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ImunoHemato > DH - ABO > Flashcards

DH - ABO Flashcards

1
Q

Testagem ABO direta?

A

Usa soro ANti-A e ANti-B
(Detecta antígenos ABO na membrana da Hc)

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Q

PRova reversa na tipagem ABO?

A

Detecta anticorpos no soro do paciente

Usa Hemacias de laboratorio A1 e B

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3
Q

Pq temos esses Ac (Anti A e Anti B) Naturais?

A

Acredita-se que bacterias, polen, pueira e substancias que são quimicamente similares aos antígenos A e B estimulam a formação desses Ac

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4
Q

QUando na vida do Baby é detectado o Ac?

A

3-6 meses

OU seja eles nascem sem Ac

Obs: Caso detectado algum Ac antes dos 3 meses pode ser um IgG da mãe que passou pela placenta

Normalmente é realizado apenas tipagem DIRETA

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5
Q

Qual as caracteristicas do Ac anti A e B?

A

IgM
Ativam complemento
Reagem na temperatura ambiente
Aglutinação forte

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6
Q

Qual outra faixa etaria que possui menos Ac e pode inclusive ser causa de discrepancia na tipagem ABO?

A

Idosos

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7
Q

Temos algum Ac ABO que é predominantemente IgG? E por que isso é importante?

A

Sim, Indivíduos O podem produzir anticorpo Anti-A,B
que é predominantemente IgG e pode atravessar a placenta

Obs: Individuos A e B tambem podem produzir Ac IgG mas no geral o que predomina é o IgM

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8
Q

Saber a quantidade de IgG no soro materno de anti-A, Atni-B ou Anti-A,B pode ajudar a predizer ou diagnosticar HDFN?

A

Parece que sim..

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9
Q

Devemos usar de rotina o reagente anti-A,B?

A

No geral não, mas pode facilitar o grupo O

Obs: Acredita-se que o Anti-AB detecta melhor expressão fraca de A e B
(Hoje em dia isso nao importa pq usamos soro monoclonal)

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10
Q

Como é a heranca dos genes ABO?

A

Herdar o gene ABO de cada um dos pais e eles são expressos de maneira codominante

No Cr 9 vai ter então um A,B ou O

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11
Q

Para o individuo ser O como deve ter sido a herança?

A

Autossômica recessiva de dois genes O
(Não funcionantes- não produzem antígeno)

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12
Q

Como é o fenótipo e genótipo de O?

A

Obrigatóriamente iguais
Fenótipo O

Genótipo OO

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13
Q

Como é o fenótipo e genótipo de A?

A

Fenótipo A
Genotipo AA ou AO

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14
Q

Como é o fenótipo e genótipo de B?

A

Fenótipo B
Genótipo BB ou BO

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15
Q

O que depende a gormação dos AAntígenos ABO (Genotipicamente)?

A

3 loci separados
ABO
Hh
Se

Produzem glicosiltransferases que adicionam açucar em uma substância precursora

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16
Q

Como chama essa substÂncia precursosa basal que todos os Antígenos originam?

A

Paraglobosideo
ou
Glicano

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17
Q

QUais os tipos de substÂncia precursora que temos?

A

Tipo 2-> N-Acetilglucosamina liga beta 1->4

Tipo 1: Ligação entre galactose e N-acetilglucosamina Beta1->3

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18
Q

Qual tipo de substÂncia precursora é usado para os ABH das Hemacias?

A

Tipo 2

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19
Q

Qual a estrutura precursora para formação dos Antígenos A e B?

A

Antígeno H

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20
Q

Onde esta localizado o Gene no Ag H? E qual outro gene ele se relaciona?

A

Gene chama FUT1 (H) esta no cromossomo 19

Se relaciona com o gene FUT2 (Se) que está no mesmo Cr

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21
Q

Gene H e Se faz parte do sistema ABO?

A

Não, mas são importantes para a formação do ABO

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22
Q

O gente H é necessario para…

A

formar antígenos ABO

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23
Q

O gene Se é necessário para…

A

FOrmar Ag ABO nas secreções

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24
Q

Pq as reações direta no RN podem ser mais fracas que nos adultos?

A

Pois eles tem cerca de 25-50% dos sitios antigenicos comparado com adultos

(Atingem o nivel adulto com 2-4 anos)

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25
Q

O que são carboidratos imunodominantes?

