Konjugation

Question 1

Hur fungerar konjugation ?

Answer 1

• Bakteriekonjugation är överföring av genetiskt material
mellan bakterieceller via direktkontakt mellan
bakterierna.
• Upptäcktes 1946 av Joshua Lederberg och Edward
Tatum
• Konjugation tillhör mekanismen horisontell
genöverföring/ likt transformation och transduktion

Question 2

Hur fungerar Bakterie sex?

Answer 2

-> En okonventionell variant av ”bakteriesex”
• Innebär överföring av genetiskt material men
inte likställt med sexuell reproduktion
• Främst Gram-negativa bakterier
• F-pili (könspili)

Question 3

Hur sker produktion av pili?

Answer 3

Produktion av pili styrs via fertilitetsfaktorn, F-faktorn.
• Givarcell med F-pili
• Mottagarcell utan F-pili
• Samma eller liknande species eller genus

Question 4

Hur fungerar konjugationsplasmiderna?

Answer 4

• De flesta konjugationsplasmiderna innehåller
  system som kontrollerar mottagarcellen så att
  den inte redan innehåller något liknande
  element.
  -Genetiskt värdefull information/egenskaper
  som överförs.
• T ex antibiotikaresistens och förmåga att
  metabolisera eller producera olika produkter

Question 5

Vad kan plasmider vara?

Answer 5

Plasmider kan vara:
•Konjugativa
•Mobiliserbara
•Ej överförbara

Question 6

Hur fungerar KONJUGATIONSPROCESSEN?

Answer 6

F-pili växer ut
• Fäster till mottagarcellen
• Exakt mekanism okänd.
• Bildar cytoplasmisk brygga där DNA material 
kan överföras

Question 7

Vad är F-plasmiden ?

Answer 7

-> F-plasmiden är en episome (en plasmid som kan
integrera sig själv in i en bakteriekromosom via
homolog rekombination) ca 100 kb stor.
• oriV origin of replication
• oriT origin of transfer,
• Bara en F-plasmid per bakterie – integrerad (
• F-plasmiden bär på tra och trb lokus – ca 33kb och
innehåller ca 40 gener
• tra locus inkluderar pilin - genen och regulatoriska gener
– ger pili på ytan
• Innehåller även proteiner för att kunna binda till
mottagarcellens yta
• Membranfusion
• Kopia 5´till 3´änden.

Question 8

Finns Två varianter på konjugation, vilka?

Answer 8

• F+

• Hfr (high frequency recombination)

Question 9

Hur fungerar F+ konjugation?

Answer 9

Givarcellen gör en kopia av sin F-faktor plasmid och skickar
över kopian till mottagarcellen.
Båda blir F+

Question 10

Hur fungerar Hfr-konjugationen?

Answer 10

1) Givarbakteriens F-plasmid 
kan integreras in dess egen
kromosom med rekombination
-> Bakterie med integrerad 
F-plasmid kallas Hfr

Kontakt via sex-
pilus kan
upprättas mellan 
en Hfr-bakterie 
och en
F-
-> bakterie
Givarbakteriens
ena DNA-sträng
börjar överföras
till 
mottagarbakterien

-> DNA-överföringen 
avbryts oftast innan
hela strängen förts
över.
-> Allt ssDNA görs 
dubbelsträngat i
båda bakterierna

-> Det överförda
DNA:t kan integreras i 
mottagar-
bakteriens kromosom
-> Mottagarbakterien förblir
oftast F-, eftersom 
hela F-plasmiden sällan 
förts över.

Question 11

Hur fungerar KONJUGATION HOS GRAM-POSITIVA BAKTERIER

Answer 11

• Sker inte via pili
• Minst 2 olika sorters självöverförande plasmider
• Även konjugativa transposoner
• Pheromone-responding plasmids –
enterokocker –clumping inducing factors –
hemolysiner, bakteriociner, ab resistens
• Plasmidöverföring även hos streptokocker och
stafylokocker (BHR-plasmider)– ofta kopplat till
antibiotikaresistens, mer okänd mekanism

Question 12

 Vilka plattor skulle man kunna odla på för att verifiera sitt
resultat?
 Vad kommer den nya bakterien ha för egenskaper?
 Vad blir rekombinationsfrekvensen?

Answer 12

RESULTAT
- Streptomycinagarplattor med selektivt medium för
påvisande av konjugation
- Bara Rekombinanten med egenskaperna F-, trp+, met-,
strepR kommer att kunna växa
- Blåplattor: K 40 och K 43 kommer att växa men med olika
utseende