Fundamentos de PCR cuantitativa en tiempo real Flashcards
1
Q
¿Quién la diseñó?
A
Kary Mullis
2
Q
¿En qué consiste?
A
Técnica de replicación in vitro de una molécula de ADNg.
3
Q
¿Qué demilita la longitud del fragmento a replicar?
A
Primers
Cebadores → Oligos
4
Q
ADNg
A
ADN genómico normal
5
Q
PCR convencional
A
- Amplificación de una región genética específica.
- Gel de agarosa o acrilamida
6
Q
PCR cualitativo
A
- Identiificar presencia o ausencia de un fragmento específico.
- Dx de enfermedades infecciosas.
7
Q
PCR semicuantitativo
A
- Nivel de expresión de un gen (ARNm) → biopsias
8
Q
PCR cuantitativo
A
- Cantidad de microorganismos en ARNm de un gen en particular.
9
Q
PCR múltiple
A
- Amplificación de varias regiones génicas en una misma reacción de PCR.
- Cada región cuenta con sus pares de oligos.
10
Q
Principios básicos de la PCR
A
- Complementariedad
- Dirección 5´→3´libre
11
Q
Etapas
A
- Desnaturalización
- Replicación
- Elongación
12
Q
PCR vs Sanger
A
En Sanger el extremo 3´esta bloquedo por ddntps
13
Q
Componentes necesarios para una PCR
A
- ADN molde
- Primers u oligos
- DNApol
- dNTPs
- Mg (cofactor)
14
Q
Aparato usado para provocar la reacción en cadena de la polimerasa
A
Termociclador
15
Q
Forma en la qué se encuentran los dNTPs
A
- Trifosfatada → Estabilidad para formar enlace fosfodiester (N-N)