7. Diagnóstico em Microbiologia Clínica Flashcards
Quais são as 2 main funções dum laboratório?
Diagnóstico + orientação terapêutica (TSA)
Vigilância epidemiológica
Quais são os AB de reserva?
CEFALOSPORINAS de 3ª geração
FLUOROQUINOLONAS
CARBAPENEMOS
O que são microorganismos problema?
Isolados a partir de amostras invasivas
Ex. Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus
O que são microorganismos de alerta?
Perigosos no que toca à disseminação porque têm mecanismos de resistência
Ex. Staphylococcus aureus com resistência à vancomicina
Quais são as 3 fases do diagnóstico?
Pre analítica
Analítica
Pós analítica
O que acontece na fase pré analítica?
Colheita, acondicionamento e transporte da amostra
O que acontece na fase pós analítica?
Clínico recebe resultado e verifica compatibilidade
O que acontece na fase analítica? Incluir testes
Laboratório. Pode ser:
1. Pesquisa dos microrganismos por exame cultural ou observação direta
2. Serologia (Ac e Ag)
3. Diagnóstico Molecular (genes)
Qual é o exame mais frequente?
Cultural
Quais são os passos do exame cultural?
• Observação macroscópica da amostra
• Exame Microscópico direto
• Exame cultural (onde se obtêm colónias)
• Identificação e TSA (a partir das colónias obtidas no exame cultural)
Como é que se pode fazer o exame direto?
• Microscopia ótica
• Microscopia de fluorescência
• Microscopia eletrónica (raramente utilizada no laboratório clínico)
O que é um exame direto a fresco? Qual é a desvatnagem?
Sem coloração + líquido
Menor ampliação (400x vs 1000x)
Qual é o método para a coloração Gram?
- As bactérias, inicialmente, estão descoradas no esfregaço
- São coradas com violeta de cristal
- Aplicada solução iodada, que melhora fixação do corante
- Descoloração com etanol: vai penetrar nas bactérias de parede frágil e remover o primeiro corante. As de estrutura de parede robusta que têm muito péptido-glicano, não permitem que moléculas do corante
saiam e permanecem roxas - Aplica-se um corante de contraste mais claro, a safranina, e as bactérias que
perderam o primeiro corante, coram com o segundo (de rosa)
Quais são os cocos Gram +?
Staphylococcus
Streptococcus
Enterococcus
Quais são os bacilos Gram +?
Bacillus
Listeria
Erysipelothrix
Corynebacterium
Nocardia
Mycobacterium
Quais são os cocos Gram -?
Neisseria
Moraxella
Quais são os bacilos/coco bacilos Gram -?
Enterobacteriacae
Vibrio
Aeromonas
Campylobacter
Helicobacter
Pseudomonas
Acetinobacter
Haemophilus
Bordetella
Brucella
Legionella
Quando é que se utiliza meios sólidos em tubo?
- Demora muito tempo a crescer logo necessário incubar
- Poder patogénico elevado (ex. Neisseria meningitidis) logo minimizar probabilidade de contaminação para quem está a manipular
Que testes podem ser utilizados para identificação?
Manuais
- Rápidos em que só é pesquisado p.ex. uma enzima
- Galerias comerciais com manuais
Automatizados
- Bioquímicas
- MALDI-TOF (espetometria de massa)
- Genómica
Como é que funciona o MALDI TOF?
Uma pequena porção da colónia é colocada numa lâmina
Coberta por uma matriz
Raios laser = que vão fazer a imunização das várias partículas -> volatilizá-las e essas partículas vão voar num tubo ionizado
Vão sendo detetadas à saída e à chegada o que permite calcular o tempo de voo aka velocidade que atravessa tubo
Velocidades criam espetro de massa
Comparado com base de dados
Quais são os testes de suscetibilidade antimicrobianos (TSA)?
Manuais
- Difusão (Kirby Bauer & Etest)
- Diluição
Automatizadas
- Diluição (Vitek & WalkAway)
- Genes de resistência (GenXpert& & BD Max)
Quanto tempo demoram os testes de suscetibilidade antimicrobianos (TSA)?
48h (desde chegada ao lab)
Quais as vantagens de exame cultural?
- TSA
- Estudos epidemiológicos
- Deteta microorganismos simultaneamente
- Barato
Quais as desvantagens de exame cultural?
- Necessita de microorganismo viável
- Demorado
- Negativo se tomado AB previamente
- Algumas bactérias não crescem nos meios de cultura
O que precisamos na serologia para determinar que estamos na fase aguda?
Ac tem de aumentar 4x entre as 2 semanas
O que é a diluição e o que é o tírulo?
Diluição é a última em que há reação
Título é inverso
Ex. diluição é 1:4
Título é 4
