Cromatografia Flashcards
Cromatografia - Etimologia
Cromatos = separação
Cromatografia - O que é?
Processo de separação → por afinidade físico-química (por polaridade)
Migração diferencial de componentes de uma mistura
Cromatografia - Metodologia 2
Método físico-químico (não é um método bioquímico → mas pode ser utilizado na bioquímica).
Toxicologia → onde é mais utilizada
Cromatografia - Uso na Bioquímica 2
Vitaminas
Hb Glicada → Padrão Ouro
Cromatografia - Fases 2
Estacionária → onde adicionamos o analito (mistura)
Móvel → imiscível, não se mistura (líquida ou gasosa)
Cromatografia - 1ª Técnica 5
Botânico Russo → Mikhail Semyonovich Tswet, 1901.
→ Fase Móvel: éter de petróleo
→ Fase Estacionária: carbonato de cálcio em coluna de vidro
Separação de extratos vegetais resultando em faixas coloridas no decorrer da coluna (origem do nome cromatografia)
Cromatografia - Tipos de Papel 2
Papel de Filtro
Papel de Sílica
Cromatografia - Descrição do Processo 2
Papel Filtro de pé → joga tinta nele → coloca em um pouco de água → e espera evaporar
Quando começa a evaporar → carrega consigo o que estava no papel → e tbm a tinta
Cromatografia - Funcionamento 3
Analito colocado na fase estacionária → e a fase móvel carrega ele.
Quem (na composição do analito) tem + afinidade com a fase móvel → fica para frente (corre mais rápido)
Quem (na composição do analito) tem - afinidade com a fase móvel → fica para trás (corte mais lento)
Cromatografia - Amostras 4
Tinta
Sangue
Soro
Pó Branco (toxicologia) → para confirmar se é cocaína
Cromatografia - Função 1/2
Identificação de substâncias:
→ Substâncias = → correm juntas
→ Substâncias ≠ → correm em velocidades diferentes (se separam)
Cromatografia - Quem aparece primeiro no detector?
Quem correu mais rápido junto com a fase móvel
Cromatografia - 1ª Técnica
Cromatografia em Camada Delgada (CCD) → + antiga (tradicional) e barata
CCD - Descoberta
1901 → Botânico russo Mikhail Semyonovich Tswet
CCD - Fases Móvel e Estacionária 3
Fase Móvel → ?
Fase Estacionária → ?
*?
CCD - Fases Móvel e Estacionária 3
Fase Móvel → éter de petróleo
Fase Estacionária → carbonato de cálcio em coluna de vidro
*Separação de extratos vegetais → resultando em faixas coloridas no decorrer da coluna (origem do nome cromatografia)
Cromatógrafos - Tipos
HPLC
CG
Cromatógrafos - Fases Móveis
HPLC → ?
CG → ?
Cromatógrafos - Fases Móveis
HPLC → é líquido (que nós estipulamos)
CG → é gás
Cromatógrafos - Fases Estacionárias (são colunas)
HPLC → ?
CG → ?
Cromatógrafos - Fases Estacionárias (são colunas)
HPLC → coluna de metal com sílica compactada dentro dela (tamanho → caneta)
CG → capilar de metal (cobre) circular (tamanho → grafite 0,7) com camada fina de sílica por dentro
HPLC - Indicação de Uso 1/3
Substâncias que podem ser analisadas em temperatura ambiente:
→ proteínas
→ vitaminas hidrossolúveis
→ aminoácidos
CG - Indicação de Uso 1/2
Substâncias que podem ser analisadas em temperatura alta:
→ lipídios (colesterol, éster de colesterol, vitamina lipossolúvel
→ substâncias voláteis (álcool etílico)
Cromatografia Coluna - Líquida no HPLC 3
Sílica → está. dentro da coluna.
Equipamento → injeta amostra (tinta) na coluna → que já vem com solvente (água) correndo (em alta pressão) → no final existe um detector → que quando a 1ª substância passa ele marca o tempo e o pico → medindo sua qtd → então procuramos na biblioteca do PC qual substância tem aquelas características de corrida
Vitaminas Hidrossolúveis → B e C
