Cours protéine FINAL Flashcards

Question

La plupart des cellules sur lame lors d'une immunofluorescence indirecte sont dans quelle phase du cycle cellulaire?

Answer 1

**Interphase** * Entre la naissance d'une cellule et le moment où elle se divise à nouveau * Comprend les phases G1, S puis G2 * Phases G : croissance * Phase S : synthèse d'ADN

Answer 2

**_Mitose_** : * **Prophase** * condensation de la chromatine, membrane nucléaire disparait * **Métaphase** * chromosomes alignés au centre de la cellule * **Anaphase** * Chromatides se séparent, tirés vers les pôles * **Télophase** * Les chromosomes atteignent les pôles, la cellule n'est pas divisée, membrane nucléaire réapparait

Answer 3

**Métaphase** (chromosomes alignés au centre de la cellule)

Answer 4

Antigènes dépendants du cycle cellulaire

Answer 5

**Anti-centromère** * Cellules au repos ont des "grains discrets" * Cellules en cours de division ont une fluorescence zipper * Anti-CENP (A/B)

Answer 6

**Nucléolaire** * Régions nucléolaires colorées sur les noyaux des cellules au repos * Anti-fibrillarine * Anti-Th/To * Anti-POL 1, POL 3

Answer 7

**Anti-points nucléaires** * Moins de grains que le profil Ab anti-centromérique * Pas de "zipper" dans les cellules en division * Anti-PML * Anti-Sp100

Answer 8

**Homogène** * Fluorescence uniforme * Fluorescence de la chromatine en division = uniforme et dense * Anti-ADN * Anti-Histone

Answer 9

**Anti-membrane périphérique** * Fluorescence distincte du bord, au point où 2 noyaux se touchent * Anti-gp210 * Anti-Lamin

Answer 10

**Moucheté granulaire** * Noyau des cellules au repos ont une fluorescence mouchetée * Ab anti-Ag nucléaire soluble * Cellules en division n'ont PAS de fluorescence intense * U1-RNP/Sm

Answer 11

* Anti-Jo1 * Anti-SRP * Anti-mitochondrie * Anti-muscle lisse * Anti-Golgi * Anti-Ribosome P

Answer 12

Comparer l'intensité de fluorescence de l'échantillon à un contrôle pour typer * Le nombre de dilution de l'échantillon que ça prend pour avoir une intensité semblable au CQ

Answer 13

**VRAI** Si on observe substantiellement plus de (+) dans l'étude normale, le CQ doit être plus brillant (ajustement du seuil)

Answer 14

La concentration de l'auto-Ab est mesurée semi-quantitativement en tant que titre * Analyse de dilutions du sérum patient * Plus l'éch est dilué, plus l'intensité de fluorescence diminue * Le titre correspond à la plus forte dilution de sérum qui produit une intensité \> ou = au CQ

Answer 15

* Connaitre les entités cellulaires * Connaitre le rôle/fonction des éléments cellulaires * Connaitre les phases du cycle cellulaire, ainsi que leur représentation au microscope

Answer 16

1. Évaluation du profil 1. Patron 2. Intensité de fluorescence 2. Comparaison avec un profil contrôle sur la lame 3. Tests réflexes selon des algorithmes (en fonction de la pertinence clinique)

Answer 17

ENA : Extractable nuclear antigen (Ag que l'on peut extraire du noyau)

Answer 18

Méthode utilisée pour mettre en évidence la présence de certains auto-Ab qui auraient donné un résultat (+) à partir de la méthode IIF

Answer 19

* Anti-RNP (nucléolaire/moucheté) * Anti-SSA/Ro (moucheté) * Anti-SSB/La (moucheté) * Anti-JO-1 (histidyl-ARNt synthetase) (cytoplasmique) * Anti-SCL 70 (topoisomérase I) (nucléolaire) * Anti-CENP-B (centromères) * Anti-SM (moucheté?)

