Buffycoat/Ficoll scheiding en FACS Flashcards
Wat is een Ficoll scheiding?
een basistechniek om cellen op basis van dichtheid te scheiden
Wat is een buffycoat?
de fractie van het bloed dat de meeste witte bloedcellen en bloedplaatjes bevat na centrifugeren van het bloed
Beschrijf van onder naar boven de verschillende onderdelen na de Ficoll scheiding
- erytrocyten
- granulocyten
- Ficoll
- leukocyten, monocyten, trombocyten en gedegranuleerde granulocyten
- plasma
Waarvoor dient een biosafety cabinet?
bescherming van zowel onderzoekers als het materiaal
Door de afzuig en filterwerking blijft het materiaal steriel, en worden onderzoekers niet besmet, zeker belangrijk in een lab waar met gmo’s gewerkt wordt.
Wat zegt de forward scatter (FSC) in een dotplot?
grootte van de cellen
Wat zegt de sideward scatter (SSC) in een dotplot?
mate van onregelmatigheid/gespikkeldheid van een cel
Wat zijn excitatie golflengte lasers?
Dat is de golflengte van de laser waarmee een elektron geëxciteerd kan worden.
Wat is het emissiespectrum?
spectrum van licht dat wordt uitgezonden als een elektron terugvalt (altijd een grotere golflengte dan excitatiegolflengte, omdat een deel van de energie verloren gaat)
Wat is een tandem dye?
een tandem van twee fluorchromen aan elkaar gekoppeld, waarbij eerst een elektron van het één wordt geëxciteerd, dan terugvalt en dat uitgezonden licht vervolgens het andere elektron in het andere fluorchroom exciteert, dat later licht uitzendt (doel is om meer spreiding te krijgen van de golflengte licht die uitgezonden wordt)
Wat is een short pass filter?
filter die alleen licht met kortere golflengten doorlaat
Wat is een long pass filter?
een filter die alleen licht met langere golflengten doorlaat
wat is PMT?
fotomateriaal waar de kleuren licht opvallen om een elektron vrij te maken
Wat is versterking bij FACS?
doordat het geëxciteerde licht op een PMT valt, wordt een elektron losgemaakt, en dit elektron zorgt ervoor dat er nog veel meer elektronen vrijkomen, waardoor het signaal versterkt wordt.
Wat is compensatie bij FACS analyse?
soms heb je overlap van twee fluorchromen. Een computermodel is zo afgesteld dat er gecompenseerd wordt voor deze ‘dubbeltelling’ zodat je niet te veel telt.
Wat kleurt alle leukocyten?
CD45
