Micologia Flashcards
O que é a micologia?
Estudo dos fungos
Quais os mecanismos patogénicos dos fungos
- Colonização e doença - o fungo está no nosso organismo, isto é, coloniza-nos e depois multiplica-se e causa doença.
- Micotoxicoses - fungos produtores de toxinas; são as toxinas que, ao ser ingeridas, causam doença.
Ex: amatoxina (amanita phalloides), alcaloides do centeio (Claviceps purpúrea) - Hipersensibilidade
As infeções fúngicas são geralmente infeções ________ que vão aparecer em doentes ________.
oportunistas
imunocomprometidos
Quais as patologias associadas aos fungos?
HIV/SIDA:
• Pneumonia por Pneumocistis jiroveci
• Meningoencefalite por Cryptococcus neoformans
• Histoplasmose causada pelo Histoplasma
Doença pulmonar:
• DPOC e ASMA - Aspergillus → aspergilose broncopulmonar alérgica e aspergilose pulmonar crónica
• Tuberculose (nas “cavernas tuberculosas”) – Aspergillus
Neoplasias
• Aspergilose invasiva por Aspergillus
• Candidíase invasiva por Candida Albicans
Quais as características gerais dos fungos? (4)
• Células eucarióticas, heterotróficas
• Parede celular com quitina
• Membrana celular com ergosterol
• Têm dois tipos de reprodução – sexuada e assexuada; o mais frequente é a reprodução
assexuada.
Quais as categorias?
Leveduras, bolores/fungos filamentosos, dimorfos
Qual a morfologia das leveduras? (3)
unicelulares
redondos ou ovais
gram +
Qual a morfologia dos bolores/fungos filamentosos? (5)
pluricelulares
constituídos por hifas (Nota: hifas é nome que se dá aos filamentos)
ao conjunto de hifas dá-se o nome de micélio
as hifas podem ser septadas ou não septadas/cenocítica
produzem esporos em condições adversas.
Qual a morfologia dos dimorfos?
Transitam de uma forma para a outra dependendo das condições de crescimento (variam em função da temperatura, CO2 e outros fatores…); são muito poucos.
- Em meios ricos → forma de levedura – ex: no homem
- Em meios pobres → forma filamentosa – ex: na natureza, em temp. ambiente.
Como é que os dimorfos são adquiridos?
No meio ambiente por inalação na sua forma filamentosa; no corpo humano vão alterar para levedura e é nessa forma
que vão depois causar patologia
Filamentoso = infecioso
Levedura = patogénico
Qual a reprodução das leveduras?
Assexuada
Gemulação: A célula mãe emite um prolongamento que dará origem à célula filha.
Clamidosporos: são estruturas de resistência, constituídas de reserva nutritiva e membrana bastante espessa, permitindo resistir aos fatores externos, semelhantes aos esporos.
O que são pseudo-hifas?
Na gemulação, a nova célula não se separa, dando origem a uma gémula alongada
Como se distinguem as hifas das pseudo-hifas?
▪ Nas hifas os lados são paralelos, enquanto que nas pseudo-hifas não.
▪ As pseudo-hifas são estranguladas na zonas dos septos.
Qual a reprodução dos bolores?
Esporos sexuados: resultam da fusão de 2 gâmetas.
Esporos assexuados:
• Esporangiosporos (fungo não septado): quando produzidos dentro de uma estrutura sacular
• Conídios (fungo septado): quando livres
Extensão da hifa: reprodução sexuada; fusão de hifas de dois micélios diferentes
Qual a particularidade dos esporos?
Só produzidos em condições adversas.
Para identificar bolores temos de cultivar em meios pobres para induzir a formação de esporos, pois cada bolor tem um tipo de esporos caraterístico que nos vai permitir fazer a identificação
Como é que os bolores são adquiridos?
São adquiridos geralmente no meio ambiente por inalação de esporos; no corpo humano encontram-se na forma filamentosa
Infecioso = esporo
Patogénico = filamentoso
Quais os tipos de amostras utilizadas? Quais é que são as amostras específicas para a micologia?
Sangue, LCR, urina, biópsia
Específico = unha, cabelo, escama cutânea (colhe-se à periferia porque é a zona mais ativa)
Como é que se colhe a unha para amostra?
- Fazer limpeza prévia das unhas, escovando com água e sabão.
- Cortar com tesoura e desprezar a parte descolada da unha
- Com lâmina de bisturi, raspar as áreas mais profundas e pulverulentas
- Colocar este material entre lâminas e vedá-las com fita adesiva.
Os fungos crescem em anaerobiose ou aerobiose?
Aerobiose (nunca em anaerobiose)
Quais os tipos de exame direto?
Fresco, hidróxido de potássio (KOH), tinta da china, método de Burri
Como é feito o exame de hidróxido de potássio? Para que amostras?
Usa-se em amostras de grande celularidade (unha, escama, cabelo, biópsia)
Cobre-se a amostra com KOH (hidróxido de potássio) e este vai dissolver a
queratina, obtendo-se assim uma amostra mais fina, facilitando a visualização
das estruturas do fungo.
Como é feito o exame de tinta da china? Para que amostras?