Answer 20

**FAUX** Qualitatif (semi-quantitatif) * Résultats rapportés en fonction des seuils : * Positif * Négatif * Équivoque (intermédiaire) * Si résultat positif : * Effectuer dosage quantitatif spécifique des 7 auto Ab "anti-ENA"

Answer 21

Technologie de détection de plusieurs auto-Ab en même temps * Méthode quantitative à partir de microbilles magnétiques * Méthode combinée d'ELISA et de cytométrie de flux * Billes ont une empreinte spécifique * Différentes proportions de teintures fluorescentes (coloration unique) * Ab de capture lié à la bille spécifique à un auto-Ab

Answer 22

* Maladies inflammatoires "systémiques" auto-immunes non spécifiques d'organes * Atteinte de tissus conjonctif (riches en collagène) * Atteintes multi-systémiques * Présence d'auto-Ab caractéristiques * Prédominance chez les femmes

Answer 23

**FAUX** Chevauchement de manifestations cliniques entre diverses collagénoses

Answer 24

* Fièvre et fatigue persistantes * Myalgie (Dlr muscu) * Arthralgie ou arthrite * Éruptions cutanées * Perte de poids * Anémie hémolytique ou leucopénie * Photosensibilité (UV) * Protéinurie * Phénomène de Raynaud * Sx neurologiques (convulsions, dépression, psychose)

Answer 25

* Lupus érythémateux disséminé * Syndrome de Sjögren * Sclérodermie * Dermatomyosite/polymyosite * Connectivite mixte * Collagénose indifférenciée * Polyarthrite rhumatoïde

Answer 26

* Maladie chronique auto-immune caractérisée par une inflammation d’une ou de plusieurs parties du corps * Peut toucher : articulations, peau/muqueuses, muscles, sang, poumons, cœur, reins, cerveau, GI

Answer 27

**VRAI** * 9 femmes : 1 homme * Plus de gènes de susceptibilité

Answer 28

* Éthique * Génétique * stress * photosensibilité * Hormones * Certains Rx * infections \*Un peu comme les crises de porphyries

Answer 29

* Lupus érythémateux disséminé (LED) * Lupus érythémateux cutané chronique * Lupus érythémateux cutané subaigu * Lupus médicamenteux

Answer 30

* Peut affecter la peau, les articulations, les reins, le cerveau et d'autres organes * Forme la plus courante

Answer 31

* Éruption cutanée avec inflammation * Cicatrisation * **A/n du visage, oreilles et cuir chevenu** * Parfois sur d'autres régions du corps

Answer 32

* Lésions en réponse à l'exposition aux UV * Retrouvé principalement : * autour du **cou** * dos * **partie antérieure du tronc** * parties extérieures des bras

Answer 33

* Semblable au LED (lupus érythémateux disséminé) * Causé suite à la prise de certains Rx * **Sx se résorbent à l'arrêt des Rx** (quelques jours à quelques mois)

Answer 34

_Doit inclure (tous)_ : * Positivité ANA \> ou = à 1/80 * Au moins 1 critère clinique * Au moins 1 critère immunologique * Avoir un total d'au moins 10 points

Answer 35

**_Critères cliniques :_** * Fièvre * Leucopénie * Thrombocytopénie * Épillepsie * **Néphrite lupique (biopsie rénale)** * Psychose * Péricardite aiguë * Lupus cutané aigu **_Critères immunologiques :_** * Complément : * C3 ET C4 bas * C3 OU C4 bas * Ab anti-ADNdb * Ab anti-Smith

Answer 36

* FSC * Anémie hémolytique * Leucopénie * Thrombopénie * Auto-Ab ↑ * **ANA** * **Anti-ADNdb** * **Anti-Sm (Smith)** * Anti-RNP * **Anti-Histone** * Anti-SS-A/SS-B * CRP ↑ * **Protéinurie ↑** * Si atteinte hépatique : AST, ALT, CK ↑ * **Complément (C3 et C4) ↓** * **Biopsie (rein, peau)**

Answer 37

Lupus : Souvent difficile à Dx (S/Sx communs) * Manifestations fréquentes : * Articulaires * Cutanées/muqueuses * Cardiopulmonaires * Rénales * Hématologiques

Answer 38

Maladie auto-immune chronique et d'étiologie inconnue

Answer 39

* Arthrite * Sécheresse des muqueuses * Xérostomie (sécheresse de la bouche) * Xérophtalmie (sécheresse des yeux)

Answer 40

**_Syndrome de Sjögren primaire_** * Apparait de manière isolée **_Syndrome de Sjögren secondaire_** * Associé à une autre maladie auto-immune * Lupus * Hépatite auto-immune * Polymyosite * Sclérodermie * Polyarthrite rhumatoïde

Answer 41

* Étiologie inconnue * Étiologie probable : * Prédisposition génétique * Arrivée de facteurs déclencheurs * Infection virale * Changement hormonaux * Stress * Être une femme (entre 9 et 20 femmes pour 1 homme) * Entre 40 et 50 ans * WBS peuvent infiltrer et endommager les glandes sécrétoires * Glandes salivaires, lacrimales, ect

