5.7 Interacciones prote-prote y rutas de interacción

Question 1

V/F

Es suficiente con conocer la secuencia de nt y transcriptoma de una prote para conocer su función

Answer 1

FALSO

Question 2

Es necesario conocerlo para conocer la función de las protes

Answer 2

Interacción con otras protes, se clasifican en:
- Dominios de misma cadena
- Dominios de dif cadena
- Complejos entre protes dependientes

Question 3

Metodologías para evaluar las interacciones

Answer 3

• Rayos X
• ELISA
• Doble hibrido Y2H
• Microarreglo de protes
• Microscopia electrónica
• Inmunofluorescencia
• FRET (energía fluorescente transferida por resonancia)

Question 4

Metodos de id de interacción prote-prote

Facts de Y2H

Years two hibrid screeing técnica de doble hibrido en levadura

Answer 4

1. Fact de transcripción es separado en dos: dominios de unión a ADN y dominio de activación
2. Unión de protes a dominios > analizamos interacción
3. Si interacción> unión dominios de FT > transcripción del gen reportero

Question 5

Métodos de validación interacción prote-prote

Facts de FRET

Fluorescense resonance energy transfer

Answer 5

• Método microscopico q monitorea interacción en tiempo real
• Protes con floroforos aceptores y donadores > interacción = fluorescencia
• CFP se excita a 436nm, emite 480nm (azul)

Question 6

Métodos de validación interacción prote-prote

¿Qué pasa cuando hay interacción entre ambas protes en FRET?

Fluorescense resonance energy transfer

Answer 6

YFP (acepta) se excita a 480nm, pero emite una luz amarilla

Question 7

Métodos de validación interacción prote-prote

Ventajas de FRET

Fluorescense resonance energy transfer

Answer 7

Se puede medir el tiempo de interacción entre las protes