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DEPD Sarah > Pathologie > Flashcards

Pathologie Flashcards

1
Q

Quels sont les rôles du pathologiste?

A
  • Rôle diagnostic
    • Temps d’analyse important
  • Rôle en recherche clinique et fondamentale
  • Enseignement et formation
  • Examen extemporané : Diagnostics rapides sur place (garde)
  • Fait parti d’équipes multidisciplinaire (collaborateur pour Tx)
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Q

Nommer les procédés de routine en pathologie, de la réception des prélèvements à l’obtention des lames histologiques

A

Préanalytique :

  • Réception
  • Fixation (formol)
  • Description macroscopique
  • Circulation (paraffine)
  • Coupe
  • Coloration et montage

Analytique et post-analytique :

  • Analyse des lames
  • Dictée/transcription
  • Validation/envoi des rapports
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Q

Nommer différents types de spécimens reçus au laboratoire de pathologie

A
  • Types de prélèvement :
    • Biopsie
    • Pièces chirurgicales
    • Liquides (cytologie)
  • État du prélèvement :
    • Frais
      • Tx rapide requis! Ajout de fixateur rapide pour limiter l’altération du spécimen
    • Dans un fixateur (formol, alcool)
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4
Q

Discuter de l’importance de l’étape de fixation

A

Important pour immobiliser les composantes cellulaires d’un tissus dans un état aussi proche que possible de l’état vivant tout en assurant sa conservation

  • Base du processus en pathologie
  • Qualité de la fixation est capitale pour le bon déroulement des étapes subséquentes
    • Impact le reste du processus et l’interprétation du spécimen (limité si dégradé)
  • Les gros spécimens doivent être coupés pour permettre de préserver les parties centrales
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5
Q

Quelles sont les conditions à respecter pour favoriser une bonne fixation?

A
  • Volume de fixateur : 10x le volume du prélèvement
  • Temps requis pour la fixation : 1 mm/h
  • Couper les gros spécimen pour s’assurer de préserver l’intégrité des parties centrales

*Surfixation peu altérer les protéines (impact pour études immunohistochimie)

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6
Q

Vrai ou faux : La description des prélèvements peut être effectuée avant ou après l’étape de fixation

A

FAUX

L’étape de description s’effectue une fois que les spécimens sont fixés

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7
Q

Qui effectue l’étape de description des spécimens?

A

Variable selon le type de prélèvement :

  • Biopsie = équipe technique
  • Pièce chirurgicale = Patho ou assistant Patho
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8
Q

Quelles étapes aditionnelles doivent être effectuées lors de la description des pièces chirurgicales et qui n’est pas effectuée lors de la description des biopsie?

A
  • Examen macriscopique comprenant la mesure des lésions si présentes
  • Sélection des prélèvements qui seront envoyés pour l’examen histologique

**Protocoles standardisés

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9
Q

En quoi consiste l’étape de circulation?

A

“Remplir le spécimen de paraffine”

  • Remplacer l’eau des tissus par de la paraffine
  • Cycle de 12h pendant la nuit
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10
Q

Quelle est l’utilité de l’étape de circulation?

A

Essentielle pour solidifier le tissus et pouvoir couper le tissus en tranches minces (3-4 µm) pour préparer les lames d’histologie

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11
Q

Quelle étape suit l’étape de circulation (avant la coupe du tissus) ?

A

Inclusion/enrobage en paraffine

  • Tissus déposé dans un moule
  • Paraffine coulée dans le moule
    • Doit refroidir
  • Support pour couper l’échantillon
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12
Q

Quel instrument est utilisé pour effectuer des coupes très minces de tissus pour produire les lames d’histologie?

A

Un microtome

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13
Q

Comment les fines coupes de tissus sont-elles fixées sur les lames?

A

Fixation avec un bain d’eau

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14
Q

En quoi consiste l’étape de coloration?

A

Coloration de base de la lame et montage :

  • Coloration des tissus (automatisé, bacs)
  • Montage de la lame : ajout d’une lamelle sur tissus coloré
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15
Q

Combien de temps est requis pour préparer une lame d’histologie?

A

24h + le temps de fixation (variable selon la grosseur du tissus)

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16
Q

Quelles sont les étapes analytiques suite à l’obtention de la lame d’histologie?

A
  1. Interprétation au microscope par le pathologiste
    • +/- demande de techniques supplémentaires!
  2. Dictée du compte rendu
  3. Transcription du compte rendu
  4. Validation
  5. Envoi du compte-rendu
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17
Q

En combien de temps un résultat préliminaire est-il normalement disponible pour une biopsie? pour une chirurgie?

A
  • Biopsie : 24-48h
  • Chirurgie : 2-3 jours
  • *Possible d’avoir un résultat préliminaire au besoin*
  • Lorsque les prélèvements ne sont pas urgents, environ 7 jours pour avoir un résultat de biopsie*
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18
Q

Qu’est-ce qu’un examen extemporané?

A

Interprétation rapide (< 20 mins) d’un prélèvement frais dans un contexte chirurgical. Préparation de la lame d’histologie par congélation​

  • Pathologiste de garde
  • Examen macroscopique rapide
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19
Q

Quel est le but principal d’un examen extemporané?