Answer 42

* Repose sur des critères spécifiques correspondant à l'atteinte : * Sécheresse : Bouche, yeux, et parfois muqueuses (nez, gorge, trachée, larynx, vagin, vulve) * Labo : * ANA (+) * Auto-Ab (+) : * Ab anti-SSA/Ro * Ab anti-SSB/La * Facteur rhumatoïde * Parfois biopsie

Answer 43

Maladie auto-immune rare qui affecte les tissus conjonctifs et provoque plusieurs atteintes localisées ou systémiques (limitée ou diffuse) * Durcissement des fibres de collagènes du derme * Réduit la souplesse et la mobilité de la peau * Fibrose et épaississement de plusieurs autres organes

Answer 44

* Lésions cutanées sclérotiques * Épaississement de la peau * Sclérodactilie (repliement des articulations) * Rigidité de la bouche * Perte de pulpe des doigts * Atteinte pulmonaire, cardiaque, rénale, GI * DANGER : MORT

Answer 45

**Causes inconnues** * Sclérodermie 4x plus fréquente chez femme que l'homme * Plus fréquente entre 20 et 50 ans * Peut survenir à tout âge * Peut se développer dans le cadre d'une connectivité mixte * Plusieurs conditions mélangées * Possiblement lié à des infections virales, des stress environnementaux (mais on ne sait pas trop)

Answer 46

* Sclérodermie localisée (ScL) * Morphée * Sclérodermie systémique (ScS) * Limitée * Diffuse

Answer 47

**_Sclérodermie localisée_** * Présence de taches d'aspect cireux de différentes tailles, formes et couleur sur la peau * Épaississement de la peau * Plusieurs types de "morphée"

Answer 48

**_Sclérodermie limitée_** * Épaississement de la peau moins répendu et plus lent * Syndrome de CREST **_Sclérodermie diffuse_** * Épaississement de la peau plus rapide * Touche plus de zones du corps que la forme systémique limitée * Risque ↑ de développer une sclérose a/n du GI * La pire...

Answer 49

**_CREST_** : * **C** : Calcinose * Dépôt de Ca dans la peau * **R** : Raynaud * Trouble de la circulation sanguine * Blanchiement des doigts * **E** : Oesopgase * Reflux gastriques * Motilité GI ↓ * **S** : Sclérodactylie * Épaississement et raidissement de la peau des doigts et des orteils * **T** : Télangiectasie * Petits capillaires dilatés visibles sur le visage et les mains

Answer 50

**Critères Dx établis par un score** * Score d'au moins 9 = Dx sclérodermie

Answer 51

* Sclérodactylie sur les 2 mains (Dx direct, 9 points) * Phénomène de Raynaud * Télangiectasie * Auto-Ab SSc-related : * Anti-centromère * Anti-topoisomérase I * Anti-ARN polymérase III

Answer 52

Les auto-Ab anti-centromère sont plus souvent associés à la sclérodermie **_systémique limitée_** tandis que les auto-Ab anti-topoisomérase I (Scl-70) et anti-ARN polymérase III sont plus souvent associés à la sclérodermie **_systémique diffuse_**

Answer 53

* Dosage des ANA * Dosage des ENA si ANA (+) * Dosage des auto-Ab spécifiques si ENA (+) * Anti-Scl-70 * Anti-PM-Scl * Anti-RNP * Anti-Fibrillarine * Anti-CENP B

Answer 54

**FAUX** 20-40%, pas tous les cas de sclérodermie qui ont des ANA(+)

Answer 55

**FAUX** * Chevauchement des ANA avec d'autres maladies * Important d'avoir des S/Sx marquants (spécifiques : CREST)

Answer 56

* Maladie inflammatoire qui peut affecter de nombreuses articulations * Maladie auto-immune systémique qui attaque la membrane qui recouvre les articulations

Answer 57

* Cause inconnue * Facteurs de risque : * Prédisposition génétique (CMH classe II) * Facteurs environnementaux inconnus et non confirmés (infection, tabac) * 4x + fréquent chez la femme que chez l'homme