Usa-se no LCR, urina ou sangue
Numa lâmina coloca-se 1 gota amostra + 1 gota tinta China, e cobre-se com a lamela
A tinta da china vai corar o LCR (ou outra amostra) de preto, permitindo destacar a cápsula do Cryptococcus.
Como é feito o exame do método de Burri?
Basicamente igual à tinta da china mas depois faz-se coloração com roxo de
metileno, que vai corar os Cryptococcus, destacado-os mais.
Quais os exames importantes para a meningite?
Cryptococos: tinta da china e método de Burri
Hoje em dia faz-se teste de pesquisa de antigénio, que são mais fiáveis, portanto estas técnicas estão a perder alguma importância.
Qual o meio utilizado para o exame cultural?
Meio de Sabouraud
Se amostras tiverem flora saprófita: Gelose Sabouraud Cloranfenicol-Gentamicina (tem antibiótico para inibir a maioria das bactérias gram + ou -)
A que temperatura crescem os fungos?
30ºC - Crescem a maioria dos fungos saprófitas e patogénicos
37ºC - Crescem a maioria dos fungos patogénicos; não crescem os fungos saprófitas
Quais os géneros das leveduras?
Candida (mais frequente), Cryptococcus, Malassezia, Trichosporon
Quais a patologias associadas a candida?
Candidíase oral e esofágica, vaginite, cistite, endocardite, meningite, bacteriémia, doença disseminada
Quais a patologias associadas a cryptococcus?
Meningo-encefalite, infeção pulmonar, doença disseminada envolvendo a pele, lesão no osso e articulações
Quais a patologias associadas a malassezia?
Doença dermatológica
Quais a patologias associadas a trichosporon?
Lesão do cabelo (piedra branca), lesão da pele, doença disseminada
Como é que se faz a identificação das leveduras?
1º deteção em exame direto com KOH, tinta da china, e coloração de Gram
2º cultura em Sabouraud (24-72h)
3º identificação definitiva com testes bioquímicos e prova de filamentaçao precoce (Candida albicans)
Como é que se faz a prova da filamentação precoce? O que é uma prova positiva?
Colónia de levedura em suspensão em soro bovino fetal
Incubar 3h (máximo) a 37ºC
Colocar 1 gota entre lâmina e lamela e observar ao microscópio 40x
+ = forma-se filamento sem constrição na base (C. albicans)
- = filamentos com constrição ou não se formam filamentos ou filamentos sem constrição depois de 3h
Quais as diferenças entre Candida e Cryptococcus?
Candida = Cheira a fermento de padeiro & não tem cápsula & urease -
Prova de filamentação + = albincans
Cryptococcus = cápsula & urease +
Quando é que se faz TSA em Candida?
Candida tem resistências praticamente fixas logo há guidelines já estabelecidos. Faz-se TSA quando:
Infeções graves, infeções que não respondem à terapêutica, candidas raras em que não está definido o antibiótico
Qual a Candida associada a surtos hospitalares?
Auris - resistência a todos os antibióticos
Qual a divisão da patologia dos bolores?
Hifas septadas = hialohifomicoses (não tem melanina e são hialinas) & feohifomicoses (tem melanina e são pretas)
Hifas não septadas = mucormicoses (zigomicoses)
Quais os generos dos hialohifomicoses?
Aspergillus, Fusarium, Scopulariopsis, Phaecilomyces
Quais os generos dos feohifomicoses?
Alternaria, ulocladium, sporothrix, exophiala
Quais os generos dos mucormicoses?
Mucor, Rhizopus, Rhizomucor, Absidia
Qual o exame que não se faz nos bolores?
Provas bioquímicas
Como é que se faz a identificação dos bolores?
1º deteção em exame direto com KOH
2º cultura em Sabouraud (rapidez de crescimento & características das colónias)
3º identificação por morfologia microscópica
Quais as texturas verificadas nos bolores na cultura de Sabouraud?
Algodonosa = micélio tem abundantes hifas que dão aspeto de algodão
Aveludada = limitado crescimento das hifas ficando com aspeto de veludo
Pulverulenta = aspeto granulado devido à grande produção de conídios
Glabra = superfície lisa ou com aspeto de camurça
Quais as técnicas usadas na identificação por morfologia microscópica?
Técnica da fita-cola e geralmente usa-se corante azul de lactofenol para facilitar a visualização
Como se identificam os diferentes tipos de aspergillus?
• Pela cor da colónia → macroscopicamente
• Pela cabeça – cabeça aspergilar → microscopicamente
Qual a característica específica da Aspergillus nidulans?
Tem o conidióforo (tipo o stem) castanho porque tem melanina
Qual a importância de haver outros métodos laboratoriais para diagnóstico de fungos? Quais são?
Métodos convencionais demoram muito tempo, piorando o prognóstico. Isto é especialmente grave nos imunocomprometidos.
Deteção de Ag
Quais os Ag associados aos fungos?
Candida - 1,3-Beta-glucano
Pneumocisits jirovecii - 1,3-Beta-glucano
Cryptococcus neoformans – capsular polysaccharide
Aspergillus - galactomannan
