PAT - Néoplasie 3 - Outils diagnostiques et rôle du pathologiste (OP) Flashcards
Flashcards réalisées par Olivier Prémont
Le pathologiste joue discrètement un rôle central et unique dans une équipe multidisciplinaire qui prend en charge les patients cancéreux. Quels sont ces rôles?
- Diagnosticien: Établit le diagnostic de malignité, l’origine et le stade d’une tumeur
- Thérapeute: Confirme la qualité des biopsies et des résections, établit la réponse à un traitement néoadjuvant, identifie des cibles thérapeutiques pour la médecine personnalisée et les complications des thérapies (ex. infections opportunistes, réactions de toxicité)
- Consultant: Choisit le bon prélèvement, guider le chirurgien en salle d’opération
- Enseignant: Enseigne aux étudiants, externes, résidents, fellows, collègues, autres profesionnels de la santé.
- Chercheur: Occupe une position charnière entre les sciences cliniques et fondamentales
Quels sont les outils diagnostiques du pathologiste?
- Examen extemporané ou ROSE pendant les chirurgies et pendant les biopsies.
- Histologie avec technique usuelle et techniques spéciales sur lames (histochimie, IHC, FISH)
- Cytologie avec technique usuelle et techniques spéciales sur lames (histochimie, IHC, FISH)
- Diagnostic moléculaire (PCR, NGS)
Quelle est la différence entre l’histologie et la cytologie?
- Histologie: Sections tissulaires (coloration HE)
- Cytologie: Frottis cellulaires (coloration Pap)
Quelles sont les 6 étapes de la technique histologique?
étapes avant la coloration
- Mise en cassettes
- Imprégnation
- Enrobage
- Bloc cellulaire
- Section au microtome
- Section non colorées
Quels sont les deux types de coloration que l’on peut faire à partir d’une section non colorée?
- Coloration de routine
- Coloration spéciale
Donne une lame histologique
Quelles sont les étapes pour obtenir une lame de cytologie?
- Frottis (cytoponction)
- Frottis (brossage)
- Coloration de routine
- Lame de cytologie
Vrai ou Faux
Les blocs cellulaires (blocs de paraffine) peuvent se conserver très longtemps.
Vrai
Certains blocs ont été réutilisés 100 ans plus tard.
Vrai ou Faux
Les blocs cellulaires devraient être préparés à partir des échantillons cytologiques, incluant les liquides pleuraux?
Vrai
Dans quel but prépare-t-on des blocs cellulaires?
Le but est de pouvoir effectuer les colorations spéciales et les analyses de biomarqueurs diagnostiques et prédictifs/thérapeutiques comme sur les prélèvements tissulaires obtenus par biopsie ou chirurgie.
Quelles sont les étapes de la préparation d’un bloc cellulaire?
Y’a beaucoup d’étapes…
Pas certain que c’est utile de savoir ça
- Fixation au formol
- Préparation pour centrifugation
- Centrifugation
- On garde le culot cellulaire résiduel
- Préparation de la suspensation d’agar
- Pipetage de la suspension d’agar
- Re suspension du culot cellulaire dans l’agar
- Solidification de l’agar
- Récupération de l’agar solidifié pour l’histologie
- Mise en cassettes de l’agar solidifié
Que sont un examen extemporané et un ROSE (Rapid On-Site Evaluation)?
LONGUE RÉPONSE
- Un extemporané est un examen histologique urgent demandé au pathologiste par le chirurgien ou le radiologiste qui veulent un diagnostic immédiat pendant qu’un patient est opéré ou à subir une biopsie.
- Le tissu soumis en extemporané est congelé à -20°C dans un appareil appelé cryostat; les sections du tissu congelé sont étalées sur lames, colorées au HE et examinées par le pathologiste, qui donne immédiatement un diagnostic provisoire au médecin traitant, diagnostic à confirmer ou à préciser sur des sections définitives fixées au formol et inclues en paraffine (concordance de 95%).
- La morphologie est moins claire que sur une section définitive mais le résultat prend seulement 10-20 minutes au lieu d’une journée. Le prélèvement soumis en extemporané peut être une biopsie millimétrique ou une pièce de résection contenant plusieurs organes, auquel cas seulement la partie d’intérêt est échantillonnée pour congélation (ex. tumeur, marge de résection, ganglion, etc.)
Quelles sont les trois indications principales pour faire un examen extemporané et un ROSE?
- Évaluer la qualité d’un tissu pour poser un diagnostic.
- Évaluer une marge de résection.
- Poser un diagnostic qui change le déroulement d’une chirurgie.
Dans les techniques histologiques spéciales, décrivez ce qu’est l’histochimie à partir de bloc de paraffine?
Les sections histologiques préparées d’un bloc de paraffine sont colorées avec des colorants visant à mettre en évidence certains éléments cellulaires ou des micro-organismes en se basant sur leur composition biochimique
Dans les techniques histologiques spéciales, décrivez ce qu’est l’immunohistochimie (IHC) à partir de bloc de paraffine?
Fucking longue description de ce que c’est
Les sections histologiques préparées d’un bloc de paraffine sont incubées avec un anticorps couplé à un système d’amplification colorimétrique qui permet de révéler la présence de réactivité avec un antigène recherché dans la membrane cytoplasmique, le cytoplasme ou le noyau des cellules du tissu étudié.
Le résultat positif est habituellement un marquage brun ou rouge détectant la réaction antigène-anticorps sur fond bleu du contre colorant.
Très utile et très spécifique pour les biomarqueurs diagnostiques comme TTF-1 (marquage nucléaire brun dans les adénocarcinomes pulmonaires) et les biomarqueurs thérapeutiques comme ALK (marquage cytoplasmique dans les adénocarcinomes pulmonaires avec translocation ALK).
Dans les techniques histologiques spéciales, décrivez ce qu’est l’hybridation in situ en fluorescence (FISH) à partir de bloc de paraffine?
Fucking longue description de ce que c’est
Les sections histologiques préparées d’un bloc de paraffine sont incubées avec des sondes fluorescentes d’ADN qui permettent de révéler la présence d’hybridation avec des séquences d’ADN recherchées dans le noyau des cellules du tissu étudié.
Le résultat prend la forme de petits points fluorescents dans les noyaux contre-colorés en bleu.
Une analyse FISH peut rechercher :
- Une amplification (augmentation du nombre de copies) d’un gène (ex. Amplification HER2 dans le cancer du sein utilisée comme biomarqueur prédictif/thérapeutique)
- Une translocation se manifestant soit par une fusion où se superposent de deux signaux normalement séparés (ex. Translocation IGH-BCL2 diagnostique du lymphome folliculaire)
- Un bris, où se séparent alors deux signaux normalement associés (ex. Translocation ALK dans le cancer du poumon utilisée comme biomarqueur prédictif/thérapeutique).
