IVb. Extracción y cuantificación de proteínas Flashcards
Secuenciación
identificar el gen que la codifica y poder clonarla
Para qué nos sirve extraer proteínas
secuenciación
expresar una proteína recombinante silvestre
producción de anticuerpos
análisis estructurales
estudiar función, regulación, interacciones con otras moléculas
Disrupción mecánica
de tejidos principalmente, no necesaria si la muestra proviene de cultivo celular
Licuadora
la muestra se tritura mediante cuchillas rotatorias
Tipo de muestra de licuadora
gran cantidad de tejido
Homogenizador Dounce
tubo de vidrio con pistón ajustado moja las células por acción de corte
Tipo de muestra de Homogenizador Dounce
células tisulares
Homogenizador de ultrasonidos
ondas de sonido emitidas por una sonda para romper las membranas celulares
Tipo de muestra de Homogenizador de ultrasonidos
células, tejidos, bacterias
Pulverización en nitrógeno líquido
la muestra se pulveriza utilizando un mortero y una almirez refrigerados
Tipo de muestra de Pulverización en nitrógeno líquido
tejido animal o vegetal
Perlas de vidrio
la ruptura celular se produce por agitación de las perlas de vidrio
Tipo de muestra de perlas de vidrio
levaduras
Buffer de lisis con:
- inhibidor de proteasas
- detergente
- estabilizadores
Inhibidor de proteasas
EDTA
