Manipulación de genes Flashcards
Son modificaciones al azar
Manipulación de genes
Tipos de manipulación de genes
- Microinyección de DNA en pronúcleos en los huevos fertilizados
- Modificaciones genéticas en células madre embriónicas
- Clonación
- CRISPR-Cas
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Características de la manipulación de genes
- Variantes
- Ectópicas
- Inesperadas
- Patrones de expresión subóptimas
Pasos del proceso de macroinyección de DNA en pronúcleos en los huevos fertilizados
- iDENTIFICAción del gen de interés
- Inserción del gen en el vector apropiado
- Microinyección del DNA dentro del pronúcleo de un huevo fertilizado
- Implantación del huevo microinyectado en una madre alquiler
- Desarrollo del embrión hasta su nacimiento
- Demostración que el gen ha sido incorporado de manera estable
- Demostrar que el gen se expresa
¿De dónde se obtienen las células madre embrionarias?
De los blastocistos
Problemas de la macroinyección de DNA en pronúcleos en los huevos fertilizados (4)
- Sobreviven pocos huevos
- El gen se inserta al azar en los cromosomas
- No todas las células del animal reciben el gen
- El gen no se expresa lo suficiente
¿En qué etapa deben estar las células para la transferencia del núcleo a célula somática?
En G0 o G1
CRISPR
Repeticiones palindrómicas cortas agrupadas y regularmente interespaciadas
Clustered regulary-interspaced short palindromic repeats
¿Qué es CAS?
Proteínas asociadas a CRISPR
Proceso de CRISPR-Cas
- Pequeños fragmentos de DNA viral o plásmidos se incorporan al genoma bacteriano con gran cantidad de secuencias palindrómicas cortas agrupadas y regularmente interespaciadas
- Transcripción y generación de un RNA no codificante (pre-crRNA), se procesa mediante unas proteínas (Cas)
- Formación de crRNA maduro
- Ensamble de proteína Cas y el crRNA
Aplicaciones de CRISPR-Cas9
- Mutar DNA
- Insertar DNA
- Remover fragmentos de DNA
- Diseño de terapias génicas
- Terapia molecular
- Terapia de células madre
Es la manera de manipular el genoma sin alterar la secuencia genética subyacente
CRISPR-Cas9