A

São os carboidratos que quando adicionados a substância precursora conferem especificidade a grupo sanguíneo

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26
Q

Como é a relação da herança genética do grupo O e relação com gene H?

A

Gene o-: OO
H: Hh ou HH

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27
Q

QUal o carboidrato imunodominante do gene H?

A

L-Fucose (Responsável pelo grupo O)

Produção da fucosiltransferase pelo gene FUT1 (H) liga na susbtância precursora tipo 2 a fucose na galactose terminal

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28
Q

QUal grupo sanguíneo tem a maior concentração de substância H?

A

Grupo O (Pq não adiciona nenhum carboidrato a substancia H)

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29
Q

QUal a frequencia do gene H na população?

A

99,99% dos casos tem pelo menos um gene H

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30
Q

Pq isso é importante?

A

É extremamnte raro o genótipo hh

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31
Q

Como é chamado o fenótipo que não expressa antígenos ABH devido herança do gene hh?

A

Bombay

hh-> não produz a fucosiltransferase

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32
Q

Indivíduos Bombay podem herdar genes ABO?

A

Sim, porém não são expressos

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33
Q

Qual o carboidrato imunodominante do grupo A?

A

N-acetil-galactosamina

Gene AA ou AO produz a n-galactosamiltransferase que aciona o carboidrato na substância H

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34
Q

Entre os genes A e B qual produz mais atividade enzimatica? E pq isso é relevante?

A

O gente A produz mais enzima e logo quase todos os sitios de antigenos H são transformados em Ag A…

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35
Q

Qual transferease é pruduzina no grupo B e qual é o açucar imunodominante?

A

D-galactosiltransferase

D-galactose

Obs: temos menos sitios de Ag B na HC quando comparado com Ag A

36
Q

QUal antígeno tem mais na Hc que é AB?

A

Tem mais B, pois a enzima B converte mais H em B do que a enzima A

37
Q

Molecularmente quantos exons temos no gene ABO e quais os mais importantes?

A

7 exons

sendo so pricipais o exon 6, 7, pois são responsáveis pelo dominio catalitico da enzima

Polimorfismos nessa região acaba por resultar em variantes do ABO que podem ser responsáveis por enzimas pouco eficientes e consequentes reações fracas sorologicas

38
Q

Quais as 7 mais comuns variantes do ABO?

A

A1
A1 variante (A1v)
A2
B1
O1
O1 variante
O2

39
Q

O que são Antigenos ABH solúveis? e O que dependem?

A

São esses Ag encontrados na secreção

Dependem da herança dos genes ABO + gene secretores (SeSe ou Sese)

40
Q

O que faz o gene FUT2 (Se) diferente do gene FUT1 (H)?

A

FUT2 produz uma fucosiltransferase que modifica a substânca precursora TIPO 1 de secreções (APENAS) para formar a substância H

O gene Se não influencia formação de Ag ABH nas HEmácias apenas em SECREÇÕES

Se a pessoa é sese ela é não secretora

41
Q

QUal a definição de subgrupos ABO?

A

São fenótipos que apresentam reação sorologica fraca quando analisados com anti-a, anti-b e anti-a,b em geral POLICLONAL

ISso é importante, pois hoje em dia a maioria dos soros é monoclonal e não temos esse problema…
(O soro mono tem maior sensibilidade)

42
Q

Quais os principais Subgrupos A?

A

A1: Reage fortemente com soro anti-A e Anti-A1 (80%)

A2: Reage fortemente com soro Anti-A, mas não com soro Anti-A1 (20%)

foto

43
Q

A2 é um subgrupo fraco?

A

Sim, pois produz menor quantidade de antígenos que o A1

A2 surge de uma mutação de substituição de base no nucleotideo 467 e uma deleção no nucleotideo 1060 -> aleteram a atividade da enzima

44
Q

Além de alteração quantitativa existe alterações qualitativas em individuos A2?

A

Sim

A2 pode produzir 1-8% dos casos anti-A1

A2B em 22-35% anti-A1

Isso pode ser responsável por discrepâncias na direta e reversa

Obs: o Anti-A1 é de ocorrencia natural IgM que reage a frio (abaixo de 37)

45
Q

Existe antígeno A2?

A

Não. Existe apénas Ag A e A1

46
Q

Como determinar o fenótipo A1 e A2?

