Fall 2 - Karin Palmblad Flashcards
Hur många herpesvirus är humanpatogena?
8 st
Hur kan herpesvirus delas in?
Finns 3 subfamiljer; alfa, beta och gamma
Vilka virus ingår i alfaherpesvirus?
- Herpes simplex typ 1
- Herpes simplex typ 2
- Varinella zoster
Vilka virus ingår i gammaherpesvirus?
- Epstein-barr
- Kaposis sarkom
Vilka virus ingår i betaherpesvirus?
- Cytomegalovirus
- Herpes lymfotropic
- Human herpesvirus 7
Vilken är alfaherpesvirus primära målcell?
Mucoepiteliala celler
Vilken är alfaherpesvirus latensplats?
Neuron
Hur sprid alfaherpesvirus?
Närkontakt
Vilken är Epstein-barrs primära målcell?
B-celler ocg epitelceller
Vilken är Epstein-barrs latensplats?
B-celler
Hur sprid Epstein-barr?
Saliv
Vilken är cytomegalovirus primära målcell?
Monocyter, lymfocyter och epitelceller
Hur sprids cytomegalovirus?
Närkontakt
Hur är herpesvirus uppbyggd?
Ikosaedral, linjärt dsDNA, hölje
Herpes infektionsprocess
- Höljeprotein fäster till cellen och fuserar höljet
- Kapsid och tegument finns i cytoplasman
- DNAt tar sig till nukleus
- alfa, beta och gamma-RNA skapas i olika faser
- alfaRNA ger alfaproteiner (omedelbara prodteiner) som hjälper till med replikation och kontroll av värdcellen
- betaRNA ger betaproteiner (tidiga proteiner) om hjälper till med translation, agerar TF och enzymer
- gammaRNA ger gammaproteiner (sena proteiner) som ger strukturella proteiner till nya virionen
Hur verkar HSV immunosuppressivt?
HSV hämmar inflöde genom TAP till MHC1-molekylerna i ER mha ACP47 -Z MHC1 skickar till lysosomen
Hur verkar EBV immunosuppressivt?
EBV kan undankomma immunförsvaret genom:
- hämma proteasomnedbrytningen mha EBNA-1 -> peptider kan inte presenteras på MHC II
- produktion av IL-10 analog hämmar T-cellssvaret
Hur kan herpesvirus verka immunosuppressivt?
Exempelvis:
- Hämma proteasomnedbrytningen
- Hämma TAP
- Stimulera MHC1-nedbrytning från membranet och ER
- Producera IL-10 analoger
Hur kommer EBV in i sina målceller?
Genom CD21 och MHC klass II kommer viruset in i cellen
Vilka är symptomen för EBV?
Tre klassiska symtom för infektiös mononukleos är lymfadenopati, splenomegali
och exsudativ faryngit tillsammans med feber, obehag och hosta.
- Trötthet
- Febber
- Svullna lymfkörtlar
- Inflammerad svalg/hals
- Utslag på hud och mukosa
- Förstorad mjälte och lever
EBV patogenes
- EBV infekterar epitel- och B-celler genom att binda CD21 och MHC II
- Inbindning av CD21 promotar tillväxt av B-lymofcyter men kommer ligga latent (inga virala gener uttrycks)
- Någon typ av reaktivering sker vilket gör att zebraproteinet bildar komplex som får igång avläsningen
- När infektionen blivit lytisk komer B-celler att träffa på T-celler som kontrollerar tillväxten och läker ut infektionen
HSV patogenes
- Primärinfektion i epitel eller slemhinna gör att nervändarna blir infekterade och viruset transporteras till nervcellskroppen
- Virusets DNA ligger episomalt latent i cellkroppen
- Vid reaktivering färdas virions tillbaka till slemhinna eller i vissa fall centralt -> encephalit
Hur etableras latens i HSV?
Latens etableras vid inhiberad expression av alfa-gener. Detta beror sannolikt på:
- Avsaknad av faktorer i nukleis som krävs för genuttryck
- Hormonellt reglerad inhibition
- LAT-medierad inhibition
Var ligger varicella-zoster i latens?
