glukoza

Question 1

konverzija glukoze u punoj krvi u glukozu u plazmi

Answer 1

mnozi se sa 1,11

Question 2

uzorak

Answer 2

1. SERUM
   - mora sto pre da se odvoji od koaguluma 30-40min
   -stabilna 8h na sobnoj i 72h u frizideru
2. PLAZMA
   -NaF usporava glikolizu, stabilnost uzorka na sobnoj i do 24h
3. PUNA KRV
   -jako brzo se konc smanjuje 0,5mmol/l na sat
4. CEREBROSPINALNA TECNOST
   -moze da sadrzi bakterije ili druge celije pa se mora odmah analizirati
5. URIN
   -24h
   -u sud se pre sakupljanja dodaje 5ml glacijalne sircetne ili 5g Na benzoata kao konzervans

Question 3

REDUKCIONE METODE

Answer 3

1. starije metode
   vecina se zasniva na FELINGOVOJ METODI:
   -zasniva se na sposobnosti glukoze da direktno redukuje jone bakra do jednovalentnog bakar jona.
   -zagrevanjem se redukovani joni bakra prevode u bakar I oksid cija se konc meri razlicitim metodama:
2. Folin-Wu sa fosfomolibdatom
3. Somodji- Nelsonova sa arsenmolibdatom pri cemu se formiraju plava molibdenova jedinjenja
   - nedostatak ovih metoda je nedovoljna specificnost, osim glukoze na isti nacin reaguju i druge redukcione sup (kreatinin, mokracna, askorbinska)
4. BENEDIKTOVA MODIFIKACIJA METODE SA Cu jonima
   -danas u upotrebi ali samo kao semikvantitativna metoda za dokazivanje prisustva secera u urinu
   -ovaj postupak je osetljiv na prisustvo ukupnih redukujucih supstanci u urinu i u toj reakciji nastaju talozi crvenog bakar1oksida i zutog bakar1hidroksida
   -sto je veca konz glukoze talog ce biti crveniji
   -ova metoda se uz enzimsku sa glukoza oksidazom koristi za skrining novorodjencadi na urodjene greske metabolizma UH
   -negativan enzimski a pozitivna benediktova ukazuju na ove bolesti jer negativan enzimski pokazuje da nema glukoze u urinu a pozitivna benediktova prisustvo nekog redukujuceg secera
   -benediktov reagens: CuSo4 rastvoren u veodi uz dodatak bazne komponente koju cine Na-citrat i Na2CO3
5. metoda sa fericijanidom u alkalnim uslovima
   -dolazi do redukcije zutog heksacijanoferata (3+) u bezboji heksacijanoferat (2+) sto dovodi do samnjenja apsorbacije

Question 4

hemijske metode

Answer 4

-zasnivaju se na reakciji aldoza sa fenolima ili aromaticnim aminima u kiseloj sredini
1. POSTUPAK SA O-TOLUIDINOM
-aldehidna grupa kvantitativno reaguje sa o-toluidinom u vrucem rastvoru sircetne pri cemu nastaje glikozilamin, pa sifova baza i na kraju kompleksna smesa hromogena zelene boje
-PREDNOSTI:
-zadovoljavajuca tacnost, preciznos, osetljivos
NEDOSTACI:
-korozivnost
-toksicnost
-nestabilnost reagensa
-lazno poviseni rezultati kao posledica prisustva uree i drugih aldoza

Question 5

enzimske metode

Answer 5

1. sa heksokinazom- referentna
2. glukoza oksidazom- metoda izbora
3. glukoza dehidrogenazom
   -sve su automatizovane

Question 6

heksozakinaza metoda

Answer 6

1. glukoza i atp pod dejstvom heksokinaze daju G6P
2. G6P sa NAD/NADP pod dejstvom G6PDH daje 6fosfoglukonat i NADH/NADPH
   -dolazi do redukcije koenzima i primenjuje se varburgov opticki test, prati se promena povecanja apsorbancije

Question 7

varburgkov opticki

Answer 7

-u reakcijama koristimo oksidovane ili redukovane oblike koenzima NAD/NADP
-zasniva se na specificnim apsorpcionim spektrima oksidovanih i redukovanih forma
-obe forme imaju apsorpcioni maks na 260 ali samo redukovana forma ima maks i na 340 dok oksidovana uopste ne apsorbuje
-zato se sa povecanjem konc redukovanog oblika povecava i apsorbancija i obrnuto

Question 8

metoda sa glukoza oksidazom

Answer 8

1. glukoza na koju deluje GLUKOZA OKSIDAZA i nastaje glukonska kiselina i H2O2
2. H2O2+ fenol+PAP dejstvo PEROKSIDAZE crveni hinonimin

-reakcija koju katalizuje GOD je specificna za beta D glukozu. U serumu se nalazi i alfa i beta forma mada vremenom alfa predje spontano u beta za sta je potrebno malo produzeno vreme inkubacije. Ako zelimo da ubrzamo reakciju mozemo da dodamo mutarotazu

-reakcija sa peroksidazom je nespecificna i podlozna je interferenciji u prisustvu redukujucih supstanci koje se oksiduju umesto hromogena i daju lazno snizene rezultate. Ovaj efekat je izrazen posebno u urinu gde je veca konc redukovanih oblina

-reakcija sa GOD moze da se prati i polarografskim merenjem utrosenog kiseonika pomocu specificne kiseonicne elektrode pa se na ovaj nacin izbegavaju interferencije indikatorske reakcije. Uklanjanje nastalog H2O2 koji se moze oksidovati do O2 postize se reakcijom sa etanolom u prisustvu katalaze

Question 9

metoda sa glukoza dehidrogenazom

Answer 9

glukoza+NAD =GDH= D-glukono-5lakton + NADH
-reakcija specificna za beta D glukozu
-varburgov opticki test prati se povecanje apsorbancije kineticki ili kao end point modifikacija

Question 10

glukometar

Answer 10

-preko reakcije sa GOD
-nacin merenja konc proizvoda je zasnovan na principu refleksione fotometrije ili elektrohemijski
-aparati su kalibrisani da daju rez za konc glukoze u plazmi

Question 11

priprema za ogtt

Answer 11

-3 dana norm ishrana (preko 150g UH) i norm fizicka aktivnost
-4 dana pre iskljucivanje lekova uz nadzor lekara
-12h pre nema pusenja, hrane, pica, fizicke aktivnosti
-30min pre mirovanje

Question 12

koliko se glukoze unosi na ogtt

Answer 12

-75g u 300ml vode
-deca unose 1,5g na kg telesne mase ali svakako ne preko 75g

Question 13

koje bolesti osim dm dovode do hiperglikemije

Answer 13

-Kusingov sindrom (kortizol)
-Akromegalija (hormon rasta)
-Feohromocitom(kateholamini)
-tireotoksikoza
-pankreatitisi i neoplazme
-lekovi (tiazidni diuretici)

Question 14

konc glukoze u hipoglikemiji

Answer 14

manja od 2,8mmol/l

Question 15

zasto dolazi do hipoglikemije osim pod neonatusa

Answer 15

-bolesti pankreasa- insulinom
-insuficijencija hipofize, nadbubrega
-hipotireoza
-urodjenje greske metabolizma UH
-lekovi (salicilaiti, antikoagulansi)