Answer 58

* Critère cliniques excluant toutes les autres pathologies pouvant provoquer des dlr articulaires * Au moins une articulation qui présente une synovite * Inflammation de l'enveloppe de l'articulation * ANA (+) : * Anti-histone * U1-nRNP * Dosage sérique ↑ * CRP * Facteur rhumatoïde * Anti-CCP (Ab antipeptide anticyclique citrulliné) * Rayons X

Answer 59

* Épaule * Coude * Poignet * NEGATIF pour la Hanche * Jointures principales de tous les orteils (vs gros orteil pour arthrose)

Answer 60

**VRAI** (85-95%)

Answer 61

Réaction d'auto-immunité dirigée contre le tissu musculaire chez des individus génétiquement prédisposés

Answer 62

Groupes basés sur l'histopathologie et la présentation clinique : 1. Polymyosite 2. Dermatomyosite 3. Myopathie nécrosante à médiation immunitaire 4. Myosite à corps d'inclusion (IBM)

Answer 63

Maladie chronique qui se développe le plus souvent lentement sur plusieurs semaines ou mois * Parfois plus rapide * Évolue par poussées * 2x plus fréquent chez F que H * Survient à tout âge, mais surtout * 5-14 ans : Dermatomyosite juvénile * 50-60 ans * Prévalence : 1 / 15000

Answer 64

* **Dermatomyosite** : Peau et muscles * **Polymyosite** : Muscles seulement \*\*Les mécanismes immunitaires et le foyer anatomique des lésions dans le tissu musculaire semblent être distincts entre la DM et la PM

Answer 65

Les caractéristiques cliniques et sérologiques de la dermatomyosite et de la polymyosite varient selon les individus et les populations affectées en fonction des caractéristiques **_immunogénétiques_** et des délencheurs **_environnementaux_** potentiels

Answer 66

**_Caractéristiques_** : * Inflammation de certaines zones de la peau * Inflammation de certains muscles (myosite/myopathie des muscles proximaux) **_Manifestations cliniques :_** * Éruption et rougeurs cutanées * Faiblesse et douleur dans les muscles (multisystémique) * Hanche, cuisses, bras et épaules

Answer 67

* Évaluation de l'historique et de l,examen physique * Caractériser la faiblesse musculaire * Évaluer sévérité, degré de symétrie de l'atteinte relative proximale et distale * Examen de la peau (visuel et biopsie) * Biopsie musculaire * Manifestations systémiques vs localisées de la maladie * Électromyographie et IRM

Answer 68

* Patient atteint de diabète * Patient avec polymyosite * Lupus érythémateux disséminé (atteintes cutanées) * Autres maladies rhumatismales systémiques * Patients avec maladies neuromusculaire et auters myopathies (Ex : origine médicamenteuse)

Answer 69

* Dosage d'enzymes musculaires (CK, aldolase) * Tests de laboratoire généraux * LDH, AST, ALT * FSC * Auto-Ab : * Anti-JO-1 (20-25%) * Anti-Mi-2 (10-60% adulte, 4-10% enfants) * Anti-SAE * Anti-NXP-2 (1-17%) * Anti-MDA 5 (10-48% asiatique) * Anti-TIF 1-gamma

Answer 70

**_Dermatomyosite_** : * Anti-Mi-2 * Anti-SAE * Anti-NXP-2 * Anti-MDA 5 * Anti-TIF1-gamma **_Polymyosite :_** * Anti-SRP * Anti-Jo-1 **_"Overlap" de DM/PM :_** * anti-PM-Scl75 * Anti-PM-Scl100 * Anti-Ku

Answer 71

Inflammation des vaisseaux sanguins qui s'accompagne souvent d'**inflammation, d'ischémie et de nécrose des organes** * **Tous les vaisseaux sanguins peuvent être touchées** par la vasculite * Considérées comme des maladies systémiques (peuvent toucher plusieurs organes (reins. poumons, coeur, nez/sinus, peau, articulations, muscles, intestins, SCN, yeux

Answer 72

**Manifestations cliniques et troubles spécifiques varient selon la taille et l'emplacement des vaisseaux** * **Degré d'implication des organes** * **Degré et motif d'inflammation** **Manifestations initiales sont souvent peu spécifiques**

Answer 73

**Vasculite = trouble auto-immun** * Causes primaires : * Sans cause connue * Causes secondaires : Peuvent être causées par plusieurs évènements * Rx * Infection * Toxiques * Maladie systémique (Ex : autre trouble immun) * Paranéoplasiques

