Proteintechniken 5 Flashcards
1
Q
Was ist eine kolloidale Coomassie Färbung? Nennen Sie
drei weitere Proteinfärbemethoden.
A
Coomassie ist ein Farbstoff der sich an basische AS anlagert und so Proteine Färbt. Kolloidales Coomassie verfügt über eine verbesserte Nachweisgrenze. Dazu wird das Coomassie mit zwei Methylgruppen modifiziert. Der Färbelösung werden zusätzlich AlSO4, H3PO4 und Ethanol hinzugefügt.
3 weitere Methoden:
- SYPRO
- Diamond ProQ (phosphorylierte Proteine)
- Emerald ProQ (glykosylierte Proteine)
2
Q
Beschreiben Sie die Methode der
Proteinmengenbestimmung mittels der BCA Färbung.
A
BCA (Bicinchoninsäure)
Cu2+ + Protein -> Cu1+-Proteinkomplex (Biuret)
Cu1+ + BCA -> violet complex
Photometrisch A562nm