Apoptose

Question 1

caractéristiques

Answer 1

processus déclenchant mort cellulaire en réponse à un signal

• processus physiologique
• génétiquement programmé
• nécessaire à la survie des organismes pluricellulaires: permet de réguler l’homéostasie cellulaire
• mort discrète qui ne génère pas d’inflammation

Question 2

historique découverte

Answer 2

1842 par Carl Vogt
1ère apparition du terme apoptose: 1972 (Kerr)
prix Nobel de médecine en 2002 pour découverte des gènes de régulation de l’apoptose

Question 3

cellules produites en excès: lymphocytes

Answer 3

générés en excès dans le thymus: lymphocytes auto-réactifs (2 molécules en surfaces au lieu d’une) impliqués dans maladies auto-immunes

Question 4

cellules produites en excès: neurones

Answer 4

éliminés par apoptose si ils n’ont pas établi de synapse/ ont établi une synapse avec une cellule non partenaire

Question 5

cellules produites en excès lors de l’embryogénèse

Answer 5

séparation et individualisation des doigts du foetus lors de l’embryogenèse
syndactylies = défauts d’individualisation des doigts

Question 6

signaux déclencheurs de l’apoptose

Answer 6

• stimuli externes toxiques (virus, produits chimiques, radiations ionisantes)
• signaux extracell + physiologiques (Fas, TNF: molécules impliquées dans les réactions immunitaires)
• stimuli bc ADN endommagé (+ souvent lors voie intrinsèque induisent apoptose via p53)

Question 7

défaut d’apoptose

Answer 7

• K: lymphomes, carcinomes, tumeurs hormono-dépendantes
• maladie auto-immunes: lupus = défaut d’éliminaton des LT auto-réactifs
• infections virales pouvants déclencher des phénomènes cancéreux: HTLV, EBV

Question 8

excès apoptose

Answer 8

• SIDA: destruction massive des LT: patients immunodéprimés
• maladies neurodégénératives: Alzheimer, Parkinson (dérèglement autophagie too)
• phénomènes ischémiques: défaut de l’apport en O2 bc caillots + excès apoptose voire nécrose massive: infractus, AVC

Question 9

2 voies de déclenchement de l’apoptose

Answer 9

• extrinsèque: signaux externes, ligands se fixent sur récepteurs mb
• intrinsèque: signaux interne notamment dommage ADN: voie de la mitochondrie

les 2 voies peuvent interagir entre elles et convergent

Question 10

caspases

Answer 10

enzymes intracell impliquées dans les 2 voies
famille de 14 membres
cystéine dans leur SA
clivent ls prot après un résidu aspartate

Question 11

caspases inflammatoires

Answer 11

1,4,5,11,12,13,14

Question 12

caspases initiatrices

Answer 12

1,8,9,10
état inactif initialement
activées par dimérisation ou trimérisation
activation par clivage autoprotéolytique
caspases initiatrices activées (enzymes) ont pour substrat les caspases effectrices

Question 13

caspases effectrices

Answer 13

3,6,7
∑ sous forme inactive: pro-caspases effectrices
activation par une caspase initiatrice activée/ dimérisée
clivage au niveau du prodomaine et de la petite s-u
dimérisation = forme active

Question 14

voie extrinsèque

Answer 14

implication récepteur niveau MP: récepteur de mort famille TNF
dépendance caspases initiatrices 8 et executrices 3,6 et 7

Question 15

signal capté par récepteur de mort: ligands

Answer 15

TNF sur TNFR
FasL = CD95L sur Fas = CD95
TRAIL sur TRAILR

Question 16

structure récepteurs de mort

Answer 16

fixation du ligand sur récepteur → trimérisation récepteur:
1 partie extracell trimérique
1 partie transmb
1 partie intracell = death domain DD qui permet de transmettre signal et déclencher cascade de l’apoptose

Question 17

FADD

Fas associated death domain

Answer 17

prot intermédiaire adaptatrice recrutée par ln du ligand sur son récepteur de mort sur le DD du récepteur

2 domaines:

• 1 qui reconnait le domaine de mort
• 1 qui active les caspases: death effector domain DED

