Examen de laboratoire - Dermatologie / Vénérologie Flashcards
Etapes d’analyse prélèvements superficiels (4 dont plusieurs sous-étapes)
- Recherche d’agents infectieux mycologiques
(i) Recherche de filament mycélien : examen direct blankophor, culture
(ii) Recherche de levures (intertrigos, candidoses mucocutanées, pustules…) : gram, culture - Recherche d’agents infectieux bactériens
(i) Recherche de flore / pathogènes courants : gram, culture
(ii) Recherche de gonocoques : gram, culture
(iii) Identification du tréponème pâle : microscope fond noir, PCR - Recherche d’agents infectieux parasitaires
(iv) Diagnostic de la gale : test à l’encre, squames
(v) Divers :
- Leishmaniose cutanée : empreinte + MGG - Recherche de virus : herpès, varicelle
- Immunofluorescence directe
- PCR
Aspect gram gonocoque
Diplocoque G- (fuchsia) intracellulaire (PMN)
Types de prélèvements superficiels (13)
Biopsie Culture Frottis Blankophor PCR : 24-48h IF directe (recherche virale) : 60 min, assez rapide, bonne spécificité mais sensibilité moins bonne IF directe (recherche d’autoimmunité) Sérologie Immuno-sérologie (recherche d’autoimmunité) Microscopie électronique Western Blots ELISA Dosage métaboliques ...
Examens complémentaires suspicion HSV (2)
- IF direct
- PCR
Examens complémentaires lésion syphilitique (2)
- Examen fond noir : via l’exsudat entre lame et lamelle –> mobilité du tréponème visible pour attester lésion syphilitique
- PCR Treponema pallidum : via génome, 24-48h —> notamment syphilis primaire encore non bruyante
Clinique leishmaniose
- Piqure d’insecte (mouche) : parasite
- Atteinte : cutanée (muqueuses visage ++, extrémités) ou disséminée (viscérale)
- Incubation : quelques semaines
- Cutané : papules, rouge indolore, de lésions acnéiformes, psoriasiformes (sèches) ou ulcérées (humides), uniques ou multiples, avec ou sans lésions satellites et de tailles diverses
- Résistante aux antiseptiques locaux
DD Leishmaniose (8)
- Ulcère tropical simple (infection bactérienne favorisée par le climat humide)
- Ulcère variqueux chronique
- Néoplasie cutanée
- Infections fongiques
- Mycobactérioses cutanées (tuberculose, mycobactérioses atypiques et lèpre)
- Dermatoses inflammatoires (par exemple, psoriasis, Pyoderma gangrenosum)
- Lymphomes et carcinomes de la sphère ORL
- Maladie de Wegener : granulomatose avec polyangéite = infla vsx sanguins
Traitement Leishmaniose (3)
- Soins de plaie (débridement, désinfection)
- Traitement local, simple ou combiné
- Traitement systémique.
Examens complémentaires Leishmaniose
- Frottis pour gram
- Coloration May Grundwald Giemsa –> microscope
Examens complémentaires lésions mycotiques
- Blankophor : micelles visibles
- Na2S : dissocie les liaisons disulfutres kératines –> permet au blankophor d’accéder aux champignons
- Culture : 8-10j, sur milieu riche
- 2nd culture : identification morphologie sur PDA —> examen microscopique des spores (dermatophytes) !
Clinique Malassezia (levure) et EC
- Macules confluant en placards jaunes-bruns : surtout zones corporelles graisseuses
- Examen direct de scotch / blankophor
Clinique gale (sarcopte) et EC
- Lésions papuleuse
- Prurit généralisé principalement nocturne (épargne le visage)
- Encre de chine –> sillon scabieux
- Examen direct sur prélèvement de squames avec oeufs
Clinique punaise de lit
- Pique surtout la nuit, avec +/- tâches de sang sur les draps
- Prurit érythémateux
- Lésions maculo-papuleuses avec point hémorragique
Types de maladies bulleuses (4) et cible des Ac
- Pemphigus vulgaire : Ag attaqué = desmogléine 3 (entre les kératinocytes) –> clivage le plus superficiel
- Pemphigus foliacé : attaque de desmogléine 1 (aussi entre les kératinocytes)
- Pemphigoïde bulleuse : attaque de BP180 et 230 à perte de liaison de la lame basale
- Pemphigoïde cicatricielle : attaque de laminine 5 et collagène 7 –> perte de liaison de la lame basale
Méthode immunofluorescence directe
Biopsie péri-lésionnelle
Coupes congelées, incubée avec un anticorps fluorescent puis examen microscope
Conservation :
- Milieu de Michel (recommandé) : milieu salin fixant protéines dans la peau
- Azote liquide
- NaCl 0.9% : doit arrivé dans les 24h sinon FN
But IF directe
Mettre en évidence et caractériser les auto-anticorps déposés au niveau de la peau = Ac épidermique in vivo
Exemple d’IF direct : spécificités :
- Pemphigus
- Dermatite herpétiforme
- Lupus
- Pemphigoïde
Pemphigus : dépôt des Ig en maille de fillet (IgG intercellulaire)
Dermatite herpétiforme : dépôt papillaire épidermique (IgA)
Lupus : dépôt JDE plus granulaire (IgM, IgG, +/- IgE et C3)
Pemphigoïde : dépôt JDE moins granulaire, linéaire (IgG)
Méthode immunosérologie
- IF indirecte (via fluorochrome)
- Méthodes enzymatiques : ELISA, immunoblot
But immunosérologie
Identification, classification, dosage des auto-anticorps circulants = sériques
Méthode IF indirecte
Coupe de tissu puis lecture au microscope : consiste en la réalisation sur peau normale clivée = antigène (peau humaine témoin, oesophage de singe, vessie de rat) d’un examen du sérum du patient à la recherche d’autoanticorps circulants dirigés contre la membrane basale de l’épiderme
Méthode ELISA
Utilise des antigènes / protéines purifiés ou recombinants comme substrats (BP180 par ex.) sur lesquels est incubé le sérum des patients. Les anticorps du sérum sont ensuite révélés par un procédé enzymatique.
But ELISA (3 exemples)
Détection IgG : par exemple :
- Ac anti-desmogléine 1 (pemphigus superficiel et vulgaire)
- Ac anti-desmogléine 3 (pemphigus vulgaire)
- Ac anti-BP180 (pemphigoïde bulleuse / muqueuse / gestationnelle)
Technique immunoblot
- Echantillons protéiques sont déposés sur ungeld’électrophorèse séparés selon leurs caractéristiques : migration protéines
- Une fois migrées : transférées sur une membrane qui peut être composée de nitrocellulose ou de polyfluorure de vinylidène (PVDF)
- Détection: appliquer sur la membrane desanticorpsmarqués spécifiques desprotéinesque l’on veut observer. On pourra ainsi observer leur position sur le gel.
