MTX

Question 1

Wat is MTX en wanneer gebruik je het?

Answer 1

Methotrexaat (MTX) is een foliumzuur antagonist
- Indicaties voor methotrexaat bij auto-immuun aandoeningen zijn psoriasis, reumatoïde artritis en juveniele idiopathische artritis
- Wordt ook gebruikt als chemotherapie bij verschillende maligniteiten

Question 2

Wat zijn de 3 mechanismen van MTX?

Answer 2

1 MTX wordt opgenomen door de folaatreceptor SLC19A1 (RFC1)
- In de cel wordt het omgezet naar MTX polyglutamates (MTX-PG)
- Tot 5 glutamaat residues worden gekoppeld aan het MTX
2 MTX remt in de cel het enzym dihydrofolaat reductase (DHF) wat dihydrofolaat omzet in tetrahydrofolaat
- Tetrahydrofolaat is de actieve vorm van foliumzuur
- Tetrahydrofolaat is nodig voor de synthese van DNA en RNA

3 Daarnaast remt MTX het enzym AICAR transformylase (ATIC) waardoor adenosine
accumuleert
- Adenosine heeft een auto- inflammatoire functie
Daarnaast zorgt remming van ATIC voor minder de novo purine synthese -> nodig voor synthese van DNA

Question 3

Hoe meet je MTX?

Answer 3

• Kan in verschillende matrices gemeten worden voor de diagnostiek: plasma, erytrocyten -> In research setting ook gemeten in spermatozoa en seminal fluid
  
  • Meten de verschillende MTX-PG
  • Wordt gemeten met LC-MS/MS: Hele sensitieve en specifieke methode, Weinig last van interferentie, vloeistofchromatografie

Question 4

Wat is vloeistofchromatografie?

Answer 4

Vloeistofchromatografie: Scheiding op basis van interacties met een vloeistof (mobiele) en stationaire fase (kolommateriaal)

Question 5

Wat zijn aandachts punten bij gebruik van de LC-MS/MS?

Answer 5

Je gebruikt altijd een interne standaard (IS): 13^C of deuterium (2^H)

Daarnaast maak je een kalibratielijn met standaarden met bekende hoeveelheden