parazitologija vaje Flashcards
Naštej parazitološke metode pri živih živlaih
- koprološke preiskave (pri živih živalih)
- parazitološke metode pri raztelešenih živalih
- dodatna preiskava na protozoje
- preiskava na ličinke trichinele - trihineloskopska preiskava
- pregled vzorca dlake in kožnega ostružka
- pregled krvnega razmaza živali na prisotnost krvnih parazitov, pregled urina in punktata limfnega vozla
Katere so koprološke preiskave?
- nativni pregled iztrtebka
- sedimentacija
- flotacija
- metoda po Vajdi
- metoda po Bearmanu
- McMaster metoda
- koprokultura
- dodatna preiskava na protozoje
katere so vse dodatne preiskave na protozoje?
- barvanje nativnega preparata z jodom
- modificirano barvanje s ZN
- koncentriranje protozojev s SAF metodo
Kaj pregledamo s koprološkimi preiskavami?
- iztrebke živali
v iztrebkih iščemo:
- odrivke ciklofilidnih trakulj
- jajčeca ciklofilidnih trakulj
- jajčeca nematod
- ličinke neamtod
- oociste kokcidijev
- razvojen oblike drugih protozojev
- jajčeca trematod
- jajčeca akantocefala in pentastomidov
Kako lahko najbolj grobo razdelimo preiskave?
- preiskave na živih živlaih
- preiskave na truplih mrtvih živali
katere so preiskave na živih živalih
- koprološke preiskave (preiskave iztrebka)
- preiskava urina
- preiskava kožnih ostružkov ali dlake
- preiskava krvi
Katere so preiskave na mrtvih živalih?
- koprološke preiskave
- preiskave posameznih organov
- preiskave vzorcev kože
- preiskave mišičnine
Kaj so :
- nematoda
- cestoda
- trematoda
- protozoj
- pentastomid
- akantocephala
- artropoda
- nematoda= valjasti črv
- cestoda = trakulja
- trematoda = sesa
- protozoj = enocelični organizem
- pentastomid = jezičasti črv
- akantocefala = ježerilec
- artropoda = členonožec
Kaj je idealno za koprološke preiskave?
- da odvzamemo sveže iztrebke (neobstojnost protozojev)
- ne zadošča količina iztrebka ki se oprime termometra
- vzorce iztrebkov hranimo pri 4 C
- iztrebki so lahko fiksirani v 10% formalinu ali SAF raztopini
- vzorec pred pošiljanjem v lab ustrezno zavaruj
- male živali:
takoj po defekaciji, z žličko ali loaptko vzamemo iztrebek in ga prenesemo v parazitološko posodico - velike živali:
vzorec vzamemo rektalno z rokavico, vzorec v rokavici ustrezno pakiran pošljemo v laboratorij - prežvek: izogibaj s ejamnaju iztrebkov iz tal
-ptice:
papir nastavimo v kletko, počakamo nekaj časa, iztrebke skupaj s papirjem pošlejmo v laboratorij
Opiši nativni pregled iztrebka živali
- ogledaš si iztrebek, konsistenco
- ali je penast vode, barva, ali vsebuje kri, sluz
- ali se vidijo odrivki trakulj - v velikosti riževega zrna, v obliki semen kumarice ali kot sluzaste kapljicce
opiši nativni preparat iztrebka
- predmetnica,
- prenesemo iztrebek,
- 1-2 kapljici vode,
- premešamo iztrebek,
- pokrijemo s pokrovnico,
- opazujemo pod mikroskopom
- primerna če je navzoče večje število jajčec v iztrebkih
Opiši sedimentacijo
- detekcija težkih jajčec v iztrebku
- padejo na dno čaše, če so razpršena v vodi
- kvalitativna metoda
- dokazujemo jajčeca: digenih sesačev ježerilcev izjemoma: jajčeca pljučnih zajedavcev iz družine metastrongylidae pri PRA drugi nematodi večje oociste kokcidijev jajčeca trakulj
Kaj so težka jajčeca?
- so težja od specifične teže vode
- višja specifična teža kot 1,3
- padejo na dno čaše, če so razpršena v vodi
- jajčeca sesačev
- težka so zaradi operkuluma in citina
Opiši potek sedimentacijske metode:
- iztrebek v velikosti oreha 2-3g
- razpršimo skozi mrežico (200-250 mikrometrov premer okenc)
- v čašo z navadno vodo
- počakamo 30min
- odlijemo 3/4 čaše
- dolijemo do roba vodo nazaj
- sedimentiramo ponovno 10min
- odlijemo včeino tekočine iz čaše
- sediment prelijemo v petrijevko
- pogledamo pod mikroskopom
Naštej nekaj jajčec, ki jih lahko ugotovimo s sedimentacijsko metodo.
- fasciola hepatica
(izrazito rumene barve, 130-150 mikrom, operkulatni tip, v jajčecu še ni izoblikovan miracidij) - dicrocoelium dendriticum
(37-45 mikrom, notri izoblikovan miracidij z 2 pegama, rjave barve, asimetričen, ima operkulum, polž ga poje)
-paramphistomum cervi
(160mikrom, rumenjakove celice so večje kot pri fascioli, svetlo sive barve, operkulum)
-macrocanthorrhynchus hirudinaceus
(večpalstno jajčece, ovalno)
-jajčeca iz družin pljučnih črvov metastrongylidae
(debelosteno, nagubana ovojnica, L1 ličinka)
flotacijska metoda
- jajčeca nematodov
- oociste kokcidijev
- jajčeca trakulj iz razpadlih odrivkov (npr. taenia sp. al moniezia sp.)