I dorsala ganglier
Vilka kliniska manifestationer har HSV1?
Ange fyra gemensamma strukturella egenskaper för virus inom herpesfamiljen
Stora upp till 200nm. Dubbelsträngade DNA virus, viralt linjärt DNA skyddad i kapsid med ikosaedral nukleokapsidstruktur och yttre virala höljeproteiner infästa i cell-plasmamembran lipid hölje.
I Claras celler pågår just nu en lytisk replikationscykel, vad innebär det?
Viruset tar över värdcellen och replikerar tills cellen lyseras. Viruspartiklarna kan då spridas till andra celler.
Beskriv kortfattat de olika stegen i EBVs cellulära lytiska replikationscykel.
EBV replikerar som alla herpesvirus i kaskad, efter att EBV virusets kapsid levererat det virala dsDNA:t till cellnukleus påbörjas DNA-avläsningen med immediate early (alfa), early (beta) och late (gamma) vmRNA transkription och därefter translation och proteinuttryck.
Infektionscykeln har annars de typiska 8 replikationsstegen.
EBV infekterar främst B-celler och vissa epitelceller, varför infekteras just dessa celltyper?
EBV binder till komplement receptor 2 (CR2) vilken uttrycks av just B-celler och vissa epitelceller i pharynx.
Vad är mekanismerna bakom en patient med EBV lymfocytos och förekomsten av atypiska lymfocyter?
Proliferation och aktivering av framförallt CD8+ T-celler som avdödar de infekterade B-cellerna ligger bakom lymfocytosen.
Aktivering och proliferation gör T-celler större, atypiska. De infekterade B-cellerna är också antigenpresenterande celler (MHCI och MHCII) vilket bidrar till kraftig T-cellsaktivering.
EBV uttrycker en gen som är en homolog till cytokinen IL10. Vilken betydelse kan uttryck av ”viralt IL10” ha för sjukdomsförloppet?
IL10 är ett reglerande cytokin som begränsar immunreaktionen vilket också ökar virusets chanser att persistera i värden.
EBV kan under vissa omständigheter leda till en okontrollerad proliferation av B-celler, B-cellslymfom, vilka är riskfaktorerna?
EBV-orsakande Burkitt lymfom är ovanliga i Europa eftersom Malaria tros vara en co-faktor i lymfomutvecklingen, liksom EBV orsakad nasofaryngeal cancer
Vad påvisas i blodet med ett snabbtest för mononukleos?
Snabbtestet påvisar förekomst av ospecifika antikroppar så kallade heterofila antikroppar.
Vad kan man se tidigt i serologin vid ett EBV-förlopp?
Tidigt i sjukdomsförloppet (dagar) skulle specifik serologi utfalla negativ (inga specifika EBV antikroppar) eller positiv avseende IgM- antikroppar mot kapsidantigenet VCA.
Vilka övergripande angripningsmål kan antivirala medel ha?
Absorption och penetration
Transkription
Integrering av viralt DNA
Viral mognad
Vad finnsd det för olika typer av antivirala medel?
- DNA-polymerasinhibitorer (DNA-analoger som fastnar i polymeraset)
- Nukleosidanaloger - Tävlar om plats med DNA-polymeraset, kompetetiva (likt cancerbehandlingen, liknande biverkningar om långtidsbehandling pågår)
- Non-nukleosidanaloger - Ej kompetetiva, ser ut som händer och fastnar på DNA-polymeraser och hämmar enzymet kompetetivt
- Virala proteas-hämmare, falska proteiner som hämmar
- Integras-inhibitorer: Hämmar de integrerande enzymerna
- Fusions-inhibitorer, antikroppar extracellulärt mot cellreceptore eller peptider
- Neuroaminidasinhibitorer - Influenza kan inte göra komplett egress
Hur fungerar ribavirin?
