IVc purificación de proteínas

Question 1

cromatografia en papel

Answer 1

fase estacionaria: papel filtro

version primitiva de la capa fina
para aminoacidos individuales o dipeptidos
empleada por Sanger (1945) en la secuenciación d einsulina

Question 2

cromatografia en capa fina

Answer 2

fase estacionaria: placa adsorbente
los mas usados: silica gel (SiO2) y aluminia (Al2O3), adherido a un soporte de plastico, vidrio o aluminio

Question 3

HPLC

Answer 3

cromatografia liquida de alto rendimiento

liquido-liquido

Question 3

cromatografia
intercambio cationico

Answer 3

resina carga negativa

fuerte— ácido sulfónico
débil— ácido carboxilico

Question 3

cromatografia
intercambio anionico

Answer 3

resina carga positiva

fuerte —- aminas cuaternarias
debil—- aminas secundarias o terciarias

Question 4

hplc
analítica

Answer 4

determinar la composicion de la mezcla

Question 4

hplc
preparativa

Answer 4

se pueden recuperara los componentes posteriormente a su análisis para estudios posteriores
ej. espectrofotometria de masas -secuenciación-

Question 5

herramienta fundamental para AISLAR Y PURIFICAR ACROMOLECULAS con base a su MOVILIDAD DENTRO DE UN SOPORTE O MATRÍZ SOLIDA EN UNA CAMPO ELÉCTRICO

Answer 5

electroforesis

dos tipos de muestras pueden ser analizadas: proteínas y acidos nucleicos

Question 6

PAGE

Answer 6

electroforesis en gel de poliacrilamida

Question 7

geles de poliacrilamida componentes

Answer 7

acrilamida + bisacrilamida

Question 8

acrilamida

Answer 8

C3H5NO
formación de polímeros

Question 9

bisacrilamida

Answer 9

N,N´-methylenebisacrilamida
C7H10N2O2

entrecruzamiento (cross - linking) entre las cadenas de polímeros

Question 10

es la secuencia de una cadena de aa

Answer 10

estructura primaria de las proteinas

Question 11

ocurre cuando lo saa en la secuencia interactuan a traves de enlaces hidrogeno

Answer 11

estructura secundaria de las proteinas

Question 12

ocurre cuando ciertas atracciones están presentes entre hélices alfa hojas plegadas

Answer 12

estructura terciaria de las proteinas

Question 13

es una proteina que consiste de más de una cadena de aa

Answer 13

estructura cuaternaria de las proteinas

***puentes disulfuro

Question 14

aminoacido en proteinas que pueden formar enlaces puentes disulfuro

Answer 14

cisteína

ayudan a estabilizar estructuras terciarias y cuaternarias

Question 15

1 molecula de SDS por cada 2 residuos de aminoacios

Answer 15

unos 1.4g SDS/ g proteina

Question 16

análisis de proteinas multiméricas

agentes desnaturalizantes reductor

Answer 16

ditiotreitol (DTT) o B-mercaptoetanol

se puede determinar el numero y tamaño de subunidades proteicas comparando la electroforesis bajo condiciones reductoras y no reductoras

Question 17

azul de bromofenol

Answer 17

se adiciona al buffer de carga de la muestra
permite visualizar el corrimiento electroforético
carga negativa por encima de ph 4.6
peso molecular menor que cualquier proteina

Question 18

revelado del gel
azul de coomassie

Answer 18

puede detectar bandas de hasta 50 ng

Question 19

revelado del gel
tinción de plata

Answer 19

silver stainning

incrementa la sensibilidad de detección (50x)

Question 20

punto isoelectrico

Answer 20

es el ph al que un polianfólito tiene como carga 0

Question 21

moleculas grande como las proteinas que tienen muchos frupos acidos o basicos (ionizables/ protonables)

Answer 21

polianfolitos

Question 22

una molecula con un PI bajo tendra predominante

Answer 22

grupos acidos

Question 23

un PI alto indica predominancia de

Answer 23

gupos basicos

Question 24

los puntos isoelectricos de las diferentes proteinas van en función al

Answer 24

ph

al cual actua la proteina

Question 25

proteómica cuantitativa

Answer 25

estudio de las variaciones de los NIVELES DE EXPRESION A NIVEL DE PROTEINA en determinados momentos y bajo ciertas condiciones de la célula que permite identificar aquellas proteínas cuya presencia, ausencia o alteración se correlaciona con determinados estados fisiologicos

Question 26

en el analisis proteomico asociado a patologias concretas:

Answer 26

es posible identificar proteinas que permiten diagnosticar la enfermedad o pronosticar la evolucion de la misma. Dichas proteinas se conocen con el nombre genérico de biomarcadores