Answer 74

En fonction de la taille et de l'emplacement des vaisseaux! * Vasculite des petits vaisseaux * associés aux complexes immuns * Associés aux ANCA * Vasculite des moyens vaisseaux * Vasculite des grands vaisseaux

Answer 75

Vasculites à grands vaisseaux : * Artérite gigantocellulaire (GCA) * Artérite de Takayasu **_Caractéristiques_** * ***Touchent aorte et ses branches principales*** * ***Souvent \> 50 ans***

Answer 76

**_Vasculite à moyen vaisseaux :_** * Polyarthrite noueuse (artérite nécrosante) * Maladie de Kawasaki (enfants) **_Caractéristiques_** : * ***Artérite touchant les vaisseaux de moyen et de petit calibres***

Answer 77

**_Vasculite à petits vaisseaux :_** 1. **Liés aux ANCA** (40-60 ans, pas de complexes immuns) * Polyangéite microscopique * Granulomatose avec polyangéite * Granulomatose éosinophilique avec polyangéite 2. **Liés aux dépôts de complexes immuns** (*Dépôts d'Ig et/ou de complément ds paroi des vaisseaux de petit calibre. Glomérulonéphrites fréquentes)* * Maladie des anticorps antimembrane basale glomérulaire (GBM) * Vasculite cryoglobulinémique * Vasculite à IgA * Vasculite urticarienne hypocomplémentémique

Answer 78

* FSC * VS des RBC * CRP * ANCA (Ab anti-cytoplasme des neutrophiles) * Quantitatif (ELISA/FEIA) : * Anti-MPO (ou P-ANCA) * Anti-RP3 (ou C-ANCA) * Anti-GBM * Qualitatif (IIF) : * **Anti-MPO** * **Anti-PR3** * **Anti-GBM**

Answer 79

Cytoplasmique moucheté

Answer 80

Nucléaire moucheté à gros grains

Answer 81

Nucléaire finement moucheté Idem pour Anto-SSB/La et Anti-Mi2

Answer 82

Nucléolaire homogène

Answer 83

Nucléaire centromère (zipper)

Answer 84

* Suite à exposition à un Ag, les cellules B matures deviennent activées * Les cellules B activées se différencient en plasmablaste * Sécrétion d'IgM * Les plasmablastes peuvent se différencier davantage en plasmocyte * Commutation de classe IgM -\> IgG/A/E * Commutation de classe via cellules T helper

Answer 85

**FAUX** Toute la différenciation à lieu dans la moelle osseuse (jusqu'à l'activation par un Ag) La cellule B mature se différencie en plasmablaste et plasmocyte dans les organes lymphoïdes périphériques

Answer 86

**_Syndrome myélodysplasique_** : * Maladies caractérisées par la production INSUFFISANTE de cellules sanguins par la moelle osseuse * Accumulation de cellules immatures (blastes) * Dysplasie des progéniteurs hématopoïétiques de 1-2 ou 3 lignées cellulaires (WRB, RBC, plaquettes) **_Syndrome myéloprolifératif_** : * Production anormale de cellules * Maladie des cellules myéloïdes

Answer 87

Dans le sans ou les organes lymphoïdes

Answer 88

**FAUX** Certains Ag de surface sont présents uniquement sur certains sous-groupes * Ex : * CD34 : Cellule souche * CD20 : À partir du stade pré-B

Answer 89

**FAUX** Processus indépendant des Thelper. Par contre, la différenciation des cellules B en plasmocytes sécréteurs de IgE, IgA ou IgG est dépendant des cellules T helper

Answer 90

**_CD38_** : * Progéniteur précoce de cellule B * Cellule pro-B * Cellule pro-B tardive * Cellule pré-B (chaine µ à la surface seulement, pas d'IgM) **_CD20_** : * Cellule pré-B (chaine µ à la surface seulement, pas d'IgM) * Cellule B immature (IgM de surface) * Cellule B mature (IgM et IgD de surface) \*\*CD19 : tous les stades de différenciation

Answer 91

**_Rituximab_ :** Induit l'apoptose * Cible toutes les cellules avec des IgM membranaires (cellules qui expriment CD20) * Épargne les plasmocytes

Answer 92

* Rate * Ganglions lymphatiques * Tissus lymphoïdes associés aux muqueuses

Answer 93

La bêta-2 microglobuline est un marqueur de **_prolifération cellulaire_** * Marqueur de stratification du myélome * Marqueur de 1ere intention pour * Gammapathies monoclonales * Lymphopathies malignes * surveillance de certaines infections

