IVe. Inmunotécnicas Flashcards

1
Q

Inmunotécnicas para microscopía

A

inmunoflourescencia
inmunihistoquímica
confocal de fluorescencia

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Puede considerarse una inmunotécnica al emplearse un anticuerpo específico contra la proteína de unión al ácido nucleico

A

EMSA

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Antígeno

A

molécula que induce la formación de al menos un anticuerpo específico

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Tiene uno (al menos) o más epítopes

A

antígeno

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Epítope

A

región de la molécula del antígeno que es reconocida por el anticuerpo, formada por AA

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Cómo puede ser un epítope

A

secuencial/lineal
conformacional/discontinuo

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Anticuerpo

A

proteína sérica conocida como inmunoglobulina que reconoce específicamente a un epítope del antígeno

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

La región constante (Fc) es…

A

específica de cada especie

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Anticuerpo monoclonal

A

anticuerpo producido por un solo clon de linfocitos B

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Anticuerpos policlonares

A

mezcla heterogénea de anticuerpos producidos por diferentes clones de células B

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Inmunihistoquímica función

A

para identificar y localizar antígenos (proteínas) en una muestra de tejido

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Métodos de la inmunohistoquímica

A

directo
indirecto

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

método directo de la inmunohistoquímica

A

anticuerpo primerio específico para el antígeno que estamos tratando de identificar

acoplado a una enzima

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

método indirecto de la inmunohistoquímica

A

anticuerpo primario de una especie en contra del antígeno que se trata de identificar

anticuerpo secundario, contra la Fc de la especie, se obtuvo anticuerpo primerio acoplado a una enzima

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Fijación

A

inmoviliza las células y las preserva

une covalentemente las moléculas proteicas a sus vecinas

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Metodología de la inmunohistoquímica

A

fijación
cortes
incubación con anticuerpo
cromógeno para la enzima
montaje

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
17
Q

Indica replicación activa del virus

A

HBcAg - dentro
HBsAg - fuera

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
18
Q

Función de microscopía de fluorescencia

A

detectar específicamente algunas proteínas u otras moléculas en células y tejidos

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
19
Q

Fluorocromo

A

molécula fluorescente

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
20
Q

Esparte del fluorocromo

A

fluoróforo

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
21
Q

Fluoróforo

A

absorbe la luz de una determinada longitud de onda y emite luz de otra longitud de onda más larga

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
22
Q

Método directo de la microscopía de fluoresencia

A

anticuerpo primario específico para el antígeno (Ag) acoplado a un fluorocromo (F)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
23
Q

Método indirecto de la microscopía de fluoresencia

A

anticuerpo primario de una especie en contra del antígeno (Ag)

anticuerpo secundario acoplado a un fluorocromo (F)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
24
Q

Método de microscopía de fluorescencia en el que el anticuerpo secundario reconoce la región constante (Fc) de la especie donde se obtuvo del anticuerpo primario

A

método indirecto

25
Contratinción
visualización de diferentes moléculas al mismo tiempo en una preparación
26
La tinción de núcleos se logra con...
DAPI (4,6-diamidino-2-fenilindol) o yoduro de propidio
27
Componentes del microscopio de flurescencia
filtro espejo dicroico filtro
28
1er filtro del microscopio de fluorescencia
deja pasar solamente la luz de cierta longitud de onda
29
2do filtro del microscopio de fluorescencia
refleja la luz en cierta longitud de onda y se transmite la luz de otra longitud de onda mayor
30
BrdU
identifica regiones en proceso síntesis activa de DNA
31
Función del microscopio confocal de fluorescencia
observar una imagen de la arquitectura tridimensional de una célula o un tedjijo
32
Los métodos electrónicos del microscopio confocaal de fluorescencia permiten...
enfocar un plano de una nuestra eliminando la luz que proviene de las zonas fuera del foco superiores e inferioeres
33
En el proceso de obtención de secciones finas...
se pierde info respecto a la tercera dimensión
34
Permite mejor visión de todo a profundidar
confocal
35
Citometría de flujo
en el rencuentro y clasificación de células por sus caract. morfológicas y presencia de biomarcadores
36
Características morfológicas
tamaño granularidad
37
Presencia de biomarcadores en citometría de flujo
marcados por antucuerpos acoplando
38
SSC
granularidad
39
FSC
tamaño celular
40
Se puede detectar cualquier molécula en la célula, en tanto tengamos ...
un anticuerpo específico para ella, acoplado a un fluorocromo
41
Las células se pueden contar
verdadero
42
Las células pueden ser incluso separadas y recuperadas
verdadero
43
Qué provoca la BAJA cantidad de eosinófilos y basófilos
no se definen en base a FSC y SSC
44
Atraviesa la membrana celular alterada en células muertas y las tiñe
ioduro de propidio
45
ELISA
permite evaluar a una proteína de manera cuantitativa
46
ELISA directo
detección de Ag en sangre u orina el anticuerpo primario debe venir en la muestra
47
ELISA indirecto
detección de Ag con un solo secundario acoplado a enzima - cambiando el primario o detección de anticuerpos anticuerpo primario debe venir en la muestra
48
ELISA sándwich
es más sensible detección de Ag unión específica al anticuerpo de captura y al 2do a-Ag es policional
49
Western Blot
-electroforesis -transferencia: electrotransferencia y difusión simple o pasiva -inmunodetección
50
Función Western Blot
detección mediante un anticuerpo específico, de una proteína dentro de una muestra biológica
51
Para qué se usa Western Blot
-estimar el tamaño de la proteína (corrimiento electroforético) -evidenciar isoformas
52
Estructura de transferencia
esponja papel filtro PVDF membrana Gel papel filtro esponja
53
Comúnmente la proteína blanco está alterada y...
se asume que conserva su función y localización normal
54
Qué es una etiqueta
secuencia proteica corta que es reconocida fuertemente por un anticuerpo comercial característico
55
Para qué se emplea la proteína de difusión con una etiqueta de epítopo
inmunofluorescencia inmunoprecipitación
56
inmunofluorescencia
el anticuerpo está unido a un fluorocromo
57
inmunoprecipitación
identificar interacciones funcionales proteína - proteína con proteínas hasta ese momento desconocidas
58
El complejo proteico puede estar formado por varias proteínas
inmunoprecipatación
59
Una variante pude ser la purificación del complejo proteico por columna de afinidad ...
inmovilizando el anticuerpo en la columna