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imunohemato > DH- Identificacao De Anticorpos > Flashcards

DH- Identificacao De Anticorpos Flashcards

1
Q

QUais as possibilidades para surgimento de Ac inesperados?

A
  • AloAc imunes
  • AloAc naturais
  • Ac passivos (ex IVIG)
  • AutoAc
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Q

QUem devemos pesquisar Ocorrencia de Ac?

A
  • Pacientes que vao receber Hemacias
  • Doadores de Hemacias, sangue total ou componentes granulociticos
  • Se possivel realizar em gestantes para avaliar risco de HDFN
  • DOadores de Mo para TMO e Receptores
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3
Q

como e feito o teste em tubo para deteccao de Ac?

A
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4
Q

O que e obrigatorio testar ao usar teste em tubo em que a amostra e negativa??

A

Controle de coombs (Validar o resultado negativo) - ele tem que ser positivo para mostrar que a reacao esta funcionando

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5
Q

Quando e possivel avaliar hemolise no teste tubo?

A

QUando a amostra do soro e fresca e o reagente utilizado nao contem EDTA (para ter hemolise precisa de ativacao de complemento)

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6
Q

No geral como sao selecionadas Hemacias para triagem?

A

Hemacias O para evitar reacao com Anti-A ou anti-B

No geral sao duas hemacias R1R1 e R2R2 ou tres hemacias R1R1, R2R2 e rr

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7
Q

Explique efeito de dose? E quais os Ac mais comuns de acontecer?

A

Rh (Exceto D)
Kidd (Pode inclusive nao reagir com Hc hererozigotas)
Duffy
MNSs
Lutheran

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8
Q

Quais os reagentes que podemos usar para aumentar a reatividade do Ac antes de incubar a 37 graus?

A

Albumina 22%
LISS
PEG

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9
Q

QUal tipo de AGH e utilizado para detectar o Ac Poliespecifica ou monoespecifica

A

Monoespecifica no geral para IgG

Nao usamos o Poli O para evitar essa reação com complemento

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10
Q

COmo e o teste de Coombs para controle do negativo?

A

Sao Hemacias Rh positivas sensibilizadas com Anti-D logo vao reagir com o reagente AHG utilizado resultando em aglutinacao

Se o coombs for negativo deve repetir o teste

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11
Q

Quais as perguntas para identificar o Ac?

A

1) qual fase a reacao ocorreu?
- IgM reage melhor a temperatura ambiente e pode aglutinar na salina
- IgG reage melhor em fase de AGH

2) O controle autologo e positivo ou negativo??
- Se negativo pode indicar que a reacao e por um aloAc
- Se positivo pode ser um auto ou paciente com alo que recebeu transfusao nos ultimos 3 meses

3) Reacao ocorre em mais de uma Hemacia ?? Na mesma fase e mesma reatividade??

4) Tem hemolise ou reacao fraca?
- Hemolise> anti-Lea ou Leb, Anti-PP1Pk
- Aglutinacao fraca> Ac contra Lutheran ou anti-Sda

5) tem algutinacao real ou e um rouleaux?
- se rouleaux pode te algutinacao falsa (todos os testes que tem o plasma do pct iram algutinar incluindo autocontrole)
- Roleaux nao interfere na fase de AGH pois as Hc sao lavadas antes da adicao do AGH
- Roleaux pode sumir apos adicao de salina nos testes

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12
Q

Quais as principais limitacoes da triagem de Ac?

A
  • Pode nao detectar Ac que circulam em baixos titulos (26% dos casos media 7 meses)
  • Nao detecta ac contra ag de baixa prevalencia
  • ac com efeito de dose pode nao ser detectado se nao tiver Hc homozigotas
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13
Q

O que fazer caso triagem de Ac positiva?

A

Realizar painel expandico
DAT
Auto controle

Confirmar historia clinica

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14
Q

Como a historia clinica pode ajudar na identificacao de Ac?

A
  • Historio transfusional e gestacional (ex: se nao transfundiu nem gestou pensar em aloac que pode ser natural…)
  • Se usou medicamentos (Daratumomabe), IVIG, RhIg, GAL…
  • Identificar a raca dos individuos (alguns Ac sao especificos da raca branca ou negra)
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15
Q

QUal o primeiro passo ao analisar um painel?

