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BIOLOGÍA MOLECULAR > IVe. Inmunotécnicas > Flashcards

IVe. Inmunotécnicas Flashcards

1
Q

Inmunotécnicas para microscopía

A

inmunoflourescencia
inmunihistoquímica
confocal de fluorescencia

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Q

Puede considerarse una inmunotécnica al emplearse un anticuerpo específico contra la proteína de unión al ácido nucleico

A

EMSA

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3
Q

Antígeno

A

molécula que induce la formación de al menos un anticuerpo específico

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4
Q

Tiene uno (al menos) o más epítopes

A

antígeno

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5
Q

Epítope

A

región de la molécula del antígeno que es reconocida por el anticuerpo, formada por AA

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6
Q

Cómo puede ser un epítope

A

secuencial/lineal
conformacional/discontinuo

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7
Q

Anticuerpo

A

proteína sérica conocida como inmunoglobulina que reconoce específicamente a un epítope del antígeno

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8
Q

La región constante (Fc) es…

A

específica de cada especie

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9
Q

Anticuerpo monoclonal

A

anticuerpo producido por un solo clon de linfocitos B

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10
Q

Anticuerpos policlonares

A

mezcla heterogénea de anticuerpos producidos por diferentes clones de células B

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11
Q

Inmunihistoquímica función

A

para identificar y localizar antígenos (proteínas) en una muestra de tejido

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12
Q

Métodos de la inmunohistoquímica

A

directo
indirecto

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13
Q

método directo de la inmunohistoquímica

A

anticuerpo primerio específico para el antígeno que estamos tratando de identificar

acoplado a una enzima

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14
Q

método indirecto de la inmunohistoquímica

A

anticuerpo primario de una especie en contra del antígeno que se trata de identificar

anticuerpo secundario, contra la Fc de la especie, se obtuvo anticuerpo primerio acoplado a una enzima

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15
Q

Fijación

A

inmoviliza las células y las preserva

une covalentemente las moléculas proteicas a sus vecinas

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16
Q

Metodología de la inmunohistoquímica

A

fijación
cortes
incubación con anticuerpo
cromógeno para la enzima
montaje

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17
Q

Indica replicación activa del virus

A

HBcAg - dentro
HBsAg - fuera

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18
Q

Función de microscopía de fluorescencia

A

detectar específicamente algunas proteínas u otras moléculas en células y tejidos

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19
Q

Fluorocromo

A

molécula fluorescente

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20
Q

Esparte del fluorocromo

A

fluoróforo

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21
Q

Fluoróforo

A

absorbe la luz de una determinada longitud de onda y emite luz de otra longitud de onda más larga

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22
Q

Método directo de la microscopía de fluoresencia

A

anticuerpo primario específico para el antígeno (Ag) acoplado a un fluorocromo (F)

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23
Q

Método indirecto de la microscopía de fluoresencia

A

anticuerpo primario de una especie en contra del antígeno (Ag)

anticuerpo secundario acoplado a un fluorocromo (F)

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24
Q

Método de microscopía de fluorescencia en el que el anticuerpo secundario reconoce la región constante (Fc) de la especie donde se obtuvo del anticuerpo primario

A

método indirecto

25
Q

Contratinción

A

visualización de diferentes moléculas al mismo tiempo en una preparación

26
Q

La tinción de núcleos se logra con…

A

DAPI (4,6-diamidino-2-fenilindol) o yoduro de propidio

27
Q

Componentes del microscopio de flurescencia

A

filtro
espejo dicroico
filtro

28
Q

1er filtro del microscopio de fluorescencia

A

deja pasar solamente la luz de cierta longitud de onda

29
Q

2do filtro del microscopio de fluorescencia

A

refleja la luz en cierta longitud de onda y se transmite la luz de otra longitud de onda mayor

30
Q

BrdU

A

identifica regiones en proceso síntesis activa de DNA

31
Q

Función del microscopio confocal de fluorescencia

A

observar una imagen de la arquitectura tridimensional de una célula o un tedjijo

32
Q

Los métodos electrónicos del microscopio confocaal de fluorescencia permiten…

A

enfocar un plano de una nuestra eliminando la luz que proviene de las zonas fuera del foco superiores e inferioeres

33
Q

En el proceso de obtención de secciones finas…

A

se pierde info respecto a la tercera dimensión

34
Q

Permite mejor visión de todo a profundidar

A

confocal

35
Q

Citometría de flujo

A

en el rencuentro y clasificación de células por sus caract. morfológicas y presencia de biomarcadores

36
Q

Características morfológicas

A

tamaño
granularidad

37
Q

Presencia de biomarcadores en citometría de flujo

A

marcados por antucuerpos acoplando

38
Q

SSC

A

granularidad

39
Q

FSC

A

tamaño celular

40
Q

Se puede detectar cualquier molécula en la célula, en tanto tengamos …

A

un anticuerpo específico para ella, acoplado a un fluorocromo

41
Q

Las células se pueden contar

A

verdadero

42
Q

Las células pueden ser incluso separadas y recuperadas

A

verdadero

43
Q

Qué provoca la BAJA cantidad de eosinófilos y basófilos

A

no se definen en base a FSC y SSC

44
Q

Atraviesa la membrana celular alterada en células muertas y las tiñe

A

ioduro de propidio

45
Q

ELISA

A

permite evaluar a una proteína de manera cuantitativa

46
Q

ELISA directo

A

detección de Ag en sangre u orina

el anticuerpo primario debe venir en la muestra

47
Q

ELISA indirecto

A

detección de Ag con un solo secundario acoplado a enzima - cambiando el primario o detección de anticuerpos

anticuerpo primario debe venir en la muestra

48
Q

ELISA sándwich

A

es más sensible
detección de Ag

unión específica al anticuerpo de captura y al 2do a-Ag es policional

49
Q

Western Blot

A

-electroforesis
-transferencia: electrotransferencia y difusión simple o pasiva
-inmunodetección

50
Q

Función Western Blot

A

detección mediante un anticuerpo específico, de una proteína dentro de una muestra biológica

51
Q

Para qué se usa Western Blot

A

-estimar el tamaño de la proteína (corrimiento electroforético)
-evidenciar isoformas

52
Q

Estructura de transferencia

A

esponja
papel filtro
PVDF membrana
Gel
papel filtro
esponja

53
Q

Comúnmente la proteína blanco está alterada y…

A

se asume que conserva su función y localización normal

54
Q

Qué es una etiqueta

A

secuencia proteica corta que es reconocida fuertemente por un anticuerpo comercial característico

55
Q

Para qué se emplea la proteína de difusión con una etiqueta de epítopo

A

inmunofluorescencia
inmunoprecipitación

56
Q

inmunofluorescencia

A

el anticuerpo está unido a un fluorocromo

57
Q

inmunoprecipitación

A

identificar interacciones funcionales proteína - proteína con proteínas hasta ese momento desconocidas

58
Q

El complejo proteico puede estar formado por varias proteínas

A

inmunoprecipatación

59
Q

Una variante pude ser la purificación del complejo proteico por columna de afinidad …

A

inmovilizando el anticuerpo en la columna

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