Question 18

CAD

Answer 18

prot: caspase activated DNAse
DNAse initialement bloquée par son inhibiteur ICAD
CAD libre passe dans le noyau et coupe l’ADN = apoptose de la cellules tumorale

Question 19

voie intrinsèque: voie mitochondriale

Answer 19

implique la mitochondrie et est sollicitée quand la cellules détecte un problème interne:
- dommage ADN irréversible
- stress oxydatif: augmentation radicaux libres
- stress RE
- activation oncogène
→ permettent perméabilisation mb interne de la mitochondrie et provoque ∑ prot pro -apoptotiques qui vont se fixer sur mitochondrie

dépendance caspases initiatrice 9 et exécutrices 3,6,7

Question 20

regulation voie intrinsèque par prot qui agissent sur mitochondrie

Answer 20

prot famille Bcl2

Question 21

prot pro-apoptotiques

Answer 21

Bad, Bax, Bak, BID (lien voies)

Question 22

prot anti-apoptotiques

Answer 22

BcL2, BcL-xl

Question 23

rôle cytochrome C

Answer 23

• production ROS: espèces activés de l’oxygène: radicaux libres qui endommagent prot, lipides, ADN
• liaison au RE: crée un stress du RE et permet accroissement calcium relâché par RE
• intervention cascade des caspases en se liant avec prot Apaf-1

Question 24

aboutissement des deux voies

Answer 24

altération membranaire
interruption du cytosquelette
réorganisation et réduction des organites

Question 25

étapes apoptose

Answer 25

• chromatine s’agrège sous l’enveloppe nucléaire et forme des masses denses
• noyau se fragmente
• bourgeonnement de la cellule en corps apoptotiques

Question 26

bourgeonnement de la cellule en corps apoptotiques

Answer 26

caspase 3 active une kinase qui provoque dissociation de la myosine du cytosquelette:

• déformation de la MP = nucléation
• rupture actine sous MP et fuite cytplasme
• expansion MP qui se dilate
• recrutement prot cytosquelette dans expansion bourgeonnante
• détachement de l’expansion = corps apoptotiques puis rétraction mb

Question 27

phagocytose cellule

Answer 27

corps/ cellules apoptotiques doivent ê reconnus par les phagocytes grâce à des signaux: trouve moi, mangie moi, digère moi

Question 28

signal trouve moi

Answer 28

cellule apoptotique libère LPC, S1P pour attirer phagocyte → gradient attraction

signal trouve moi provoque augmentation du nombre de récepteurs des signaux trouve moi et mange moi à la surface des phagocytes
développement de la machinerie d’engloutissement

Question 29

signal mange moi

Answer 29

présent à la surface des cell apoptotiques

lié à l’externalisation des phosphatidylsérines sous la dépendance des caspases (modif lipides MP)

Question 30

contact btw cell apoptotique et phagocyte

Answer 30

reconnaissance entre cell apoptotique et phagocyte = synapse d'engloutissement 
// synapse immunologique: btw cell dendritique présentatrice d'Ag et un lymphocyte T

signal primaire intervient:
pour synapse immuno: entre CMH et TCR
pour synapse engloutissement: entre phosphatidylsérines et leurs récepteurs

signaux secondaires via des corécepteurs et amplifient adhésion entre les cellules

Question 31

détection apoptose: cytométrie en flux marquages

Answer 31

cellules en apoptose → molécules de phosphatidylsérine externalisées sont marquées par l’annexine V couplé à une molécule FITC fluo (vert)
cellules mortes en nécrose → iodure de propidium

cellules mortes → annexine + et iodure de propidium +
cellules en apoptose → annexine +
cellules vivantes → annexine - iodure de propidium -

Question 32

détection apoptose méthode TUNEL

Answer 32

• enzyme TdT associé à la molécule BrdUTP marqué par Ac-BrdUTP couplé à des molécule fluo type FITC
• fixation molécules au extremités 3’OH des brins rompus → marquage cellules apoptotiques

Question 33

détection apoptose: recherche auteur spé

Answer 33

recherche prot spé de l’apoptose ex: caspase 3
perméabilisation cellule pour permettre entrée Ac
marquage caspase 3 par Ac anti-caspase 3 + fluo