A

Pode usar o soro Anti-A1 lecitina

47
Q

Em relação a Fenótipos A fracos como A2 como é a relação com o Antígeno H e por que isso é importante?

A

QUanto mais funcionante é a glicosiltransferase de A menor a quantidade de Ag H na hemácia…
Consequentemente alguns indivíduos que são A1 ou A1B convertem tanta substÂncia H em A1 que quase não tem Ag H na hemácia e pode ocorrer inclusive formação de ANTI-H

48
Q

Característica desse Anti-H?

A

IgM reage a frio
Formação natural

Reage com Hc O e em menor quantidade com Hc A1B

Insignificante para transfusão

49
Q

Qual um possível problema com ANti-H caso em altos titulos?

A

Podem reagir a temperatura ambiente e atrapalhar na prova reversa pois as Hc teste são O
E também na triagem (PAI) pois as Hc são O do teste

Ex: Direta ele é A, mas na reversa fica como O

50
Q

Explicação mais nova do surgimento do Anti-A1 em individuos A2?

A

Basicamente lembre que a enzima A2 não consegue converter a substância H3 e H4 que são mais complexas nos antígenos Ac e Ad (Logo a falta desses antígenos pode ser responsável por ter o Anti-A1)
E por esse motivo que indivíduos A2B tem mt mais Anti-a1 que indivíduos A2. Pois a enzima B compete com a A2 e consegue converter mt mais H em B, logo esses indivíduos tem muuuito menos ag Ac e Ad que indivíduyos A2

The discussion thus far has presented a basic overview of the two major ABO subgroups, A, and Az. A more plausi-ble, yet more detailed, theory of ABO subgroups has been proposed by the identification of four different forms of H antigens, two of which are unbranched straight chains (Hy, H2) and two of which are complex branched chains (Нз, H4; Fig. 6-12).24 The antigens H, through H4 correspond to the precursor structures on which the A enzyme can act to convert H antigen to blood group A active glycolipids. Although the chains differ in length and complexity of branching, the terminal sugars giving rise to their antigenic specificity are identical. Studies on the chemical and physical characteristics of the A, and Az enzyme transferases have demonstrated that these two enzymes are different qualitatively. 17,25 Straight chain H, and H2 glycolipids can be converted to A* and Ab antigens, re-spectively, by both A, and A, enzymes, with the A, enzyme being less efficient. The more complex branched H3 and Hy structures can be converted to A and Ad antigens by A, enzyme and only very poorly by A, enzyme. 2+ As a re-sult, more unconverted H antigens (specifically Hy and H,) are available on group A, RBCs, and only Aª and Ab determinants are formed from H, and H, structures.

On the RBCs of some A, individuals, As is extremely low and Ad is completely lacking (Box 6-5). These are the individuals in whom one would likely find anti-A, in the serum. This anti-A, antibody could really be an antibody to As and A determinants, which the A, individuals lack.
Furthermore, anti-A, can be lound in the serum in 22% to 35% of A,B individuals. Since the B enzyme transferase is usually more efficient than the A enzyme in converting H structures to the appropriate antigen, A, enzymes would probably fail completely when paired with a B enzyme. As a result, AB individuals would be far more likely to lack A and A components with subsequent production of anti-Ac and anti-Ad (anti-A,).
As stated previously, most group A infants appear to be Az at birth, with subsequent development to A, a few months later. Newborns have a deficiency of the branched H3 and H, antigens and therefore the A° and A antigens as well, possibly accounting for the Az phenotype. Adult cells contain a higher concentration of branched H, and H, structures and therefore A and A determinants of the A antigen in A, individuals.

51
Q

Qual a porcentagem de outros subgrupos fracos A?

A

<1% (pouco importante para pratica)

52
Q

Cite um exemplo que poderia ser um problema prático?

A

Indivíduo Ax (subgrupo fraco) não é detectado como A na prova direta por soro POLICLONAL e acaba doando sangue para um individuo O

Viso O ter ANti-A,B que reage mais fortemente com Ax (fraco) pode ocorrer hemolise

Obs: Lembre que os subgrupos foram determinados quando usava soro policlonal, Hoje com o soro monoclonal a maioria dos subgrupos A são detectados

53
Q

O que pode ser feito para detectar subgrupos fracos A?

A
  • Testagem direta (USar Anti-A,B)
  • Prova reversa
  • Adsorção e eluição com ANti-A
  • Testar Saliva para A e H

outros
- Genotipagem
- Detecção da enzima no plasma

Isso serve para os subgrupos fracos de B tb

54
Q

Como é o fenótipo Bombay?

