cours 5 mcb2991

Question 1

comment montrer quel isotype de classe II restrein la présentation d’une protéine

Answer 1

1. immunise avec Ag pour monter un répertoire de cellules T
2. mélange cellules T contre Ag spécifique avec CPA exprimant un seul CMH II
3. voit quels T sont activés selon quel CMH II
4. en utilisant séquences protéiques de l’Ag et des overlapping peptides: peut déterminer quel épitope est reconnu par le CMH II

Question 2

qu’est-ce que l’immunopeptidome/peptidome

Answer 2

analyse des peptides des molécules de CMH

Question 3

quelles sont les méthodes d’analyse de peptidome

Answer 3

1. donne Ag à CPA
2. immunoprécipite les différents CMH avec des Ac monoclonaux
3. élution à l’acide pour dénaturer CMH et libérer le peptide
4. purification peptide par chromatographie HPLC (sépare peptides des molécules de CMH)
5. MS pour déterminer la séquence a.a du peptide

Question 4

le peptidome est constitué principalement de quoi

Answer 4

peptides du soi

( en effet le plus souvent ce sont des peptides du soi trouvé dans CMH)

Question 5

quelles sont les méthodes générales d’évasion/subversion des pathogènes

Answer 5

camouflage, sabotage, exploitation

Question 6

exemples de sabotage des CMH I

Answer 6

• transcription: diminue classe I en diminuant TAP et protéasome
• transport peptidique: empêche bon fonctionnement de TAP
• internalisation: diminue expression CMH I
• destruction: dégradation par protéasome

Question 7

exemples de sabotage des CMH II

Answer 7

• transcription: diminue IFN-gamma et FT
• protéolyse: dégradation chaine invariante ou diminue fonctioni lysosomale
• rétention/dégradation: production IL-10 (qui diminue la réponse immunitaire)

Question 8

comment ecq IL-10 affecte l’ubiquitination de CMH II

Answer 8

IL-10 induit expression MARCH1 qui est une ubiquitine ligase, ubiquitine CMH II: sera dégradé par protéase et ne pourra pas présenter