kreatitin Flashcards
sta je kreatinin i kako nastaje
kiseli imid
nastaje spontano degidratacijom i ciklizacijom iz kreatina
gde se sintetise kreatin-, a gde ostvaruje svoj uticaj
-sintetise se u jetri bubrezima i pankreasu
-putem krvi se transportuje do drugih org pre svega misica i mozga
-u misicima i mozgu se fosforilise do visoko eng jedinjenja kreatin-fosfata koji se prilikom svake kontrakcije prevodi u kreatin i onda ponovo fosforilise ili spontano ireverzibilno pretvara u kreatinin
koliko se kreatinina stvori u toku dana i od cega zavisi
-kolicina stvorena u toku dana je relativno konstantna a zavisi od misicne mase tj od starosti i pola a ne od telesne mase i nacina ishrane
sta se desava sa kreatininom kad se stvori
transportuje se do bubrega
u glomerulima se filtrira a u tubulima ne reapsorbuje
kada je povisena njegova konc u plazmi javlja se pojacana sekrecija kreatinina u tubulima
kada se javljaju povisene konc kreatinina u plazmi
-smanjene filtracije u glomerulima(bubrezna ili srcana insuficijencija)
-povecano oslobadjanje kreatinina iz muskulature(misicna distrofija ili traume)
-primene nefrotoksicnih lekova
sta je brzina glomerularne filtracije i kada se koristi i koje su norm vrednosti
-GFR je brzina protoka plazme kroz glomerularnu membranu izrazeno u ml/min
-norm vrednost je 125ml/min
-koristi se za procenu bubrezne funkcije i smanjenje ukazuje na ostecenje bubrega
-koristi se za procenu progresije bolesti, adekvatne doze leka
-zavisi od starosti, pola, misicne mase, fizicke aktivnosti, nutritivnog statusa
sta je klirens
to je zapremina plazme koja se “ocisti” od neke sup u minuti
sta mora da poseduje sup da bi bila dobar marker za procenu GFR
- kompletno se filtrira u glometulima
- ne reapsorbuje se u tubulima
3 ne sekretuje se u tubulima - ne metabolise se u bubrezima
- ne eliminise se drugim putevima
na cemu se zasniva GFR
-na odredjivanju konc nekr sup u plazmi ili klirensu nekih endogenih ili egzogenih sup
-kod idealnih markera GFR=klirensu jer je kolicina sup koja se filtrira u glomerulima jednaka kolicini koja se ekskretuje urinom
koji su jedostaci primene klirensa kreatinina za procenu GFR
-neadekvatno skupljanje 24h urina
-nedostaci samog kreatina kao markera:
1. kolicina sekretovanoh kreatinina se moze znacajno povrcati u slucaju renalne insuficijencije sto moze dovesti do lazno povisenog klirensa i GFR
2. konc kreatinina u plazmi moze ostati u opsegu referentnih vrednosti cak i kada postoji znacajno ostecenje bubrega jer se njegova konc znacajno povecava tek kafa se GFR smanji na polovini fizioloske vrednosti
3. usled difuzije kreatinina izmedju ili kroz tubularne epitelne celuje u pravcu konc gradijenta i prelaska u plazmu moze doci do niskih vrednosti GFR
4. znacajna intraindividualna varijacija u dnevnoj ekskreciji kreatinina
5. zbog interferencija u analitickim metodama kogu se javiti lazno povisene vrednosti kreatinina
koje formule potoje za izracunavanje GFR
-cockroft-gault
-mdrd
-klasicna jaffe
-ckd-epi
sta ulazi u formule
starost
pol
rasa
povrsina tela
Princip Jaffe reakcije
-kreatinin reaguje sa alkalnim pikratom pri cemu se obrazuje kompleks koji se peri spektrofotometrijski na maksimalnoj talasnoj duzini izmedju 490-500nm
-koncentracija NaOH i temperatura uticu na reakciju i moraju da se kontrolisu
koje su pozitivne interferencije Jaffe reakcije