A

Mutação no gente FuT1 (H) produz um gene silencioso incapaz de codificar a enzima fucosiltransferase

Logo o indivíduo que herda (Autossomica ressesiva) o hh não produz substancia H

Logo não produz nenhum antígeno ABO (Nem A, Nem B, Nem H)

55
Q

Mas se o fenótipo Bombay pode herdar o gene ABO Por que em geral é comum econtrar Anti-A, Anti-B e Anti-H no soro desse indivíduos?

A

Pois geralmente esses individuos tambem tem uma mutação silenciadora no gente FUT2 (Se). Logo, esses paciente em geral são não secretores… Logo não tem Ag A, B nem H nem nas secreções, o que torna mais facil a produção dos respectivos Anticorpos

56
Q

Como definir qual ABO que o Bombay é?

A

PEsquisa molecular
Oha, Ohb, Ohab (em geral colocar superscrito)

57
Q

Como é o fenótipo Bombay na testagem ABO?

A

Direta-> tipar como O (não reage com Anti-A nem ANti-B)
Reversa-> Reage com Hc A1 e B

58
Q

O que pode ser usado na tipagem direta para diferenciar Bombay do Fenótipo O?

A

Anti-H lecitina

Reage formente com Hc O e não reage no Bombay

59
Q

O Anti-H do bombay é igual o Anti-H de alguns indivíduos A1 ou A1B?

A

Definitivamente não…
Anti-H do Bombay no geral é um IgM que reage a temperatura ambiente e pode causar Hemolise grave e imediata caso transfusão com hemácias O

Apenas sangue de outro bombay é compativel

60
Q

O que é o fenótipo Para-Bombay?

A
  • Mutação no FUT1 (H) +- FUT2 (Se): Produz pequena quantidade de Ag ABH que Não é detectado serologicamente, apenas com Adsorção e eluição
    Não há AgABH na saliva
    Pode ter Anti-H

ou

  • FUT1 silenciado com FUT2 ativo: Não produz Ag ABH na Hemácia, mas produz na secreção e no plasma
    Esses Ag do plasma podem adsorver na membrana da Hc
61
Q

Quais doenças podem causar redução de Ag ABH nas hemácias?

A
  • Leucemia
  • Translocação com Cr 9
  • Doenças Hemolíticas (Stress hematopoietico - Talassemia)
  • Hodgkin
62
Q

Quais doenças podem causar redução das aglutininas ABO no plasma?

A
  • Hipogamaglobulinemia (Ex: LLC, Linfomas, MM?)
63
Q

Qual doenças podem justificar um Ag B adquirido?

A
  • Obstrução intestinal
  • CArcinoma do colol reto
  • Outras doenças intestinais

Aumentam a permeabilidade intestinal e pode ocorrer translocação da bacteria E. coli O86 que pode adsorver Hc A1 e culminar com tipagem direta como B

63
Q

Quais doenças podem causar ausencia de Ag ABO na prova direta?

A

Pancreatite/ Carcinoma do estomago e pancreas

Pcts tem Ag normais, porém tem quantidades elevadas de substancias soluveis no plasma que neutralizam o soro anti-A e anti-B utilizados

64
Q

Em casos de discrepâncias podemos liberar a transfusão?

A

Não. Sempre resolver a discrepância antes de liberar

65
Q

O que pode ajudar a resolver discrepancias ABO?

A

Testar secreção ou estudo molecular

66
Q

Quais a primeira coisa suspeitar quando discrepancias ABO?

A
  • Erros tecnicos
67
Q

Manejo da discrepancia ABO?

A
68
Q

Quias os tipos de discrepâncias?

A

Grupo I: Reação reversa inesperada (Problema no plasma)

Grupo II:

Grupo III:

Grupo IV:

69
Q

Causas para Discrepâncias ABO grupo I?
Falha em produção de Ac ou reduçaõ

A
  • RN
  • Idosos
  • Leucemia ou linfoma com hipogama
  • Usando imunossupressores
  • Imunodeficiencieas no geral que casuam hipogama
  • TMO
  • Diluição dos Ac no plasma por transfusão de plasma ou PEx
  • Subgrupos ABO fracos
70
Q

Explique por que um quimerismo pode justificar uma discrepância ABO grupo I?

