TECNICAS INMUNO Flashcards

1
Q

q es especificidad?

A

proporción de negativos que hay en el grupo de los que no padecen de la enfermedad.

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2
Q

inmunodifusion?

A

es una tecnicca de precipitacion.
Es la difusión de un antígeno y un anticuerpo en un gel, que cuando se unen forman una línea de precipitación visible. Es muy utilizada para diagnóstico de micosis sistémicas endémicas. En el orificio central está el antígeno, y en los laterales hay distintas muestras con distintas [] de anticuerpos. Si está la línea de precipitación la prueba es
positiva.

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3
Q

q es inmunoelectroforesis?

A

es una técnica cualitativa que permite identificar diferentes componentes proteicos presentes en distintas muestras. Es útil para determinar el contenido de mezclas complejas de antígenos.
1- Se hace un orifico para la mezcla de antígenos en el gel.
2- Esto es sometido al campo de electroforesis, haciendo con que los antígenos se separen (positivos y negativos).
3- Se hace un canalillo para el anticuerpo.
4- Luego de la difusión se formaran líneas de precipitación, indicando patrones que pueden ser interpretados posteriormente

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4
Q

hablar de TECNICAS DE DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO Y MICROBIOLÓGICO

A

Son técnicas que sirven para evaluar la funcionalidad del sistema inmune, tanto de la inmunidad innata cuanto adaptativa. Se basa en cuatro procesos:
H.H.A.I.
HISTOCOMPATIBILIDAD
HIPERSENSIBILIDAD
AUTOINMUNIDAD
INMUNODEFICIENCIAS
-PRIMARIA (IG)
SECUNDARIA (INFECCION)

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5
Q

invitro?

A

Búsqueda de antígenos o anticuerpos en plasma, LCR, orina, tejidos, etc.
- Evalúa la funcionalidad de poblaciones leucocitarias

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6
Q

invivo?

A

evalúa la capacidad de un individuo de montar una propuesta celular y/o humoral.
Es el caso de las técnicas que miden la reacción de hipersensibilidad tardía frente a algún antígeno: PPD (prueba cutánea de tuberculina): método para verificar si una persona está infectada por el microbio de tuberculosis. Se inyecta PPD y después de 48h se mide el eritema e induración. Evalúa la inmunidad celular.

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7
Q

Que es sensibilidad?

A

SENTIR PATOLOGIA POSITIVO SEGURO
“Sentir”: Hace referencia a la detección o capacidad de sentir la presencia de la patología.
“Patología”: Nos recuerda que estamos hablando de la capacidad de un test para detectar una enfermedad o condición específica.
SEGURO= SENSIBILIDAD

proporción de positivos que tenemos entre los que tienen una patología. Detecta más + que la realidad, si es muy sensible (ej: ELISA de primera generación en VIH).

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8
Q

q es Inmunodifusión radial simple?

A

es muy utilizada para cuantificar la cantidad de Igs que hay en el suero de un individuo. En esta técnica tenemos un gel con una dada cantidad del antígeno para el anticuerpo que quiero medir. Después que el gel se solidifica, se hace un orificio, donde va a estar la muestra de suero con la concentración de Ig que queremos determinar. La difusión del anticuerpo del orificio hacia el gel crea una línea blanca rodeando al orificio. Cuanto mayor sea el anillo de precipitación, mayor será la [] de la Ig
Para determinar a cuanto equivale el diámetro del anillo de precipitación, primero hay que hacer el mismo proceso pero con suero en el cual sepamos la concentración de Ig, creando una curva de calibración que permitirá determinar a cual [] corresponde cada diámetro de anillo de precipitación.

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9
Q

en lass tecnicas directas sq se busca:

A

El directo se busca un antígeno, microorganismo, componente

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10
Q

q es aglutinacion de latex?

A

es una prueba de aglutinacion. se utiliza mucho para diagnóstico de meningitis y la presencia de otros antígenos en LCR. Se utilizan partículas de látex que tienen pegados anticuerpos específicos en su superficie. Al reaccionar con los antígenos se produce una aglutinación, indicando que es positiva la muestra.

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11
Q

explica q es titulacion de anticuerpo y proxona.

A

Titulación de anticuerpos: mide el nivel de anticuerpos en una muestra de sangre. En disoluciones crecientes de suero se pone un antígeno particulado en cantidades constantes. El título del anticuerpo será la máxima dilución de la muestra que mantiene actividad visible (en el caso de abajo, aglutinación).

Prozona: el efecto prozona se debe a un exceso de anticuerpos comparado a la cantidad de antígeno. Eso no permite que se pueda visualizar la actividad.