- uporabljamo nasičene raztopine NaCl, ZnCl2, MgSO4, nasičeno raztopino sladkorja –> jajčeca lahko lebdijo in se dvignejo an površino
- kvalitativna metoda
- jajčeca so lažja od specifične teže nasičenih raztopin
- NaCl = specif. teža je 1,2
izvajanje flotacijske metode
- v prhovko damo 2-3 g iztrebkov
- prelijemo z nasičeno raztopino NaCl
- premešamo
- prelijemo v epruvete skozi kovinsko mrežico 8 okenca ne večja kot 250 mikrom)
- v epruveti se ustvari konveksni meniskus
- počakamo nekaj minut, da se jajčeca naberejo na sredini konveksnega meniskusa
- mikrobiološka zanka oz. eza –> z njo se dotaknemo sredine konveksne površine , zajamemo kapljico –> tu so ujeta koncentrirana jajčeca
- kapljico prenesemo na mikroskop
- pogledamo pod mikroskopom
Naštej jajčeca, ki jih lahko ugotovimo s flotacijsko metodo.
- ascaris suum
- moniezia sp.
(pri ovci, embrio v sredini, piriformna struktura, ki ima repek) - trichostrongylidae
- toxocara canis
(navadna glista, nagubana ovojnica, ko je invazivna se v jajčecu pojavi ličinak, ki anto migrira –> lirva migrans visceralis) - parascaris equorum
(temno jajčece)
-taenia sp.
(debela temna ovojnica, vidi se prečna progavost)
Opiši metodo po Vajdi.
- dokazujemo navzočnost ličink prve stopnje pljučnih črvov v iztrebkih, ki so formirani (drobnica, divji prežvekovalci)
- dokazujemo ličinke pljučnih črvov družin Dictyocaulidae in Protostrongylidae
- izkoriščamo termotropizem
Kaj pomeni termotropizem?
Premikanje iz hladnejšega v toplejše okolje
Izvajanje metode po Vajdi
- bobek na predmetnici obdan s toplo vodo
- po 10 min iztrebek odstranimo
- ličinke ob robovih predmetnice, se živahno premikajo
- determinacijo ličink izvajamo po morfoloških značilnostih njihovih repkov , lahko po obliki sprednjega dela, ali po obliki in velikosti same ličinke.
-Po vajdi lahko določiš 2 družini :
DICTYOCAULIDAE
PROSTOSTRONGYLIDAE
Opiši metodo po Bearmannu.
- določamo navzočnost ličink prve stopnje pljučnih črvov
- določamo ličinke tretje razvojne oblike - invazijske ličinke želodčno črevesnih zajedalcev ali L3
- potrebujemo Bearmannov aparat: večji lijak, v njem je mrežica ali gaza. na lijaku je gumijasta cev, na koncu je stisnjena z objemalko - na mrežico prenesemo 10-20 g iztrebkov -prelijemo s toplo vodo - iztrebke pustimo nekaj ur v vodi - nato objemko sprostimo in ličinke s tekočino odtečejo v petrijevko, ki smo jo postavili pod lij. - determiniramo ličinke
drobnica:
- pogoste protostrongylidae, vrsta protostrongylus (valovit rep) ali mullerius (valovit rep in ostroga)
- dictyocauleus filaria ( gumbek na sprednjem delu telesa, ličinke večje odprte v šestico)
govedo:
- dictyocauleus viviparus
opiši McMaster metodo
- kvantitivna koprološkametoda
- modificirana flotacijska metoda
- ko želimo izvedeti koliko je jajčec ali oocist v 1 gramu iztrebkov
- Nasičena raztopina NaCl –>lahko tudi druge , specifična teža 1,2 - 1,25
- Če uporabimo cinkov klorid ali magnezijev sulfat, specifičan teža 1,3 –> lahko določimo fasciole in jajčeca dicroceliuma
- Preštevamo jajčeca, cestode in oociste protozojev
- nasičena raztopina NaCl
- fiola z 2 oznakama
- McMaster komora ( 2 predmetnici ki se prilegata, sestavljata 2 komorici - v sredini je izrisan kvadrat 1x1cm, polje razdeljeno na 5 ali 6 pravokotnikov)
- steklenea posodica
- mrežica
- žlica
Kako se izvede Mcmaster metodo
- v plastično fiolo natočimo NaCl do prve oznake (42 ml), dodamo iztrebke do druge oznake (54ml) (približno 3g iztrebka)
- premešamo iztrebke
- vsebino fiole precedimo skozi mrežico v drugo posodo
- s kapalko vnesemo tekočino v obe komorici McMaster komore.
- pustimo nekaj minut, nato preštejemo vsa jajčeca ali oociste
- še štejemo obe komorici pomnožimo 0,3 s 50 število jajčec, še štejemo samo v eni komorici pomnožimo0,15 s 100
- štetje izvajamo pod 100x povečavo