zucne kiseline

Question 1

uzorak

Answer 1

-serum
-naste ili posle jela zbog stimulacije sekrecije hranom
-serum treba odvojiti od koaguluma u roku od 2h
-uzorak stabila na sobnoj 24h, u frizideru 7 dana

Question 2

koje se sve metode koriste

Answer 2

1. metode koje odredjuju ukupne zucne kiseline- enzimske
2. metode koje odredjuju pojedinacne zucne kis - imunohemijske, hromatografske

Question 3

enzimske

Answer 3

-enzim 3alfa-hidroksisteroid DH u prisustvu Tio-NAD katalizuje oksidaciju 3a-hidroksilnih grupa svih zucnih kiselina pri cemu nastaje 3-keto grupa i Tio-NADH
-kolicina stvorenog Tio-NADH proporcionalna je promeni apsorbancije
-osetljivost ove reakcije se povecava primenom fluorescente boje ili luciferaze pri cemu nastaje hemiluminiscencija

Question 4

imunohemijske

Answer 4

-radioimunoodredjivanje
-zasnivaju se na primeni specificnih At za steroidni i konjugovani deo zucnih kis

Question 5

hromatografske

Answer 5

-referentne
-prednost je sto omogucavaju kvantifikaciju pojedinacnih zucnih kis
1. GASNA HROMATOGRAFIJA MASENA SPEKTROFOTOMETRIJA GC-MS
-komplikovanija priprema koja podrazumeva uklanjanje glicina i taurinskog dela, kao i prevodjenje analita u trimetilsilil derivate
-nepolarna stacionarna faza
2. HPLC MS/MS

Question 6

Rf

Answer 6

-naste(12h): 1mimol/l
-90-120 min nakon obroka bogatog mastima: 4-6mimol/l