Answer 94

11,8 kDa non glycosylé

Answer 95

**FAUX** Présente à la surface de toutes les cellules nucléées du sang. En association non-covalente avec les Ag du CMH1

Answer 96

* Élévation lors de la stimulation immunitaire * Inflammation * Indicateur de tumeur * Critère de classification du myélome * Marqueur Px de survie dans la leucémie lymphoïde chronique * Suivi de l'efficacité de dialyse * Élévation en insuffisance rénale * Indicateur de rejet de greffon * Augmentation consécutive à activation lymphocytaire * Investigation de la fonction tubulaire * Librement filtrée et réabsorbée

Answer 97

**_Sang_** : * instable * 4°C max 7 jours * Dénaturation = fausse élévation **_Urine_** : * Instable à pH acide * Neutraliser rapidement * Congeler rapidement

Answer 98

* Défaut de la fonction des lymphocytes B * Défauts du développement ou de la fonction des lymphocytes T * Défauts héréditaires de composantes du système du complément * Défauts des cellules phagocytaires * Déficience de l'adhésion leucocytaire

Answer 99

Réponse immunitaire déficience pour la production d'anticorps (hypogammaglobulinémie) causée par : * Cause intrinsèque aux lymphocytes B * Cause secondaire aux processus de signalisation inefficaces des lymphocytes T aux lymphocytes B _Conséquence_ : * Infections récurrentes (principalement voies respiratoires supérieures et inférieures)

Answer 100

* A-gammaglobulinémie congénitale * A-gammaglobulinémie liée au chromosome X (XLA) * Défaut de différenciation terminale des lymphocytes B * Déficience sélective * Immunodéficience variable commune (CVID) * Défaut de commutation de classe

Answer 101

* Hypogammaglobulinémie * Tous les isotypes d'Ig \< 1 g/L * Lymphocytes B circulants absents ou peu présents * Absence d'amygdale * Ganglions inhabituellement petits

Answer 102

_S/Sx_ : * Hypogammaglobulinémie progressive s'exprimant dans la 2e ou 3e décade de vie (20-30 ans) * Absence ou peu de plasmocytes dans la moelle osseuse ou les tissus lymphoïdes * Infections récurrentes * Sujet aux manifestations auto-immunitaires et certains lymphomes

Answer 103

_S/Sx_ : * **Généralement Asx** * Infections pulmonaires récurrentes * Malabsorption * Susceptibilité aux rxn transfusionnelles _Labo_ : * IgA \< 1 g/L * EPS : modification de la bande bêta (transferrine seule avec complément, atteignent ligne de base)

Answer 104

**Syndrome d'hyper-IgM** * Production de plasmoblastes OK, mais incapable de produire des plasmocytes * Déficience sévère en IgG, IgA et IgE * Concentration sérique d'IgM souvent augmentée * Hyperviscosité?

Answer 105

* Défaut de synthèse de globulines : * Atteintes leucocytaires (lymphome, leucémie, MM, néoplasie lymphoïde) * **NN prématuré**, délai d'initiation de synthèse * malnutrition * Tx immunosuppresseur * Insuffisance rénale, diabète * Pertes excessives * **Syndrome néphrotique** * Pertes exsudatives (grands brûlés) * Entéropathies

Answer 106

* Albumine ↓ * Gamma-globilines ↓ * Alpha-2 macroglobuline ↑ * Protéines totales ↓

Answer 107

* Isoler l'individu de tout agent microbien * Remplacer l'élément en défaut * Transplantation cellule souche * Thérapie génique * Administration d'Ig IV ou sous-cutané (maintien à \> 5 g/L idéalement)

Answer 108

* Réponse systémique : **IgG** * Infections parasitaires : **IgE et IgM** * Infection congénitales : **IgM** * Infections sanguines et virales primaires : **IgM** * Sécrétions (peau, muqueuses, GI, poumon, rein) : **IgA** * Réponse allergique : **IgE** * Auto-immunité : **IgG**

Answer 109

Des types d'Ig prédominent dans différentes conditions : * IgG : Hépatocytes (hépatite active chronique) * IgM : Cirrhose biliaire primaire * IgA : Cirrhose alcoolique * Pan-hyper-Ig (Hyper GAM) : Insuffisance hépatique

Answer 110

* Cirrhose alcoolique * Pathologie digestive * Pathologie pulmonaire \*\*IgA = Muqueuses