A

Quimerismo = Duas populações de celulas no mesmo indivíduo

Ex clássico é de gemeos onde ocorre anastomose vascular no utero e por isso as Hemacias de um são reconhecidas como Self no outro (Ex: Um geremo A e outro O) e portanto eles não pruduzem anti-A nem Anti-B
(Perguntar isso aqui)

Outras causa para isso: Dispermia (Dois espermatozoides fecundaram um ovulo)

Quimeras artificiais:
- Transfusão de Hc (Ex Hc O para pct A ou B)
- TMO com incompatibilidade ABO
Outros

71
Q

Pq é possível o Transplante de Medula com incompatibilidade ABO?

A

Pq as células progenitoras Hematopoieticas (Célula tronco) não tem antígenos ABO

72
Q

O que é incompatibilidade ABO maior no TMO?

A

Receptor tem Ac contra o doador
(Ex: PCt O doador A ou B)

Pode causar Hemolise e Falha de enxertia

73
Q

INcompatibilidade ABO menor?

A

Doador tem Ac contra o paciente
(Ex: Doador O e paciente A ou B)

Pode causar Hemolise e Sd do linfócito passageiro

74
Q

Bidirecional?

A

Maior e menor junto

(Doador A e receptor B ou vice e versa)

75
Q

QUal a ideia da incompatibilidade em relação a discrepancia ABO e transfusão?

A

Ag ABO estão presentes em outros orgãos como endotelio, pulmao, pancreas, intestino, coração… etc

Logo, mesmo que um individuo seja A e receba um TMO e “vire” B ele nunca vai produzir Anti-A, pois ainda tem Ag A em varios locais do corpo

Logo na tipagem direta ele tipa B porém na reversa tipa AB (Discrepancia grupo I)

76
Q

Discrepancias do grupo II? Causas?

A

Reação inexperada na prova direta (Problema da Hc)

  • Subgrupos A ou B
  • Leucemias e Hodgkin (Ag A e B fracos)
  • Fenótipo B adquirido em geral reage com anti-B fracamente
77
Q

Como resolver discrepância ABO grupo II?

A
  • Incubar Hc por 30 min a temperatura ambiente
    e se negativo

incubar a 4 gaus por 30 min

Smp realizar controle com Hc O e cellas Autologas (Auto controle)

È possível tratar com enzima Hc e retestar

Obs: A ideia é aumentar a reatividade e avidez do Ac com os Ag da Hc

78
Q

Causa rara de discrepancia grupo II?

A

Substarncia no plasma que neutraliza o Anti-A e Anti-B

O que fazer então?
Lavar as Hemácias

79
Q

Discrepâncias do grupo III? E causas?

A

Em geral causados por anormalidades plasmáticas formação de rouleaux ou pseudoaglutinação
(Devido a aglutinação espontanea pode dar falso positivo na reversa)

  • MM, WM , linfomas, outras discresias plasmocitarias
  • Elevação de fibrinogenio
  • ## Geleia de Whartons (cordão do bebe)
80
Q

Como resolver Grupo III?

A

Lavar Hc com salina (substui plasma por salina) pode resolver o Rouleaux

No caso de Whartons jelly lavar 6-8 vezes para evitar Rouleaux

81
Q

Discrepância grupo IV? e CAusas?

A

Mistura
- Ac a frio (Aglutinação espontânea)
- Mais de uma Hc circulando (TMO ou trnafusao)
- Aglutininas ABO ou Aloac não ABO inesperados

82
Q

Como resolver Grupo IV?

A
  • Cold aglutininas: Encubar a 37 graus após lavar 4 vezes a 37 graus e se não resolver pode usar o DTT para separar o IgM (Isso para a Direta)
  • Aquecer o plasma com as Hc da reversa 37 graus ou realizar autoadsorção a frio
83
Q

O que é o CIS AB?

A

Herança de ambos os genes AB de um progenitor em um cromossomo e outro gene O no outro comossomo do outro progenitor
Isso gera a herança dos 3 genes ABO
Ex: PAi O, Mãe AB ->Filho AB

84
Q

Individuos Cis AB podem ter discrepâncias? QUais?

A

Em geral expresam fracamente Ag A e Ag B (A e B fracos)
e podem inclusive produzir um Anti-B que pode levar a discrepância na reversa

85
Q

Fotos das discrepâncias

A

ImunoHemato (24 decks)

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