Diagnóstico molecular Flashcards
Técnicas de biología molecular en beneficio de la salud humana, detectando y/o cuantificando secuencias genéticas específicas de DNA, RNA y proteínas
Diagnóstico molecular
Tipos de PCR
- PCR tiempo real
- PCR transcriptasa reversa
- PCR multiplex
Aplicaciones de PCR estándar
Detección cualitativa de un segmento de DNA
Características de PCR estándar
Aplificación de un segmento de DNA utilizando dos partidores. La detección de la amplificación es mediante agarosa
Aplicaciones de PCR multiplex
Detección cualitativa de varios segmentos de DNA en una sola reacción de PCR
Características de PCR multiplex
Amplificación de 2 o + segmentos de DNA utilizando varios partidores en una sola reacción de amplificación. La detección es mediante geles de agarosa
Aplicaciones de PCR-RFLP
Detección de polimorfismos genéticos
PCR-RFLP
Restriction fragment lenght polymorphisms
SNPs
Polimorfismos genéticos
Características de PCR-RFLP
PCR estándar con paso posterior de digestión con enzimas de restricción
RT-PCR
Reverse transcriptase PCR
Aplicaciones de RT-PCR
- Expresión de genes
- Detección de virus RNA
Características de RT-PCR
Síntesis de cDNA a partir de RNA mediante transcripción reversa, seguido de una PCR
PCR-TR o qPCR
PCR de tiempo real
Aplicaciones de PCR-TR o qPCR
- Detección cuantitativa de uno o varios segmentos de DNA
- Cuantificación de DNA en la muestra
- Expresión de genes
Características de PCR-TR o qPCR
PCR estándar donde se utilizan tinciones o sondas con fluoróforos para la detección de los fragmentos amplificados
Pasos estándar para realizar una PCR
- Desnaturalización
- Alineamiento
- Extensión
Enfermedades para las que sirve el diagnóstico molecular
- Enfermedades oncológicas
- Enfermedades infecciosas
- Enfermedades genéticas
Microbiología clásica
- Largos periodos de crecimiento
- Condiciones de cultivo
- Obtención de muestra
Biología molecular
- No es necesario un microorganismo viable
- Alta sensibilidad y especificidad
- Rapidez
GeneXpert
- Más sensible que una baciloscopía
- Detecta simultáneamente al bacilo y su resistencia a antibióticos
SEPSIS
Disfunción orgánica potencialmente mortal causada por una respuesta disregulada del huesped a la infección
¿Para qué sirve la biología molecular?
- Predicción de la evolución de uja neoplasia
- Elección de tratamiento