A

Exluir Ac que nao podem ser responsaveis pela reatividade analisada

  • Analisar Hcs negativas em todas as fases (Os Ag dessas hcs em geral nao sao os culpados pela reatividade do Possivel AloAC)

Obs: E recomendado usar a exclusao apenas quando tem o Ag em Homozigose (visto possibilidade de não reatividade do ac em heterozigose)

Obs: A exceção a essa regra São Ag de baixa prevalência que são raramente expressos em homozigose como K, Kpa, Jsa, Lua (Podem ser excluidos em Heterozigose)

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16
Q

O que fazer apos utilizar a regra da exclusao?

A

Utilizar a técnica de inclusão

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17
Q

Regras para usar a tecnica de inclusao?

A

1) Todas as ceulas positivas reagem no mesmo grau?
- Reatividades diferentes podem indicar mais de um Ac
- pode ter efeito de dose
- Celulas que tem dois Ag culpados podem reagir mais
- Ag com expressao variavel

2) As celulas positivas reagem na mesma fase ou nao?
- Reacoes em fases diferentes podem indicar multiplos Ac
- Efeito de dose (Hc homozigota pode reagir antes da AGH)
- Fase da reacao identifica o provavel tipo de Ac e significancia clinica

3) As Hc positivas levam ao mesmo Ag ??
- Todas as Hcs positivas para o Ag reagem e todas negativas nao reagem

4) Todos os Ac contra Ag comuns foram excluidos?
- As vezes pelo painel nao vai dar pra excluir Ac contra ag de baixa prevalencia (Kpa, Jsa, Lua..) e visto baixa frequencia de Ac nao e necessario fazer testes adicionais para excluir esses Ac
- porem se nao for possivel excluir um Ac contra Ag de alta frequencia deve ser realizado teste com hemacias selecionadas para excluir esses antigenos…

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18
Q

Cite um exemplo de como realizar testagem de hemacias selecionadas qnd fica na duvida entre dois ag culpados de alta relavancia?

A

Ex> nao consegui excluir anti-E e anti-Fya

Realizar testagem com hemacia E+e-, Fya- se nao reagir esta excluido o anti-E

19
Q

O que mais podemos ter de regra para investigar hemacias positivas?

A

5) O controle autologo e negativo?
- negativo sugere um alo

6) Temos prova suficiente para provar o Aloac suspeito?
- Precisa de pelo menos 3 hc com Ag positivo e 3 Ag negativo

20
Q

A regra das 3 hc positivas e negativas pode ser usada quando um painel tem multiplos Ac?

A

Sim, porem tem que usar a regra para cada um dos Anticorpos identificados

Ex: Anti-K e anti-E
3 hc negativas que sao K-E-
3 hc positivas que sao K-E+
3 hc positivas que sao K+E-

21
Q

A regra dos 3 e 3 contempla quantos por cento de acertividade?

A

95%

logo pode ocorrer os achados em 5% dos casos devido ao acaso

22
Q

O que mais pode ser usado para analisar o painel?

A

7) O paciente não tem o Ag culpado?
- Pct nao faz Ac contra Ag que ele tem proprio
- Devemos fenotipar o paciente para o Ag encontrado no Painel
- Pode ajudar em casos complexos

23
Q

Pacitente encontra um Aloac no painel e acaba sendo fenotipado com positividade para esse mesmo ag o que pode ter acontecido?

A

Falso positivo
Erro de tecnica…

24
Q

Quando nao e possivel fenotipar o individuo?

A

Quando o DAT positivo
Ou
Recebeu transfusão nos últimos 3 meses

25
Q

O que da pra fazer para fenotipar o paciente com DAT positivo?

A

Utilizar tecnicar de eluicao para retirar o Ac da membrana da hemacia e poder fenotipar o paciente

  • Glicina acida EDTA (EGA)
  • Cloroquina

Se apos eluicao o DAT for negativo e possivel realizar a fenotipagem

26
Q

Quando realizamos a tecnica da Eluicao qual o unico Ag que nao pode ser fenotipado?

A

Kell, pois os Ag kell sao desnaturados com Glicina acida EDTA

27
Q

E se o DAT vier positivo apos tratamento com EGA?

