Fundamentos ImunoHematologia

Question 1

O que é Imunidade natual?

Answer 1

• Limitada capacidade de distinguir um agente invasor de outro e agindo do mesmo modo contra a maioria dos agentes infecciosos
  (Fagocitose monocitos, macrofagos e neutrofilos, PTN plasmaticas, complemento)

Não depende do antigeno, é imediata e não específica, não surge células de memória

Question 2

Imunidade adquirida?

Answer 2

• Ação é específica e gera células de memoria
• Sistema imune é estimulado por antígenos não self

Question 3

Quais as principais propiedades dos antígenos?

Answer 3

• Imunogenicidade: Capacidade de estimular produção de Ac
• Antigenicidade: Capacidade de interagir especificamente com o produto da resposta imune (humoral ou celular)

Question 4

Haptenos funcionam como imunógenos?

Answer 4

EM geral não, pois são moleculas pequenas <10kDaltons e em geral tem antigenicidade porém são incapazes de produzir Ac

Question 5

Quais substancias são mais imunogenas?

Answer 5

A maioria é de origem proteica (Glico ou lipoproteica) e Polissacarideos

Obs: Acidos nucleicos e lipideos são pouco imunogénos

Obs: Em geral os imunogenos são moleculas grandes (>10.000 daltons) que estimulam o sistema imune

Question 6

QUais as principais ações dos Ac?

Answer 6

• Neutralização
• Opsonização
• Ativação de complemento
• Ac de membrana da Cel B
• Citotoxicidade mediada por AC (ADCC)

Question 7

Quais os Ac importantes na IMunohemato?

Answer 7

• IgM: pentamerica, não atravessa barreira placentaria, são frios, produzidos nas respostas primarias e é a Ig da superficie da Cel B
• IgG: Monomerica, atravessa a barreira placentária (ligação receptores Fc), Podem ativar complemento (IgG1 e 3), produzidos em resposta secundária

Question 8

O que são HeteroAc?

Answer 8

Produzis contra Ag de diferente especie (Produção de Coombs)

Question 9

QUais os tipos de Ac de acordo com o estímulo?

Answer 9

• Imunes: ocorrem após ativação do sistema imune por algo não proprio (Ex: transfusão ou gestação)
• Naturais: Formação sem contato previo com Ag (Ex: Sistema ABO)
• Regulares: ocorrência é esperada
• Irregulares: Ocorrencia não é esperada (Aloimunização após transfusão)

Question 10

Como são formado os Ac naturais?

Answer 10

Acredita-se que tenha bacterias que colonizam o TGI a partir do nascimento que possuem açucares similares ao sistema A e B e por isso estimulam formação dos Ac

Pode ocorrer por meio da alimentação, poeira…

Question 11

O que são Ac completos? e QUal Ac é completo?

Answer 11

• Promovem a aglutinação em meio salino (Ex: IgM)

Question 12

Ac incompleto?

Answer 12

Reagem com Ag porém não aglutinam as Hc, precisam de um meio artificial que promova a aglutinação para visualização da reação Ag-Ac (Ex: IgG)

Question 13

Os Ac naturais tendem a ser de qual classe?

Answer 13

IgM (são naturais e completos)

Question 14

Cite exemplos de consequências das respostas de cel T e B?

Answer 14

Cel T-> Regeição a transplantes

Cel B-> Ac e reações transfusionais

Question 15

QUais as diferenças entre resposta primaria e secundária em relação a cinetica dos Ac?

Answer 15

Primaria: IgM, baixos niveis de Ac, demora em geral 3-4sem, primeiro contato com Ag

Secundaria: IgG, mais rapida,1-2 dias, grande quantidade de Ac e maior avidez pelo Ag e produzidos por doses muito menores que as da primaria
(Feita por celulas de memoria)

Question 16

Quais são os Ag mais imunogênicos da nossa espécie?

Answer 16

• HLA
• Grupos sanguíneos (Rh, Kell, Duffy e Kidd)

Question 17

O que determina a produção de um Ac contra Ag eritrocitarios?

Answer 17

• Imunogenicidade dos Ag
• Frequencia de individuos Ag negativos
• Indivíduos na população que são suscetíveis (Ex: Pessoa que não tem um Ag, muito imunogenico e muito comum na população)

Question 18

Quais as duas etapas para reconhecimento in vitro da interação AG-AC?

Answer 18

• Reação Ag-Ac (sensibilização)
• Hemaglutinação (Visualização)

Obs: é possível incrementar a formação e visualização dos aglutinatos

Question 19

Quais as forças responsaveis pela ligação Ag Ac?

