Embryotransplantation og bioteknologi Flashcards

1
Q

Embryonerne til ET kan altså opnås på flere måder, hvilke?

A

•Ovum-pick-up
•IVF fra slagtehusovarier
•Skylning af in vivo embryoner
- og en kombination af disse!

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Hvilke punkter er vigtige under embryotransplantation?

A
Superovulation
Skylning 
Embryoner 
Recipienter 
Sygdomskontrol
Drægtighed
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Hvad er definitionen på superovulation?

A

Hormonel behandling for at stimulere til ovulation fra flere follikler end normalt for arten

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Hvordan fungerer superovulation? Hvad gør man?

A

Normalt: Inhibin fra dominerende follikel undertrykker endogent FSH. De underordnede follikler tilbagedannes.

Superovulation: Vi tilfører så mere FSH, så at de vokser frem. PG tilbagedanner CL, og inducerer så den superovulerede brunst.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Hvilke tre typer præparater benyttes ifm superovulation?

A

A: Follikelstimulerende (PMSG, FSH)
B: Luteolytiske (Prostaglandiner)
C: Ovulationsfremmende (HCG)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

I hvilken fase gives FSH ved superovulation?

A

I den midtluteale fase gives FSH, så at de små follikler udvikles

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Hvad vurderes superovulationssvaret ud fra?

A

Ovariernes størrelse og konsistens
Antal CL
Antal follikler

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Hvilke to steder kan der ske afvigelser der medfører individuel variation i superovulationer?

A

A: Oocytmodning
B: Ovidukten

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Hvordan kan afvigelser i ovidukten gøre at der sker individuel variation?

A

Bursae opfanger ikke alle oocytterne. De tabes i bughulen:
Væskeflow, ødem, motilitet ændres: Gamet-transport bliver asynkron

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Hvordan kan afvigelser i oocytmodningen gøre at der sker individuel variation?

A

Præmatur ovulation
Afvigelse i follikelendokrinologi (østrogen/progesteron)
Afvigelse i perifer endokrinologi (LH-top mangler eller progesteron for højt)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Hvilken kommunikation er der mellem embryo og ovidukt?

A

En aktiv kommunikation, bl.a. embryotrofe faktorer såsom væksthormon og insulin

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Hvordan foregår en skylning?

A

Koen undersøges
Epiduralanæstesi anlægges
Rektum tømmes straks
Vask og afspritning
Skyllekateter indsættes i bedste horn, ballonen fyldes og der skylles med 5-7 sprøjter
Omhyggelig afsluttende tømning
Samme procedurer for andet horn og så hurtigt i laboratoriet

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Efter skylning, hvad sker der da i laboratoriet?

A
Filteret skylles to gange ned i petri skål med kvadreret bund.
Embryoner i 3cm petriskål med 10% serum.
Embryonerne klassificeres.
De vaskes 10 gange.
De suges op i hvert sit strå.
Strået placeres i transferator.
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Hvilke 4 typer embryokvalitet er der?

A

Type A: Homogen cellemasse og farve
Type B: Små afvigelser i form og farve
Type C: Tydelige afvigelser
Type D: Mange udstødte celler og degenerative forandringer

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Hvad er forskel på kvier og køer som recipient?

A

Kvier lidt bedre end køer

Køer avlsmæssigt billigst

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Hvad vil man opnå i recipienter:

A

Dobbelt- eller enkeltsynkronisering

Exakt brunstsynkroni med embryo
Epiduralanæstesi hos køer
Evt cervixdilatator
Skånsom ilægning i ipsilaterale horn

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
17
Q

Transmission af patogener ved ET, kan stamme fra?

A

Forurening (personel, udstyr)
Patogen i flushing eller transportmedie
Patogen adhærence til zona pellucida
Patogen penetration ind over zona pellucida

18
Q

Hvad er in vitro embryo produktion?

A

Relies on bringing together oocytes and semen in a petri dish

19
Q

In vitro embryo produktion er baseret på tre teknikker, hvilke?

A

1) modning af immatur oocyt in vitro
2) befrugtning af in vitro modnet oocyt
3) in vitro kultur af zygoten (som forhåbentlig bliver embryo)

20
Q

Hvordan opsamles oocytter fra levende dyr?

A

Collection of oocytes from live animals is mainly done in cattle and the horse using ultrasound guided transvaginal aspiration of oocytes from an often superovulated donor.

21
Q

Kan man opsamle oocytter fra andet en levende dyr?