Answer 111

* Maladie hépatique * Désordre auto-immun * Infection chronique * Désordre hématologique * Malinicité non hématologique

Answer 112

**_Cirrhose_** : * Hypergamma * **Pont bêta-gamma** * **hypoAlb** * Rapport Alb/gamma \< 1 **_Insuffisance hépatique_** : * Hypergamma * **Hyper IgA polyclonale** * **HypoAlb** * Concomitance avec **baisse alpha 2 et bêta** *

Answer 113

**_Systémique_** : * Bandes oligoclonales présentes dans LCR ET sérum * Ex : * Atteintes neurologiques périphériques (polynévrite) * Syndrome infectieux (CMV, HIV, syphillis) * Recouvrement immunitaire post-suppression du système immunitaire **_SNC_** : * Présence de bandes oligoclonales SEULEMENT dans le LCR * Ex : * Sclérose en plaques (\> 95% des cas) * Maladie inflammatoire et infectieuse chronique * Syndrome Guillain-Barré * Pan-encéphalite sclérosante subaiguë

Answer 114

Focalisation isoélectrique avec du LCR * Toujours faire migrer un sérum en parallèle * Si \> 2 bandes oligoclonales dans le LCR : Dx de gammapathie oligoclonale du SNC

Answer 115

**FAUX** On intègre seulement le pic qui dépasse

Answer 116

**FAUX** SEULEMENT quantification par électrophorèse des protéines sériques

Answer 117

* Immunofixation pour le typage du pic * Dosage des GAM * Dosage sérique des chaines légères libres * Investivation d'une gammapathie à CLL * Stratification du risque de transformation * Investigation des atteintes organiques * Dosage sérique IgD et IgE totaux (si requis) * Électrophorèse des protéines urinaires (si requis) * Important si amyloïdose (gammapathie à CLL)

Answer 118

**FAUX** JAMAIS!!! Toujouts suivre par électrophorèse des protéines sériques

Answer 119

* Taux de plasmocytes dans la moelle osseuse \> 10% **ET** * Au moins 1 Sx du CRAB * C : Calcium * **HyperCa \> 2,5 mmol/L** * R : Rein (insuffisance rénale * **Créat \> 177 µmol/L** * Clairance créat \< 40 mL/min * A : Anémie * **Hb \< 100 g/L** * **↓ de + de 20 g/L p/r à VR du patient** * B : Bone (Maladie osseuse) * 1 lésion ostéolytique ou + (détection par radiographie, scan pancorporel ou PET/Scan) **OU** * Au moins 1 des biomarqueurs suivants : * Taux de plasmocytes dans la moelle \> 60% * Indice CLL \> 100 * \> 1 lésion focale à l'IRM

Answer 120

* MGUS : Gammapathie monoclonale de signification indéterminée * Myélome indolent (SMM) * Myélome précoce * Myélome

Answer 121

**_MGUS_** : * Paraprotéine \< 30 g/L * Pas de Sx CRAB * Plasmocytes dans moelle osseuse \< 10% * Pas de lésions ostéolytiques * Indice kappa/lambda libre \< 100

Answer 122

**_Myélome indolent :_** * Paraprotéine peut être \> 30 g/L et/ou * Plasmocytose moelle entre 10-60% * Pas de CRAB (ou CLL et lésion focale)

Answer 123

**_Myélome précoce :_** Basé sur 3 évènements définissant le myélome SANS CRAB * Plasmocytose moelle entre \> 60% * \> 1 lésion focale en RMN * Indice Kappa/Lambda libre \> 100 * Pas de CRAB

Answer 124

**_Myélome_** : * Présence de la paraprotéine \> 30 g/L * Un ou plusieurs Sx CRAB et/ou indicateurs de dommages organiques liés * CLL \> 100 * \> 1 lésion focale à l'IRM * \> 60% plasmocytes dans moelle

Answer 125

**FAUX** Exclu les plasmocytes

Answer 126

**FAUX** Le MGUS est bénin, non malin

Answer 127

* FSC * Calcémie * Créatinémie * EPS + IFix * GAM * CLL * Albumine + bêta 2 microglobuline * LDH * Electrophorèse et IFix urinaire (si indiqué)

Answer 128

**_Suivi d'un MGUS_** : * Concentration de la paraprotéine * Stabilité de la concentration dans le temps * Suivi des signes manifestes de MM

Answer 129

\> 15 g/L Mesure de la plasmocytose (% plasmocytes dans la moelle)

