IVe inmunotécnicas Flashcards
inmunotécnicas de microscopia
inmunohistoquímica
inmunofluorescencia
confocal de fluorescencia
molecula que induce la formacion de al menos un anticuerpo especifíco
tienen uno (al menos) o más epítopes
antígeno
región de la molecula del antígeno q es reconocida por el anticuerpo, formada por aa (secuencial/lineal o conformacional/discontinuo)
epítope
region del anticuerpo q es especifica de especie
region constante (Fc)
porteína sérica conocida como Ig q reconoce especificamente a un epitope del antígeno
anticuerpo
anticuerpo producido por solo un clon de linfocitos B
anticuerpo monoclonal
mezcla heterogenea de anticuerpos producidos por diferentes clones de células B
anticuerpos policlonales
herramienta para identificar y localizar ANTÍGENOS (proteinas) en una muestra de tejido
inmunohistoquimica
metodologia inmunohistoquimica
-fojacion
-cortes
-incubación con anticuerpos
-CROMOGENO para la enzima
-montaje
indica la activación activa del virus**
HBcAg HBsAg
inmunoh
metodo en q el anticuerpo primario especifico para el antigeno q estamos tratando de identificar, acomplado a una enzima
método directo
detecta especificamente algunas proteinas u otras moleculas en celulas y tejidos
microscopia de fluorescencia
superposicion espacial entre dos etiquetas fluorescentes diferentes
colocalización
la tincion de nucleos se logra con:
DAPI (4’,6-diamidino-2-fenilindol)
ioduro de propidio
microscopia fluoro
refleja la luz de cierta longitud de onda y transmite la luz de otra longitud de onda mayor
espejo dicroico
agregado como un breve pulso, identifica las regiones en proceso sintesis activa del ADN
BrdU
*replicacion activa
DNA polimerasa y PCNA colocalizan en:
regiones de sintesis activa de DNA
permite obtener una imagen de la arquitectura tridimensional de una celula o tejido
microscopio confocal de fluorescencia
utiliza metodos electronicos que permiten enfocar un plano de una muestra eliminando la luz q proviene de las zonas de afuera de un foco superiores e inf a ese plano
microscopio confocal de fluorescencia
se emplea en el recuento y clasificación de células segun sus caracteristicas morfologica
presencia de biomarcadores
citometria de flujo
marcadores especificamente mediante anticuerpos acoplados a fluorocromos
biomarcadores
citometria-…
se puede detectar cualquier molecula en la celula, en tanto q tengamos un anticuerpo especifico para ella, acoplado a un fluorocromo
marcaje con fluorescencia
poblaciones leucocitarias
la baja cantidad de ______ hace q en general no se definan con base a FSC y SSC
basofilos y eosinofilos
un compuesto como el ___________ atraviesa la membrana celular alterada en celulas muertas y las tiñe
ioduro de propidio
*celulas vivas no presentan fluorescencia en ese canal
ensayo de inmunoadsorcion ligado a enzima
ELISA
elisa
detección de Ag en sangre u orina
directo
elisa
deteccion de ag con un solo secundario acoplado a enzima cambiando el primario- o detección de anticuerpos
indirecto
elisa
detección de ag, más sensible, el ag se retiene en la placa mediante su union especifica al anticuerpo de captura y el seguldo a-Ag es policlonal; se amplifica la señal VS directo e indirecto
tipo sandwich
permite la detección mediante un anticuerpo especifico de una proteina dentro de una muestra biologica
western blot
secuencia proteica corta q es reconocida fuertemente por un anticuerpo comercial bn caracterizado
etiqueta
permite identificar interacciones funcinales proteina-proteina con proteinas hasta ese momento desconocidas
inmunoprecipitación