A

In domestic large animal species oocytes may also be collected from newly slaughtered animals.

22
Q

Hvordan opsamler man follikler fra et ovarie?

A

En kanyle på en vacuum pumpe. Foliklens indhold aspireres i en vacutainer.

23
Q

Aspirerede oocytter er i hvilken fase af meiosen?

A

In domestic large animal species, aspirated oocytes will be in the resting prophase of the first meiotic division, awaiting either ovulation or degeneration.

24
Q

Hvad er COCs?

A

Cumulus- oocyte-complexes. Det er det man aspirerer eller skyller. Det er i virkeligheden oocytten med den omkringliggende granulosaceller som kaldes cumulus celler.

25
Q

Oocytter udvælges til in vitro modning på baggrund af?

A

Only oocytes surrounded by three or more layers of cumulus cells are selected for in vitro oocyte maturation.

26
Q

Inkubationstiden af oocytten i IVM-mediet afhænger af dyreart. Hvorfor?

A

Tiden er defineret ud fra tide det tater for kernen af mode (i oocytten), sp altså genoptagelsen af den anden meiotiske metaphase.

27
Q

Bruger man optøet frosset sæd til in vitro embryo produktion hos alle dyrearter?

A

Nej ikke svin. Sæden fra orner tolererer ikke fryse-optøningsprocessen godt.

28
Q

Hvad skal der gøres ved sæden inden den kan benyttes til in vitro fertilization?

A

Den skal renses fra fortynder.

29
Q

Success af in vitro befrugtningsprocessen evauleres ofte på baggrund af antallet af pronuclei i den potentielle zygote. Hvad betyder det der er hhv 0, 1, 2 eller 3 PN?

A

0: Ubefrugtet oocyt
1: Parthenogenetic activation (aktiveret oocyt uden befrugtning)
2: Normal befrugtet
3: Polyspermy

30
Q

Hvad kan man gøre for at undgå polyspermi?

A

Man kan lave intracytoplasmic semen injection (microinseminering)

31
Q

Forklar en microinseminering

A

One isolates a single activated sperm cell in a viscous medium and injects it into a mature oocyte.

32
Q

Hvad er “Denudation” og hvorfor gør man det?

A

Det er fjernelse af cumulus celler. Man gør det for bedre at kunne visualisere befrugtningen.

33
Q

Hvor længe kan man have embryo in vitro?

A

Det er muligt indtil embryo når blastocyst stadiet, og skilles fra sit zona pelucida. Videre udvikling af embryo skal ske i en surrogat.

34
Q

For meget mere detalje om de forskellige metoder af In Vitro Embryo Production se slide:

A

Embryotechnologies in Domestic Large Animal Species, noter.pdf
Der er møg mange detaljer jeg ikke har med :p

35
Q

Giv tre gode årsager til at lave genetisk modificerede grise

A

1) Models for human disease
2) ”Gene pharming”. The making of pharmaceutical drugs, antibodies, hormones, enzymes or vaccines in live animals
3) Xenotransplantation

36
Q

Nævn de tre måder at lave genetisk modificerede grise i DK

A

1) Generation of transgenic pigs by somatic cell nuclear transfer, the so- called cloning technique.
2) Generation of transgenic pigs through the generation of mixed embryos, the so-called chimeras.
3) Generation of transgenic pigs by sperm mediated gene transfer using microinsemination or ICSI.

37
Q

Beskriv teknikken for standard kloning (somatic cell nuclear transfer)

A

Kernen med organismens DNA fra en somatisk celle fjernes, og resten af cellen smidt væk. Samtidig fernier man kernen i en ægcelle. Kernen fra den somatiske cells placers i ægcellen. Herefter vil den somatiske cellekerne blive omprogrammeret af værtscellen. Ægget med den nye kerne stimuleres via shock og starter deling. Efter mange mitotiske delinger ender det ud i en blastocyst med DNA identisk til værten.

38
Q

Hvad betyder knock in og knock out?

A
  • Knock-in = Insertion of new DNA

* Knock-out = Deletion of existing DNA

39
Q

Hvad er en chimera?

A

An organism composed of two or more genetically distinct cell types
• Cells from two or more zygotes

40
Q

Hvad er en mosaic?

A

An organism whose cells consist of at least two genotypically distinct populations that arose after fertilization.
• Cells of a single zygote lineage

41
Q

Beskriv sperm-mediated gene transfer

A

Man bruger sædcelle som transportmiddel for fremmed eller exogen DNA ind i oocytten under befrugtning