Ribavirin: RNA-byggsten som hämmar genomreplikationen och RNA-syntes
Universaldrogen, stimulerar även våra Tc-celler, man vet inte hur men den gör det! Giftig i lång exponering, ackumuleras i erytrocyter och leder hemolytisk anemi.
Hur fungerar amantadine?
Amantadin: Svampprotein som fäster i M2-jonkanalen för influensa, sätter sig som propp i vätekanalen så att avklädningen inte kan ske
När ska antivirala medel tas i sjukdomsförloppet?
Antivirala medel ska tas under akutfasen som under akuta tillstånd kan vara väldigt kort.
Vilka antivirala medel är den huvudsakliga behandlingen mot influensa? Hur fungerar dessa?
Mot influensa finns det 4 typer av LM att används:
- Amantadine/Rimantadine fungerar mot typ A
- Svampprotein som fäster i M2-jonkanalen för influensa, sätter sig som propp i vätekanalen så att avklädningen inte kan ske
- Zanimivir/Oseltamivir fungerar mot typ A & B
- Blockerar neuroamidasenzymet genom att hindra inbindning av sialinsyra vilket reducerar virusfrisättning och förhöjd aggregering eller hopklumpning av viruspartiklar
Hur fungerar nukleosidanaloger och vad används det mot?
Nukleosidanaloger - måste ha låg laddningsgrad för att tillåtas passera plasmamembranet, cellen själv aktiverar drogen vilket är vitalt. De cellulära kinaserna bygger LM till en trifosfat, och först då kan den inkorporeras i DNA-syntesen och terminera den.
- Man använder detta mot Retro (HIV),hepatit B och herpes
Hur fungerar interferonet som antiviralt LM?
Interferoner – Induceras normalt av dsRNA virus och inhiberar cellulär/viral proteinsyntes då det aktiverar 2 cellulära proteiner; 2-5-syntas och dsRNA-beroende proteinkinas (PKR
Vilka LM används mot hepatit C och hur fungerar dessa?
Mot hepatit C används proteasinhibitorer boceprevir/simeprevir och ibland interferoner + ribavirin.
- Proteasinhibitorerna gör att virala proteiner inte kan trimmas.
- Ribavirin är en guanosin-analog som stoppar synesen av RNA
Vilka biverkningar kan komma av antivirala medel?
Bieffekter av antiviral behandling:
- Resistensutveckling
- Faktorer som är viktiga för att undvika resistensutveckling är complience, dos och biotillgänglighet, grad av immunosuppression och längs av behandlingen
- Analysering av resissensmönster rekommenderas vid en primärinfektion, tidigare misslyckad behandling och ändring av behandling samt graviditet
- Förändringar i cellmetabolismen
- Exempelvis ökade blodfetter, ändring fettfördelning
- Benmärgssupression
Vad är LAT?
I celler som promotar latens transktiberar en bit RNA, latency associated transcript, som skapas av det virala DNAt. Har 2 huvudfunktioner:
- Suppressar apoptos hos värden
- Suppressar lytiska gener av vDNA
Hur diagnostiseras EBV?
- EBV-snabbtest där man testar heterogena AK
- Serologiskt test
- Blodutsryk
Vilka olika AK kan man hitta vid serologiskt test av EBV och vad berättar dessa?
VCA-IgM ses vid en akut infektion
VCA-IgG ses månader efter infektionen
EBNA-IgG och IgM ses månader efter infektion
Vad kan man se vid blodutryk vid EBV-infektion?
Ökat antal lymofcyter med en tydlig dominans av mononukleära celler (lymfocyter och monocyter) samt stora, atypriska lymfocyter med basofil cytoplasma
Vilken AK påvisar akut EBV-infektion?
EVC-VCA av IgM-typ
Hur utförs realtids-PCR?
Mäter PCR över tid och kan då detekteraoch kvantifiera mängden virus
- Först lysera celler/virus/bakterier
- Rena fram nukleinsyor
- Tillföra primer, polymeras och dNTPS
- PCR i tre steg
- Öppnar i 96 grader
- Tillföra primers vid 45 grader
- Bygga på med polymeras och dNTPs vid 72 grader