A

Dans le but principal de modifier le geste chirurgical en cours. Diagnostic doit être émis en < 20 minutes

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20
Q

Quelles sont les indication d’un examen extemporané?

A
  1. Diagnostic histopathologique rapide
    • Type de tumeur?
    • Bénin/malin?
  2. Opinion macroscopique rapide
    • Taille de la tumeur
    • État des marges de résection chirurgicales (en enlever plus?)
      • Indication principale!
  3. Prélèvement particulier
    • Congélation à -80°C, microbiologie
    • Certains tests sont incompatibles avec le formol (perte de sensibilité) Ex : Bio mol
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21
Q

Quelles sont les limites d’un examen extemporané?

A
  • Technique grossière = réponse grossière
    • Interprétation grossière!
  • Ce qui est congelé est altéré
    • Possibilité d’artéfact
    • Morphologie cellulaire altérée
    • Moins beau que fixation
      • Plis, superposition de tissus/cellules
    • Congélation n’est pas la méthode préférée (slmt/surtout lorsque Dx rapide nécessaire)
22
Q

Quelles sont les étapes d’un examen extemporané?

A
  1. Prélèvement sur la pièce fraiche (résection chirurgicale)
  2. Congélation rapide (azote liquide)
  3. Coupe au cryostat
    • Température froide dans l’appareil
  4. Étalement sur la lame
  5. Coloration express
  6. Lecture au microscope
  7. Communication des résultats en < 20 minutes
23
Q

Quelle est la différence entre cytologie et histologie?

A

Cytologie : l’étude des cellules isolées

Histologie : l’étude morphologique des tissus biologiques

24
Q

Quels sont les avantages de la cytologie?

A
  • Prélèvement moins invasif, généralement facile à obtenir
  • Rapide (Pas de circulation, inclusion, coupe)
  • Recherche d’ADN HPV et autres agents infectieux
25
Q

Quels sont les inconvénients de la cytologie?

A
  • Diagnostic difficile et limité : Absence d’architecture tissulaire
    • Peut être moins précis (défi)
    • Codes Dx plus flous
  • Fixation à l’alcool rend les immunohistochimies difficiles
  • Nombre de tests limité
26
Q

Qu’est-ce que la cytologie?

A
  • Étalement sur lame à partir de spécimens liquides
  • Spécialité en soi
  • 1ere approche pour certaines choses (Ex : VPH)
27
Q

Quels sont les différents types de prélèvements pouvant être reçus pour un examen cytologique?

A
  • Type exfoliatif
    • gényco
    • épenchement pleural
  • Aspiration à l’aiguille fine
    • Nodule thyroïdiens
28
Q

Quelles sont les indications pour une cytologie?

A

Dépistage vs diagnostic

29
Q

Quel est le protocole associé à un prélèvement pour une étude cytologique?

A
  • Prélèvement reçu en tube
  • Centrifugation
  • Étalement sur lame et coloration
  • Coloration vue par un cytotechnologiste en première ligne
    • ID cellules et propose un Dx
  • Pathologiste revoit les lames
30
Q

Nommer différentes techniques complémentaires (à l’histologie/cytologie) en pathologie?

A
  • Colorations spéciales
  • Études immunohistochimiques
  • Étude en immunofluorescence
  • Hybridation in situ
31
Q

Nommer des indications pour demander une coloration spéciale

A
  • Agent infectieux
  • Amyloïdose
  • Envahissement vasculaire
  • Pigments
  • Mucine
  • …

Plusieurs indications!

32
Q

Quel est l’avantage de la coloration spéciale?

A
  • Peut permettre de mettre en évidence certaines composantes sans devoir faire une étude immunohistochimique
  • technique manuelle vs automatisée
33
Q

Quel est le principe des études immunohistochimiques et de l’immunofluorencence?

A
  • Mise en évidence d’un Ag tissulaire (protéine) par une réaction Ag-Ab
  • Ab dirigé contre un Ag que l’on recherche sur la lame histologique
  • Mise en évidence de la fixation Ab-Ag par
    • Un chromogène (immunohistochimie)
    • Un fluorochrome (immunofluorescence)
34
Q

Nommer un avantage et un inconvénient aux techniques complémentaires

A
  • Permet un meilleur Dx
  • Ajoute un délai de réponse et $$$
35
Q

Sur quel type de lame/prélèvement effectue-t-on une immunohistochimie normalement? Une immunofluorescence?

A

IHC : Coupe en paraffine

IF : Tissus congelé

36
Q

Vrai ou faux : Les immunofluorescences (IF) et les immunohistochimies (IHC) utilisent toujours un Ab primaire et un Ab secondaire

A

FAUX

Les IF et IHC peuvent être effectuées avec 1 seul Ab couplé à un fluorochrome

37
Q

Quels sont les 2 types d’Ab primaire pouvant être utilisés pour faire une immunohistochimie (IHC)? Quels sont les avantages et inconvénients pour chaque type

A
  • Polyclonaux
    • Généralement moins cher
    • Plusieurs épitopes reconnus = marquage + intense
  • Monoclonaux
    • Spécificité définie (1 épitope ciblé)
    • Moindre sensibilité en cas d’altération des épitopes
38
Q

Combien de temps est requis minimalement pour effectuer une immunohistochimie?

