Spectrométrie de masse Flashcards
Nommer les différents types de MS (analyseur de masse) (4). Lequel est le plus utilisé en clinique?
- Quadripôle
- TOF (time of flight)
- Trappe ionique
- Secteur électromagnétique
Le quadripôle est le plus utilisé en clinique
Quels types d’analyseurs de masse peuvent être combinés pour faire de la MS en tandem (3)? Lequel possède une meilleure résolution?
- QQQ (triple quad) ou QqQ (ou 2 quad et une cellule de collision)
- Q-trap
- Q-TOF
Le Q-TOF a une résolution plus élevée (10 000 vs 5000 pour QQQ et 6000 pour Q-trap)
Quel est l’avantage principal de la MS en tandem?
Moins d’interférences potentielles (meilleure spécificité)
Est-ce que le standard interne permet de toujours corriger pour la suppression d’ion?
NON
Le SI permet uniquement de corriger pour la suppression d’ion s’il co-élue avec la molécule d’intérêt (ionisation au même moment). La variation de la composition de la phrase mobile et des autres molécules présentes au moment de l’ionisation peut contribuer différemment à la suppression d’ion.
Dans quel état l’échantillon doit-il être pour qu’il puisse être analysé en MS (2)?
État gazeux et ionisé
Quelle composante endogène de la matrice sanguine est bien connue pour interférer avec le processus d’ionisation en MS?
Les lipides (majoritairement les phospholipides)
Qu’est-ce qu’un composé isobare? Donner un exemple
Un composé ayant la même masse d’ion précurseur et qui partage un fragment de même masse que l’analyte d’intérêt.
Potentielle interférence Ex: un médicament et ses métabolites peuvent être isobares avec l’analyte d’intérêt; les stéroïdes
Quel(s) type(s) de marquage isotopique (2H, 13C, 15N) est-il préférable de choisir pour les standards internes? Pourquoi?
Préférable d’utiliser 13C et 15N.
Raisons:
- Les molécules marquées avec 2H peuvent se comporter différemment lors de la chromatographie (shift de temps de rétention)
- Le marquage peut être perdu à cause d’échange avec l’hydrogène
Que signifie l’acronyme MALDI-TOF?
Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization - Time of Flight
En français… Spectrométrie de masse en temps de vol après désorption-ionisation laser assistée par matrice
Nommer une configuration d’instrument utilisée pendant le développement de méthode qui permet entre autre d’évaluer la suppression ionique selon l’effet de la matrice. Décrire brièvement ce mode/cette configuration.
Postcolumn Infusion (PCI)
Analyte pur injecté en continu après la colonne HPLC, avant la source d’ionisation. Injection et chromatographie normale de la matrice dépourvue d’analyte (en comparaison avec injection en continu d’un blanc)
Quelles sont les caractéristiques d’un bon standard interne?
- Chimiquement comparable à l’analyte
- Pas présent dans l’échantillon à analyser
- Réagit de la même façon aux variations analytiques que la molécule à doser
- Doit être “séparable”/distinguable de l’analyte (masse en MS)
Décrivez le rôle du standard interne dans les analyses chromatographiques quantitatives des médicaments dans le sérum. (OCQ clin 2005 A9)
Le standard interne corrige pour :
- Le rendement d’extraction
- La suppression d’ions
- Les erreurs de pipetage (après ajout du SI)
- Les variations du volume d’injection
- Les variations légères des conditions de chromatogaphie
- La sensibilité des détecteurs
Combien de calibrateurs sont minimalement requis pour produire la courbe de calibration en MS (CLSI)?
Minimum 6 qui ne sont pas égal à 0
Quelle transition précurseur->fragment doit-on éviter de choisir à tout prix ?
Une transition qui correspond à la perte de molécule d’eau (∆18 m/z)
Quels sont les critères de validation d’une méthode MS (CV et biais) (CLSI)?
Biais et CV < 15%
LLMI : CV <20% et Biais <15%