptide
Après glycosylation dans l’appareil de Golgi, les molécules HLA II sont transportées dans le compartiment des _________ ou compartiment des molécules de classe II.
endosomes
HLA II - Transport et association au peptide
Au niveau des endosomes, il y a dissociation de la chaine Li due au ___________.
pH acide
HLA II - Transport et association au peptide
La dissociation de la chaine Li laisse place à un __________qui est remplacé par l’action des molécules ____ et _____ par un autre peptide.
peptide CLIP;
HLA DM et HLA DO.
HLA II - Transport et association au peptide
Une fois le peptide fixé, les molécules HLA de classe II stabilisées sont exportées à la surface des _____.
CPA
Le complexe peptide/CMH est reconnu par le récepteur à l’antigène des _______________pour former le trio moléculaire TCR-PEPTIDE-CMH.
lymphocytes T
La reconnaissance du TCR du complexe peptide/CMH est restreinte par ________.
CMH
Les complexes molécules HLA de classe I/peptide d’origine endogène sont reconnus par les _________________________.
lymphocytes cytotoxiques TCD8+
L’interaction TCD8+/peptide/CMH induit ______________.
lyse cellulaire
Les complexes molécules HLA de classe II/peptide d’origine exogène sont reconnus par les ____________________.
lymphocytes auxiliaires TCD4+
Le typage HLA est indiqué : _________________, _______________, _______________, ___________________.
- En transplantation pour la sélection donneur- receveur d’organes ou de moelle osseuse ;
- En transfusion ;
- En anthropologie pour l’étude des populations ;
- Pour la recherche d’associations ou liaisons avec certaines maladies.
Le typage HLA peut se faire par : _____________________ ou ____________________.
- Techniques sérologiques qui permettent de définir les spécificités HLA ;
- Techniques de biologie moléculaire qui permettent de définir les allèles HLA.
La technique de ___________________ introduite par TERASAKI et Mc CLELLAND en 1964 est la technique sérologique de référence pour la détermination des antigènes HLA de classe I (A, B, C) et de classe II (DR, DQ).
Microlymphocytotoxicité (LCT)
Microlymphocytotoxicité - Principe
Incuber les cellules du sujet à typer préalablement isolés avec une batterie d’___________ ou d’______________ anti-HLA de classe I ou de classe II de spécificité anticorps connue (Ac) en présence de ____________ utilisé en excès en vue de lyser les cellules portant l’antigène correspondant au sérum utilisé.
alloanticorps;
anticorps monoclonaux;
complément de lapin (C).
Microlymphocytotoxicité - Principe
Pour un typage HLA de classe I on utilise _____________ ou ____________.
Cellules mononuclées;
Lymphocytes T du sang périphérique.
Microlymphocytotoxicité - Principe
Pour un typage HLA de classe II on utilise ____________________.
lymphocytes B du sang périphérique
Microlymphocytotoxicité - Principe
La détection se fait après addition, soit d’un _______________ soit d’un _________________
colorant vital (bleu trypan, éosine);
colorant fluorescent (mélange acridine orange /éthidium bromide).
Microlymphocytotoxicité - Principe
La proportion de cellules vivantes et de cellules mortes est évaluée à l’aide d’un __________________________ ou d’un ________________________.
microscope inversé à contraste de phase;
microscope inversé à fluorescence (Gx10).
Microlymphocytotoxicité - Principe
Avec du bleu trypan, les cellules mortes apparaissent ________ et les cellules vivantes __________.
bleues;
réfringentes
Les techniques de biologie moléculaire ont en commun une étape d’________________ par PCR de l’ADN cible.
amplification enzymatique
La mise en évidence du polymorphisme HLA peut se faire par deux techniques principales de biologie moléculaire : La __________ et _____________.
PCR-SSO et PCR-SSP
PCR - SSO - principe
L’ADN amplifié est déposé sur un support solide (membrane de nitrocellulose) selon la technique de ___________et ensuite hybridé avec des sondes _______________marquées capables de détecter des différences de séquences entre allèles ou groupes d’allèles.
« Dot Blot »;
oligonucléotidiques
PCR - SSO - principe
L’hybridation est révélée par _____________ et ________________.
colorimétrie et émission de fluorescence
PCR - SSP - principe
Méthode de typage basée sur la spécificité de l’______________ au cours de la PCR plutôt que sur l’hybridation d’oligosondes.
extension des amorces
PCR - SSP - principe
Le typage est déterminé par la présence ou l’absence du produit de PCR visualisé sur _________ avec de l’___________sous ____.
gel d’agarose;
éthidium bromide;
UV.
