Ve Flashcards

1
Q

Qué es la hibridación de ácidos nucleicos

A

forma de detectar secuencias específicas de nucleótidos empleando sondas marcadas

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Q

De donde proceden los ácidos nucleicos involucrados

A

de fuentes diferentes

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3
Q

Cómo son las sondas

A

de cadena sencilla

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4
Q

Fluorescent in situ Hybridization (FISH)

A

permite mapear la ubicación relativa de secuencias diferentes a lo largo de secuencias únicas de DNA

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5
Q

Qué permite localizar FISH

A

la expresión génica en un tejido

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6
Q

En FISH, como se desnaturaliza el DNA

A

con solución salina caliente

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7
Q

Contratinción de FISH

A

ioduro de propidio

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8
Q

Sondas específicas de locus

A

anomalías cromosómicas numéricas (aneuplodías) y estructurales (deleción, duplicación)

específicas para una región cromosómica única

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9
Q

Sonda fusión dual

A

se unen a regiones contiguas al punto de traslocación

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10
Q

Traslocación

A

anomalía estructural

se transfiere una parte del cromosoma a otro

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11
Q

Sonda doble color para ruptura

A

revelan eventos de traslocación

se unen al cromosoma intacto flanqueando el punto de ruptura

ocurre traslocación y la sonda se separa

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12
Q

Sondas centroméricas (satélite)

A

hibridan en las regiones repetidas que rodean los centrómeros

pueden detectar aneuploidía

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13
Q

Sondas teloméricas

A

revelar pequeñas deleciones o traslocaciones que NO son fáciles de visualizar en el cariotipo estándar

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14
Q

Objetivo de Northern Blot y Southern Blot

A

identificar secuencias de interés en el ácido nucleico inmovilizado en una matriz de papel, nylon o nitrocelulosa

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15
Q

Cómo puede ser la transferencia en NB y SB

A

pasiva o electrotransferencia

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16
Q

Southern Blot ejemplo

A

DNA genómico digerido previamente con enzimas de restricción

17
Q

Northern Blot ejemplo

A

análisos de expresión. Niveles del RNAm

18
Q

Sonda marcada o acoplada a una etiqueta

A

P32 (radiactivo)
Digoxigenina (DIG)

19
Q

Digoxigenina (DIG)

A

anticuerpos específicos alfaDIG
anticuerpo acoplado a fosfatasa alcalina
sustrato quimioluminiscente. CSPD

20
Q

Qué se debe considerar en el Southern Blot

A

la muestra que se está analizando y lo que representa el que haya o no reconocimiento específico de la sonda empleada

21
Q

Northern Blot

A

nivel de expresión de un gen relacionado con el cuadro clínico

22
Q

Dot Blot

A

útil para muestras de DNA y RNA

permite analizar de forma rápida la presencia de una secuencia específica en una muestra determinada

23
Q

Hibridación de colonias o placas, Cómo se aplican las muestras en Dot Blot

A

con un capilar en la membrana directamente

24
Q

Hibridación de colonias o placas

A

membrana se pone en contacto con las colonias

membrana se trata y DNA o RNA queda expuesto y pueda hibridar la sonda marcada