-supstance koje redukuju pikrat u pikramat (vit C, mokracna kis, glukoza,fruktoza)
-pseudokreatinini(piruvat, aceton, aminokis, proteini)
koje su negativne interferencije Jaffe reakcije
-bilirubin i drugi proizvodi degradacije hemiglobina
koje modifikacije su uvedene u Jaffe reakciju da se poveca specificnost
- Lloydov reagens (hidratisani Al-silikat)- adsorbuje se kreatinin na njegovu povrsinu i nakon talozenja adsorbata odliva se supernatant u kome se nalaze interferirajuce sup, pa se na ovako adsorbovan kreatinin dodaje alkalni pikrat i obrazuje kreatinin-pikrat kompleks
- Kiselina- nakon dodatka alkalnog pikrata izmeri se apsorbancija, pa se doda kiselina koja razlaze kompleks kreatinin-pikrat i onda se izmeri apsorbancija koja potice od kompleksa koji se obrazuje izmedju nekreatininskih hromogena i pikrata i koncentracija kreatinina jednaka je razlici ovih apsorbancija
- Katjonska izmenjivacka smola- adsorbuje kreatinin iz kiselog rastvora, eluira se sa kolone i dodaje se alkalni pikrat i meri konc kompleksa
- Kineticke metode- NAJCESCE SE KORISTI
-zasniva se na tome da jedna vrsta interferenata reaguje sa pikratom u prvih 20s a druga izmedju 80-100s dok vreme izmedju 20-80s odgovara reakciji kreatinina i onda se tada meri brzina reakcije
koje su enzimske metode
kreatininaza i kreatin kinaza
kreatininaza i kreatinaza
kreatinin deaminaza
kreatininaza i kreatin kinaza
-zasniva se na reakciji kreatininaze u kojoj se kreatinin prevodi u kreatin
1)
kreatinin + H2O(kreatininaza)=kreatin
2)
kreatin+ATP (kreatin kinaza)=kreatinP +ADP
3)
ADP + fosfoenolpiruvat (piruvat kinaza) = piruvat + ATP
4)
piruvat + NADH + H (ldh)= laktat + NAD
-zbog oksidacije nadh do nad moze se pratiti smanjenje apsorbancije na 340nm
-potrebna je inkubacija 30min
-ograniceni je niskom osetljivoscu i preciznoscu a visokom cenom
kreatininaza i kreatinaza
1)
kreatinin + h2o (kreatininaza)= kreatin
2)
kreatin + h2o (kreatinaza)= sarkozin+urea
3)
sarkozin +o2 + h2o (sarkozin oksidaza)= formaldehid+glicin+h2o2
4)
redukovani hromogen+h2o2 (peroksidaza) = oksid hromog + 2h2o
-kreatinin moze da se kvantifikuje preko vodonik peroksida koji oksiduje hromogen pri cemu je apsorbancija oksidovanog hromogena proporcionalna konc kreatinina ili preko formaldehida koji se oksiduje do mravlje kis kad se prati apsorbancija koja potice od nadh
kreatinin dezaminaza
u reakciji koju katalizuje kreatinin dezaminaza nastaju N-metilhidantoin i NH3
daljim reakcijama se Nmetilhidantoin prevodi u sarkozin u kvantifikacija kreatinina je idemticna kao u prethodnoj metodi
GC-IDMS
-gasna hromatografija-izotopska dilucija masena spektrometrija
-referentna metoda
-pre GC je potrebno izvrsiti derivatizaciju kreatinina zbog njegove polarnosti
-analiticki nedostatak je taj sto kreatin derivatizacijom daje isti profukt kao kreatinin
HPLC-IDMS
-jednostavnije i brze jer ne zahtevaju derivatizaciju vec samo precipitaciju proteina pre izvodjenja
-osetljive i specificne
-nakon hplc kreatinin se kvantifikuje jaffe reakcijom, direktnim merenjem apsorbancije ili enzimskim reakcijama
koliko dugo je stabilan kreatinin
plazma, serum i razblazeni urin:
7 dana na 4 stepena
dugo na -20stepeni
zasto se serum treba sto pre odvojiti od krvnih celija
-stajanjem pune krvi dolazi do oslobadjanja nekreatininskih hromogena koji dovode do lazno povosenih vrednosti kad se odredjuje jaffe reakcijom, ali enzimske metode iskljucuju ovu interferenciju
