5.9 Proteomas y subpreotomas celulares y expresión diferencial Flashcards
Principal objetivo de proteómica
Id de protes y caracterizar su función
Definición de proteómica subcelular
Estudio de protes a nivel de organelos
¿Qué nos permite la expresión diferencial?
Comparar la expresión de una prote con un tratamiento vs otro tratamiento
¿Cómo se estudia la subproteomica?
- Fluorecencia: Id cada parte de los organelos para saber el comportamiento de las protes a nivel cél (o sea de lo organelos pue)
- Proximidad: analizamos interacción de protes
- Fraccionamiento bioquimico: x detergentes, separa organelos (x densidad x peso molecular pa medirlo por espectometría de masas)
Para id proteínas hacemos
- Western blot
- Espectrometria de masas
Principal función del estudio de subproteomica
Biomarcadores
“Marcadores que se pueden utilizar en medicina para detección precoz, el dx, estadificación o pronóstico de enfermedades”
- Permite determinar el tratamiento más adecuado
- Marcadores pueden ser: metabolitos, péptidos, protes, medidas de propiedades físicas
Facts de biomarcadores
- Descubrimiento se aceleró con desarrollo de tecnologías ómicas
- Pueden proceder del propio proceso patológico o reflejar la reacción del cuerpo frente a la enfermedad
- Pueden encontrarse en líquidos biológicos y tejidos (orina, plasma, saliva, liq intersticial, entre otros)
Matrix Assisted Laser Desorption Time Of Flight
Facts de MALDI-TOF
Desorción/ionización láser asistido por matriz acoplada a tiempo de vuel
- Tecnología asistida x matriz
- Debe ser co-cristalizada en matriz
- Placa con matriz y analito > se irradia con un láser (337nm), causa que analito se expulse con partes de la matriz de forma gaseosa (desorción)
- Moléculas de matriz transfieren protones, ionizado a la muestra (ionización)
- Los residuos de la matriz se eliminan (desolvatación)
Facts de tiempo de vuelo
MALDI-TOF
- Moléculas serán aceleradas con un campo eléctrico, la velocidad de movimiento de las moléculas
- Tiempo que pasan las moléculas dentro del analizador
- Alta capacidad de procesamiento (96 analitos de diferentes muestras a la vez)
Entre - peso, + velocidad
Q tanto tiempo tarda en llegar desde la matriz al detector
Usos del tiempo de vuelo
MALDI-TOF
- Id de cepas bacterianas y fúngicas mediante las variantes de masas de carga
- Diagnóstico