Noyau - Enveloppe et pores nucléaires Flashcards
enveloppe nucléaire
2mb:
- mb externe en continuité avec REG, porte ribosomes
- mb interne tapisée par +ieurs prot qui forment la lamina nucléaire
- espace périnucléaire (btw mb):
occupé par domaines C-ter des prot intrinsèques de la mb de l’enveloppe
pores nucléaires qui traversent les 2 mb
reformation de l’enveloppe nucléaire in vitro
on incube une source d’ADN en présence de cytoplasme et de mb dérivées d’extraits d’oeufs de Xénope
ln des mb à la surface de l’ADN
fusion des mb: enveloppe nucléaire fermée
décondensation massive de l’ADN
dépolymérisation des lamines et désorganisation de l’enveloppe nucléaire
- noyau interphasique:
ADN sous forme d’un nucléofilament lié à l’enveloppe nu et aux lamines grâce à des prot transmb
au début de la mitose cyclineB/CdK1 phosphoryle lamines - métaphase
- dépolymérisation des lamines provoquée par leur P
- désorganisation et dispersion de l’EN en petites vésicules, prot de ln toujours sur EN
- lamine B reste ancrée à EN grâce à une ancre lipidique isoprénylée (d’autres lamines sont libres dans cytoplasme) - début télophase:
- dé-P des lamines provoquant leur polymérisation
- reformation de l’EN autour des chromosomes grâce à des séquences des lamines permettant la ln aux chr.
- décondensation progressive de la chromatine
nombre pore nucléaire cellules
nombre variable selon type cellulaire et act transcription (5-30% de la surface mb nucléaire/ 3000-4000 pores par noyau)
pore nucléaire = canal central
- au cours interphase les pores nu sont inclus dans la lamina nucléaire et dans enveloppe
- au niveau des pores nu, l’hétérochromatine accolée à la face interne de l’EN s’interompt → canaux chromatiniens
- forment perforations en bordure desquelles les 2 mb sont en continuité
constitution pore nucléaire
- complexe protéique formé par des nucléoporines (Nup): 30-50 sortes
- structures complexes avec 8 sous-unités
pore nucléaire = complexe protéique de 120 000kDa
2 anneaux dans l’EN d’au moins 64 s-u each
une glycoprot transmb permet ancrage du complexe poreux à la mb
- anneau cytosolique: avec 8 filaments cytoplasmiques (1/s-u) à la surface du pore: sites de fixation des prot et ARN franchissant l’EN
- anneau nucléoplasmique: dans noyau formé de 8 filaments radiaires perpendiculaires à la surface reliés à un anneau distale: structure de panier
anneau nu en contact direct avec lamina nucléaire - réseau central: s-u annulaires (côté pore) et luminales (dans espace périnucléaire/ intermb) joignent 2 anneaux
dimensions pore nucléaire
partie protéique ancrée dans la mb: 50nm de hauteur
hauteur entière comprenant la cage nucléaire: 150nm
diamètre côté cytoplasmique: 120nm
Nup 153
- prot importante du complexe du pore
- organise architecture des nucléoporines
- permet mobilité des nucléoporines
- facilite le transport: prot et ARN devant passer par le pore doivent se lier à Nup 153
- composées par ≠ domaines:
domaine amino-terminal stationnaire
domaine en doigt de zinc stationnaire
domaine C-ter flexible et mobile
selon l’activité du pore les domaines ne sont pas au même endroit: domaine C-ter peut être du côté cytoplasmique ou nucléaire
fonctions du pore nucléaire
- échanges de molécules nucléo-cytoplasmiques dans les deux sens
- architecture du noyau, ancrage à la chromatine
- partage des domaines chromatiniens actifs et inactifs en périphérie nucléaire
- répartition de la coupure d’ADN db
molécules sortant du noyau vers cytosol
ARNm
ARNr associé ou non à des prot
ARNt
facteurs de réplication et de transcription
molécules entrant dans le noyau
histones nucléotides ions prot (liées à l'ARN) facteurs de régulation et de transcription
import nucléaire NLS
la prot à importer doit présenter une séquence d’import nucléaire (NLS)
séquence notamment présente sur les facteurs de transcription, les histones et les polymérases
import nucléaire: transport hétérodimérique
importine α/β de la famille des karyophérines
- importine α fixe la prot au transporteur via un domaine de reconnaissance des NLS
- importine β se fixe à l’anneau cytoplasmique
import nucléaire: Ran
petite prot G à activité GTPasique pour transfert du complexe prot/imoportine