Interacciones proteína-proteína y rutas de interacción

Question 1

Clasificación de las interacciones proteína-proteína

Answer 1

• Entre dominios de una misma cadena polipeptídica
• Entre dominios de distintas cadenas polipeptídicas
• Entre complejos formados entre proteínas dependienes

Question 2

Metodologías para evaluar las interacciones proteína-proteína

Answer 2

• Rayo X
• ELISA
• Doble híbrido Y2H
• Microarreglo de proteínas
• Microscopía electrónica
• Inmunoflourescencia
• FRET

Question 3

Y2H

Answer 3

Técnica de doble híbrido en levadura
Medio → Factor de transcripción con dos dominios.
* Separación de FT → D. unión a DNA y de activaciión.
* Unión de proteínas a analizar a los dominios.
* Unión FT → transcripción del gen reportero.

Question 4

FRET

Answer 4

Flourescence resonance energy transfer
Medio → Transmición de energía.
* Técnica microscópica in vitro en tiempo real.
* Marcaje con floroforos donadores y aceptores → interacción florescente
* **CFP **→ excita a 436nm y emite 480nm
* Si hay interacción YFP acepta → Luz amarilla

Question 4

Ventajas de FRET

Answer 4

Medición de la interacción en tiempo real