A

Au moins 24h (processus automatisé)

39
Q

Vrai ou faux : Les immunohistochimies sont rarement demandées par les pathologistes puisque c’est trop dispendieux

A

FAUX

C’est la base en pathologie. Ils se fient beaucoup sur ça pour leur diagnostics

40
Q

Quels sont les avantages/désavantages des immunohistochimies (IHC)?

A

Très utile, mais l’interprétation n’est pas toujours facile

  • Bruit de fond
  • Cas douteux
  • Sensibilité/spécificité variable
41
Q

Vrai ou faux : Pour chaque technique complémentaire en pathologie on doit avoir des contrôles positifs sur chaque lame

A

VRAI

42
Q

Quelle est la différence entre une immunofluorescence directe et indirecte?

A
  • Directe : Ab primaire marqué
  • Indirecte : Ab primaire reconnu par un Ab secondaire marqué
43
Q

Quelles sont les principales indications d’une étude immunohistochimique?

A
  • Diagnostic :
    • Diagnostic de malignité/bénignité
    • Tumeur indifférenciée
      • Ex : mélanome, carcinome, adénome
    • Tumeur d’origine inconnue (métastase)
    • Tumeur avec différenciation particulière
      • Ex : typage d’un lymphome (pour spécificité Tx)
    • Infection
      • Ex : CMV, Herpès, p16
  • Marqueurs pronostiques/réponse thérapeutique
44
Q

Quel est le principe de la technique d’hybridation in situ?

A

Identification de séquence d’ADN/ARN

  • Application sur lame de sondes d’ADN ou d’ARN monocaténaire marquées qui sont complémentaires de séquences d’ADN ou d’ARN que l’on recherche sur la coupe
  • Effectué sur coupe en paraffine
45
Q

Quels sont les 2 principes de détection du signal en hybridation in situ?

A
  • Fixation révélée par histoenzymologie (chromogène) ou par un fluorochrome (FISH : Fluorescent hybridation in situ)
    • Nom de la technique change selon la nature du marquage (système de détection)
46
Q

Donner un exemple d’utilisation de l’hybridation in situ

A

Identification du nombre de copie d’un gène pour déterminer s’il y a amplification du gène :

  • Sonde spécifique à un gène
  • Sonde spécifique au centromère
  • Ratio entre # de gène et # de centromère

Ex : HER-2/Neu

47
Q

Discuter de l’utilité clinique de l’investigation des marqueurs HER2/Neu (technique complémentaire)

A

Her2/Neu :

  • Amplifié dans 15% des carcinomes mammaires
  • Récepteur membranaire (localisé aux membranes en IHC)
  • Facteur pronostic
    • Tumeurs HER2 + sont associées à une survie plus courte, récidives précoces (faible pronostic)
  • Facteur prédictif fort pour Tx ciblé
    • HER2 + = réponse au Herceptin et aux anthracyclines
    • HER + = réponse faible à l’hormonothérapie
  • Résultats gradés (0, 1+, 2+, 3+)
    • Recommandations strictes
    • Algorithme à suivre pour les résultats douteux (2+)
48
Q

Discuter des limites d’interprétation du Her2

A

Faux négatifs

  • Faible sensibilité
  • Erreurs techniques (Ab non ajouté…)

Faux positifs :

  • Interprétation carcinome in situ au lieu de carcinome infiltrant
  • Interprétation réaction cytoplasmique comme positif
  • Edge Artifact
  • Technique trop sensible (CQ neg normalement négatif)
49
Q

Qu’est-ce que la pathologie numérique?

A

Acquisition, partage et interprétation des données pathologiques dans un environnement digital (sur l’ordi!)

  • Lames de verre sont scannées pour produire des images digitales de haute résolution
  • Lames digitalisées sont visualisées sur un écran (à distance!)
50
Q

Quels sont les bénéfices de la pathologie numérique?

A

Amélioration de la qualité des soins :

  • Diminution du délai de production des rapports de pathologie
    • Augmente productivité des pathologistes
    • Accessibilité simplifiée aux cas courants et aux cas archivés
  • Amélioration de la qualité des données inclues au rapport de pathologie :
    • Facilite les mesures, anotation
    • Plusieurs lames observées côte à côte
    • Outils d’analyse d’image
    • Ajout d’image aux rapports (macro et microscopique)
    • Possibilité de consulter des collèques inter-établissements
  • Disponibilité en continu des sous-spécialités
    • Diminution du temps associé aux envois
    • Palie aux indisponibilités (congrès/vacances..)
  • Maintient de la mission d’enseignement
    • Enseignement à distance
    • Standardisation de la pratique en CHU
    • Atout pour le recrutement
  • Partage d’image lors de réunions multidisciplinaires
  • Contexte de recherche
51
Q

Quelles sont les limites de la pathologie numérique?

A

Limite financière d’implantation

  • Équipements
  • Stockage des données

DEPD Sarah (30 decks)

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