Answer 19

São ligações não covalentes fracas individualmente que juntas podem ter força de coesão

• Força eletrostatica
• Pontes de Hidrogênio
• Ligações hidrofóbicas (Responsavel por 50% da força total, igual oleo na agua)
• Forças de Van der Walls

Question 20

A ligação Ag Ac é reversivel?

Answer 20

Sim…
Técnica da Eluição

Question 21

O que podemos usar para reverter a ligação Ag Ac?

Answer 21

• CAlor
• pH
• Solventes organicos (eter, cloroformio)

Question 22

A reação Ag Ac é Endotermica ou Exotérmica?

Answer 22

Exotermica, libera calor…
Portanto tem entalpia negativa

Question 23

Pq é importante entender que a reação é exotérmica e a entalpia é negativa?

Answer 23

Pois temos Ac frios e quentes

Ex: IgM fixa melhor a 4 graus, tem entalpia muito negativa

Ex: IgG é quente entalpia varia menos e libera menos calor e a afinidade do ac por ag é baixa em qualquer temperatura.. melhor detectado a 37 (Ex: Rh, Kell, Kidd..)

Question 24

Explique os tipos de aglutinação (Especificos e não especificos)?

Answer 24

• Especifico: Hc em sol fisiologica possuem estabilidade e com intrudução de Ac contra Ag da membrana acabam neutralizando cargas eletricas e provocando aglutinação das Hemácias
• Não específica ou pan-algutinação: aglutinação de Hc normais sem Ac específicos ligados aos antígenos por interferência de substâncias presentes no meio como macromoleculas (polibreno, ficol, dextram), ions metalicos (silica cloidal), outros…

(Ex: em geral ocorre aglutinação em tubos mal lavados, impregnados por detergentes)

Question 25

Por que as Hemacias aglutinam qnd um Ac liga nelas?

Answer 25

As hemacias se repelem devido a carga negativa na sua membrana (potencial Zeta). Qnd o Ac liga aos Ag acaba neutralizando esse potencial favorecendo a aglutinação

O potencial ZEta leva em consideração a distância média que separa as hemácias em suspensão; Essa distancia pode ser diminuida pela adição de anticorpos ou substâncias ao meio para facilitar a aglutinação

Question 26

Quem são os grandes responsáveis pela eletronegatividade na Membrana das Hc?

Answer 26

Grupos carboxílicos (COOh-) das sialoglicoproteínas

Question 27

O que é o potencial zeta?

Answer 27

A carga negativa das Hc atrai eletrolitos em geral cations que forma um potencial chamado de zeta

A força de repulsão das hemacias depende do potencial zeta

Question 28

O que é potencial zeta crítico (PZC)??

Answer 28

É o menor valor do potencial para ocorrer aglutinação

QNt menor o potencial zeta maior a aglutinabilidade

Question 29

Como alterar o potencial zeta?

Answer 29

1)Redução de carga eletrica das Hc:
- Fixação Ac
- Tratamento Enzimático (Bromelina, papaína, ficina e tripsina) -> removem fragmentos de proteínas da membrana

2) Variação da composição do meio
- Adição de substâncias macromoleculas como albumina bovina, PEG, polibreno que alteram a constante dieletrica do meio (D)

• Modificação da força ionica utilizando por ex o LISS (Sol de baixa força ionica)

Question 30

Qual a formula do potencial Zeta?

Answer 30

Foto

Question 31

O que as enzímas podem fazer com os antígenos da membrana de Hc?

Answer 31

Expor (ABO, Rh, P, I, Lewis)
ou
Destruir (MNS, Duffy e Xga

Question 32

O que mais pode influenciar a aglutinabilidade alem do potencial zeta?

Answer 32

1) pH (ex: ligação otima de Ac em 6,5 a 7,5)
2) Temperatura
3) Concentração dos Ac (Efeito prozona ou sensibilização insuficiente)
4) Localização

Question 33

O que é o efeito prozona?

Answer 33

Quando a quantidade de Ac é tão grande em relação aos Ag que não é observado reação

Question 34

Explique melhor como a localizção dos Ag influencia na Aglutinação?

Answer 34

• Alguns Ag podem expressar fracamente na membrana (Ex: D fraco, subgrupos ABO)
• Alguns podem ser homozigotos e ter muitos ag e outros podem ser hererozigotos e ter menor qnt
• O Ag pode ter pouco acesso na membrana

Nesses casos a reação pode ser mais fraca ou mesmo negativas