HC 10 Cardiac cell therapy

Question 1

Celtherapie

Answer 1

Benadering waarbij cellen worden gebruikt om beschadigd hartweefsel te herstellen of regeneren

Question 2

Wat is het doel van celtherapie

Answer 2

• directe herplaatsing cardiomyocyten
• structurele versterking plaatsen
• het redden van inactief weefsel
• regeneratie vanuit omliggende cellen
• verminderen van littekenvorming

Question 3

Wat zijn de soorten celtherapie bij harten met infarct

Answer 3

• directe replacement
• structural reinforcement: cellen toevoegen om scheuren te voorkomen
• salvage hibernating tissue: wakker maken van de hartcellen
• Regeneration from endogenous cells: huidige hartcellen activeren zodat ze delen
• limiting scar formation: border zone in leven houden zodat het littekenweefsel zo klein mogelijk is

Question 4

Wat zijn de problemen van gene cel therapie

Answer 4

• isolatie van cellen: worden het liefst autoloog verkregen
• Naar de juiste plek brengen
• Overleving en proliferatie van de ingebrachte cellen
• elektromechanische integratie
• stabiliteit en veiligheid

Question 5

Bronnen van somatische cellen

Answer 5

• beenmerg
• vetweefsel
• skeletspieren

Question 6

soorten stamcellen

Answer 6

• totipotent: kan differentieren tot alle embryonische en extra-embryonische celtype
• pluripotent: kan differentieren tot alle embryonische celtypen, maar niet extra-embryonische celtypen
• multipotent: kan differentieren tot alle cellen binnen hun kiemblad, dus bijv. het ectoderm, mesoderm of endoderm
• oligopotent: kan differentieren tot een aantal celtypes
• bipotent: kan differentieren tot 2 celtypes
• Unipotent: kan nog maar differentieren naar 1 celtype, bijvoorbeeld de satelliet in de skeletspier

Question 7

genome editing

Answer 7

• het aanbrengen van wijzingen in het DNA/genoom van een organisme

Question 8

NHEJ (non-homologous end joining)

Answer 8

Een mechanisme dat betrokken is bij het herstellen van DNA-dubbelstrengsbreuken waarbij de uiteinde van de gebroken DNA strengen direct weer aan elkaar worden gelijmd, zonder dat door een homoloog sjabloon voor nodig is

Question 9

Welke soort NHEJ (non-homologous end joining) bestaan er

Answer 9

• Gene knockout: Hierbij wordt het gen herkend als niet goed, en worden er
  of nucleotiden ingebouwd, of eruit verwijderd, zodat het gen niet meer werkzaam is.
• Gene insertion: Je zou ook donor DNA in die breuk kunnen inbouwen,
  hoewel een beetje op een slordige manier.

Question 10

Wat is HR (homologe recombinatie)

Answer 10

het DNA dat wordt aangeboden is homoloog aan beide kanten van de breuk

Question 11

Welke soort HR (homologe recombinatie) bestaan er

Answer 11

• een veranderd stukje DNA wordt ingebouwd (gen modificatie)
• een nieuw gen wordt ingebouwd (geninsertie)

Question 12

Bronnen van cardiomyocyten

Answer 12

• abortusmateriaal
• transplantatie
• post-mortem materiaal
• cellen uit de patient: embryonale, somatische, cardiac, non-cardiac

Question 13

Meganucleases

Answer 13

Deze herkent grote delen DNA (dat moet ook, want als de sequentie te kort
is gaat hij overal knippen).
▪ Als hij de plek herkend heeft, kun je NHEJ of HR doen.
▪ Dit is wel vrij lastig, vandaar dat het door is ontwikkeld naar andere
technologieën.

Question 14

ZFN (zinc finger nucleases)

Answer 14

▪ Dit zijn eiwitten waarbij elke vinger 3 nucleotiden herkent.
▪ Als je dan een eiwit hebt met 3 (of 4) vingers, kun je 2x een enkelstrengs breuk maken, en heb je daarmee ook een dubbelstrengs breuk gemaakt.
▪ Ze zijn echter niet helemaal specifiek

Question 15

TALEN

Answer 15

• Elke vinger herkent hierbij 1 nucleotide, maar deze is dus wel heel specifiek

Question 16

CRISPR/Cas9

Answer 16

• Het nadeel van de andere systemen is dat je voor elke knipplek een nieuw eiwit moet bouwen.
• Bij CRISPR/Cas9 hoeft dat niet, want het enzym Cas9 wordt niet naar de juiste plek gestuurd door de DNA sequentie, maar door de single guide RNA.
• Deze technologie is dus veel sneller, en je kunt hiermee dubbelstrengs breuken maken, enkelstrengs breuken maken, genen activeren of
  inactiveren, van alles dus