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12
Q

q es hemoaglutinacion?

A

es una prueba de hemoaglutinacion. se da por la presencia de antígenos en eritrocitos capaces de reaccionar con anticuerpos. Se utiliza mucho en Chagas, toxoplasmosis, grupos sanguíneos, factor Rh.

se ve cuando se mezcla anticuerpo con antígenos particulados.

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13
Q

q se busca en el metodo indirecto?

A

atc

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14
Q

q es eritlobastosis fetal? como se dx?

A

Eritoblastosis fetal: es una incompatibilidad antigenica entre una madre RH - (q produce anticuerpos antieritrocitarios) y un hijo RH +( q produce antigenos D).
En el 1er embarazo, el hijo RH + los antigenos D del hijo van a cruzar el canal del parto y entrar en contacto con el sangre materno, sensibilizando a la madre, q produce anticuerpo IGM.
En el caso de un segundo embarazo RH+, la madre, ha sensibilizada, ,pasa a producir anticuerpos IGG (q cruzan la placenta ) pasando a producir efectos en el fecto (hemolisis, anemia hemolitica, hydrops, anasarca…).
El dx se hace:

Pruebas de Coombs directa e indirecta permiten demonstrar la presencia de anticuerpos antieritrocitarios en el organismo mediante la aplicación de un segundo anticuerpo (antiglobulina).

Prueba de Coombs directa: sirve para determinar si hay anticuerpos antieritrocitarios ya unidos a eritrocitos. La antiaglutinina se une a IgG, IgM o prot del C que están unidos al eritrocito y producen aglutinación. Es positivo, por ejemplo, en anemias hemolíticas, eritroblastosis fetal, reacción a transfusión.

Prueba de Coombs indirecta: sirve para detectar anticuerpos antieritrocitarios que todavía no están unidos a eritrocitos en suero materno. Hay que hacerlo en 2 fases: 1- Se enfrenta el suero del paciente con eritrocitos ORh+. Si tiene el antígeno antieritrocitario para Rh se producirá la unión antígeno-anticuerpo. 2- Se aplica la antiglobulina que producirá la aglutinación. Es positiva en reacción a transfusión y luego de inmunización en el embarazo.

2)madre Rh- con hijo Rh+. En el primer embarazo se produce sensibilización y la madre produce anticuerpos anti-Rh+. A partir del segundo embarazo, si el hijo es Rh+, los anticuerpos anti-Rh de la madre pueden atacar a los eritrocitos del hijo. Si una mujer es Rh- y no está sensibilizada se le administran dos inyecciones de globulina hiperinmune Rh (RhIg) durante el primer embarazo. La primera inyección se da alrededor de las 28 semanas y la segunda dentro de las 72 horas después del parto. La globulina hiperinmune Rh provoca la destrucción rápida de los glóbulos rojos del feto que han entrado en la circulación maternal, impidiendo que el cuerpo de la madre genere anticuerpos anti-Rh+.

El tto:
el objetivo es no hacer q la madre se sensibilize en su primer embarazo atrvaes de la administracion de gammaglobulina anti D.
1 dosis: entre semana 28/30, xq ahi hay mayor proliferacion trofoblastico y mayor intercambio sangre madre x feto.
2 dosis: 72 h post parto.

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15
Q

q es la tecnica de fijacion de complemento?

A

se basa en la capacidad del complemento para unirse a los complejos A-A. Incluye la adición de eritrocitos sensibilizados con una hemolisina. Si el suero posee anticuerpos específicos, se fija el complemento y este no se une a hemolisina para lisas eritrocitos.

Cuando es positiva, se da la unión A-A y todo el complemento se une a este complejo – no ocurre lisis de GR.

Cuando es negativa no se da la unión A-A, queda complemento residual que lisa los GR.

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16
Q

q es el cross match?

A

Cross Match:TECNICA DE HISTOCOMPATIBILIDAD consiste en detectar en el suero de un paciente la presencia de anticuerpos anti-HLA (antigenos anti leucocitarios humanos) pre-formados contra linfocitos de un posible donante (para casos de trasplantes). La prueba se realiza por técnicas de microlinfocitotoxicidad o citometria de flujo.

El suero del receptor se enfrenta con linfocitos del donante en presencia del complemento. Si el receptor tiene anticuerpos anti-HLA del donante se activa el complemento, generando lesión celular y lisis – Positiva (+20% de células lisadas). Si el donante no tiene los anticuerpos no ocurre lisis – Negativa.

la compat cruzada: se hace antes de la transfusion o transplante de organos para detectar cualquier incompatibilidad teologica entre donante y el receptor.