A

E possivel repetir mais uma vez

Se continuar positivo apos dois tratamentos nao sera possivel fenotipar

28
Q

O que pode ser feito para fenotipar o individuo que transfundiu e tem DAT positivo?

A

Tipagem reticulocitaria
(Utiliza o reticulócito para fazer a fenotipagem)

29
Q

O que pode ser feito caso a fenotipagem seja dificultada?

A

Realizar genotipagem molecular

30
Q

O que pode ser feito alem do que ja foi dito para resolver identificacao do Ac?

A
  • Painel selecionado
    (Ex pode ser usado quando um pct ja tem um ac e quero ver se ele tem outro adicional)
  • Tratamento enzimatico
  • Neutralizacao
    (Alguns ac podem ser neutralizados por substancias… isso permite identificar outros ac no painel) -> Ex: Lewis e P1
  • Adsorcao
31
Q

QUais as principais limitacoes para a adsorcao de ac com Hemacias autologas?

A

Volume de Hemacias (as vezes em anemia grave nao tem volume adequado)

Recebeu transfusao nos ultimos 3 meses

Obs: e possivel tratar essas Hc previamente a adsorcao para aumentar a ligacao com Ac

32
Q

Como e o mecanismo de auto adsocrcao ? E pq precisa de muito volume de Hemacias?

A

No geral pode ser necessario varias adsorcoes para negativas um DAT (6-8 vezes)

inclusive pode acontecer de a autoadsorcao nao ser capaz de remover o autoac

33
Q

Se nao e possivel fazer uma autoadsorcao o que da pra fazer?

A

Aloadsorcao

34
Q

Qual o grande defeito da aloadsorcao
?

A

Hemacias alogenicas podem acabar adsorvendo Ac contra Ag de alta prevalencia

35
Q

Quais os dois tipos de aloadsorcao?

A
  • Paciente fenotipado: usar Hemacias alogenicas compativeis fenotipicamente
  • Paciente nao fenotipado: Utiliza Hc O com o fenotipo R1R1, R2R2, rr. Alem disso uma das Hc tem que ser negativo para K e outra negativa para Jka e outra negativa para Jkb
    As hemacias devem ser tratadas com enzima (Negativar duffy e MNS)
36
Q

Acidificacao do pH pode ajudar identificar qual Ag?

A

Anti-M

37
Q

O que fazer caso eu queira estudar um Ac que esta ligado na Hc (com coombs direto positivo)??

A

Eluicao e estudar esses ac no painel

38
Q

QUal teste deve ser positivo no Eluato para validar o teste?

A

Last wash deve ser positivo…Se negativo invalida o teste

Obs: O eluato concetra os Ac

39
Q

quais os metodos de eluicao?

A

Dependente de temperatura

pH

Solventes organicos

40
Q

QUais Ac que em geral nao causm hemolise significativa e que posso liberar transfusao caso crossmatch compativel?

A

Anti-M
Anti-N
ANti-P1
Anti-Lea
Anti-Leb

41
Q

Posso usar crossmatch como um divisor de aguas para permitir ou nao a liberacao da bolsa para o paciente?

A

Nao.

Pois caso o paciente tenha um Ac que ja nao e mais identificado o crossmatch vai ser compativel… Logo nesse caso deve pesquisar o Ag antes de fazer o crossmatch

42
Q

Como descobrir quantas bolsas testar para achar bolsa com Ag negativo para o aloac?

A

Dividir numero de bolsas necessario para o paciente pela frequencia esperada na populacao de Ag negativo

Ex: 2 bolsas, E negativo
2/ 0,7 (frequencia de individuos E negativos) = 2.8 (devo testar em geral 3 unidades para encontrar bolsa E negativo)

43
Q

De um exmeplo de como a raca pode ser usada para procurar um Ag negativo?

A

Fya

90% dos negros sao Fya negativos contra apenas 34% dos brancos

44
Q

Devo respeitar o fenotipo do individuo para transfundir?

A

EM geral existe uma recomendacao de respeitar o fenotipo em pacientes cronicamente transfundidos especialmente Talassemicos e pacientes com SCD

Alem disso e recomendado no geral respeitar Rh e kell , pois sao os Ag mais imunogenicos

Obs: isso para pacientes que nao tem aloac

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