17
Q

como es la tecnica de microtoxicidad para HLA???

A

TECNICA DE HISTOCOMPATIBILIDAD se somete la sangre del paciente a centrifugación para separar las células mononucleares. Estas se siembran en placas previamente sensibilizadas con anticuerpos anti-HLA. Se incuba para que se produzca la unión A-A. Se agrega complemento y se evalúa si hay lisis o no por recuento de células vivas (%).

18
Q

q es la citometria de flujo?

A

es una tecnica de INMUNOMARCACION.

el citometro de flujo es capaz de medir varios parámetros celulares a partir de una suspensión celular. Se da mediante el estudio de la dispersión de la luz y fluorescencia emitida cuando la célula atraviesa una luz láser.

Es una técnica de análisis celular multiparametrica en que una suspensión de células marcadas con Ac fluorescentes pasa, célula a célula, por delante de una luz de láser focalizado. El impacto de la célula con el rayo emite señales que corresponden a diferentes parámetros de la célula que son recorridos por distintos detectores. Estas señales se convierten en señales electrónicas son digitalizadas y traducidas como distintos parámetros. Tamaño y granularidad. Ejemplo de para que sirve.

cuantificar cual es la intensidad de la fluorescencia.

19
Q

q es la inmunofluorescencia?

A

La inmunofluorescencia es una técnica de inmunomarcación que hace uso de anticuerpos unidos químicamente a una sustancia fluorescente para demostrar la presencia de una determinada molécula.

Directa: a la muestra se agrega un Ac marcado con flurocromo. Después del tiempo de incubación y lavado se procede a la lectura. Permite detectar antígenos en tejidos o células. Buscar células infectadas con un virus.

Indirecta: hace uso de 2 Ac. El primario es el que reconoce y se una a la célula diana, y el segundario (que es el marcado con flurocromo) reconoce y se une al primario.

La directa es rápida y sencilla pero menos sensible. Necesita un Ac marcado para cada antígeno a ser detectado.

La indirecta es más sensible y un mismo anticuerpo secundario puede reconocer a varios Ac primarios, pero lleva más tiempo

20
Q

Q es la tecnica de ELISA?

A

Es una tecnica INUNOENZIMATICA EN FASE SOLIDA

se utiliza un Ac marcado con una enzima, generalmente una peroxidasa, que permite evidenciar la reacción A-A al generar un producto detectable, como cambio de color. Se hace la técnica directa para la búsqueda de antígenos y la indirecta para la búsqueda de anticuerpos.

Directa: normalmente se utiliza para la búsqueda de antígenos. se detecta anticuerpos contra antigenos. ej.: si alguien tiene una infeccion por COVID lo q se hace es detectar anticuerpos contra el COVID en suero

  • tenemos un anticuerpo especifico p el antigeno q estamos buscando en el soporte tedcncico.
  • a esto agregamos una muestra la q sospechamos q contega el antigeno
    -se agrega un anticuerpo conjugado con enzima
  • se agradea un sustrato incoloro q se coloreará con color caracteristico si se dio la reaccion anticuerpo-antigeno- anticuerpo

Indirecta: normalmente utilizada para la búsqueda de anticuerpos. Utilizada para HIV.

  • tenemos a un antigeno especifico para el anticuerpo q estamos buscando
  • a esto agregamos un suerpo con el antigeno q sospechamos q q hay
  • agregamos un anticuerpo secundario marcado por una enzima-
  • agregmoas una sustancica incolora q presentara color caracteristico si se dio la union del anticuerpo secundario al anticuerpo primario
21
Q

q es la tecnica PRIST?

A

es una tecnica radio-inmunológica que sirve para detectar la concetracion de IGE en el suero de un paciente.

22
Q

como se hace PRIST?

A

1) tenes un disco de papel unido a un ac anti ige (unidos covalentemente)
2) se agrega el suero del paciente y se espera periodo de incucbacion para q se forme complejo ag-ac ige)
3)se agrega ac IGE marcado radiologicamente
4)se hace la lectura de la radioactividad del disco comparando el resultado con la curva de calibracion

23
Q

q es la tecnica de RAST?

A

determina los niveles de IgE específicos para un antígeno en particular x determinado alergeno

24
Q

como es la tecnica RAST?

A

1) A un disco de papel con alérgeno específico se agrega el suero del paciente
2) Después de la
incubación se agrega Ac anti-IgE marcados
radioactivamente.
3) se compara los resultados con la curva de calibracion