Answer 130

**MGRS** : Gammapathie monoclonale de signification rénale * Entité de MGUS dans laquelle la protéine monoclonale affecte le rein résultant en un dommage permanent * N'est PAS un lymphome ou un myélome * EXCLUT la néphropathie des cylindres myélomateux ***\*Algorithmes existent pour rechercher/exclure un MGRS en cas d'IRA inexpliquée***

Answer 131

1. Isotype de la paraprotéine 2. Concentration du pic à EPS 3. Présence/Absence de CLL ***Stratification de risque passe de 20%/20 ans à 5%/20 ans si*** * ***IgG \< 15 g/L avec CLL normales***

Answer 132

* **Aucun** : 5% chance progression / 20 ans * **1 facteur** : 20% chance progression / 20 ans * **2 facteurs** : 35% chance progression / 20 ans * **3 facteurs** : 60% chance progression / 20 ans

Answer 133

**FAUX** Interaction entre plusieurs composantes génétiques et environnementales. Quelques facteurs de risque sans plus.

Answer 134

* Les différentes phases de la maladie (MGUS → SMM → MM) sont caractérisés par des "hits" génétiques, qui confèrent un avantage de survie et sont acquis au fil du temps * A chaque phase de la maladie, les clones précurseurs ne sont présents qu'à un faible niveau car ils ont été surclassés par des clones plus avantageux * L'isotype reste le même, mais le clone diffère légèrement et protéine monoclonale peut différer légèrement * Migration de la protéine monoclonale peut être modifiée légèrement * Possibilité que les CLL varient en intensité * Ne pas oublier qu'il y a de l'hétérogénéité tumorale intra-clonale * Les traitements favorisent la sélection d'un clone

Answer 135

* MGUS * Myélome indolent (SRR) à bas risque * Myélome indolent (SRR) à haut risque * Myélome précoce (très haut risque) _Stratification entre risque faible, élevé et très élevé (article) :_ * \> 20 g/L * \> 20% plasmocytes moelle * ratio CLL \> 20 Low = 1 critère, high = 2 critères, very high = 3 critères **Trés haut risque** = \> 60% plasmocytes + CLL \> 100 + \> 1 lésion focale

Answer 136

* Translocation de gènes * Lambda (chromo 22) + fréquent que kappa (chromo 2) * Délétion de gènes * Aneuploïdie (monosomie, trisomie) * Trisomie = 55% des myélomes

Answer 137

**_Stade 1_** : * B2-microglobuline \< 3,5 mg/L * Alb \> 35 g/L **_Stade 2_** : * B2-microglobuline \< 3,5 mg/L * Alb **\<** 35 g/L OU * B2-microglobuline 3,5 - 5,5 mg/L **_Stade 3_** : * B2-microglobuline \> 5,5 mg/L

Answer 138

**_Système de stratification de risque révisé «R-ISS» :_** **Système combinant ISS & Cytogénétique & LDH** * Utilisé en combinaison avec le système de stratification internationnal (albumine et B2-microglobuline) * **_Stade 1_** (80% survie 5 ans) : * Stade 1 ISS * Sans aberration chromosomique à haut risque * LDH normale * **_Stade 2_** (60% survie 5 ans) : * Ni stade 1 ou 3 de ISS * **_Stade 3_** (40% survie 5 ans) : * ISS stade 3 * Plus de 1 aberration chromosomique à haut risque **_OU_** LDH ↑

Answer 139

Visualisé au FISH : * Del 17p * t(14;16) * t(14;20) * t(4;14)

Answer 140

* Lésions osseuses ostéolytiques (ALP normale) * Réduction des cellules souches normales de la moelle * Anémie * Thrombocytopénie * Leucopénie * Réduction de la prolifération des plasmocytes normaux * ↓ synthèse Ig normales * Infections récurrentes * Hémorragies * Perte de poids * Insuffisance rénale

Answer 141

* Généralement dû à la présence en excès de CLL avec infiltration a/n des tubules proximaux et distaux * Glomérules généralement épargnés * Formation de cylindres myélomateus avec agrégation de CLL -\> Obstruction tubulaire * ↑ pression intraluminale -\> atteinte glomérulaire -\> ↓ DFG

Answer 142

**FAUX** Les lambda sont + dommageables que les kappa

Answer 143

* Âge du patien * Statut de performance des approches thérapeutiques * Moins sur les caractéristiques individuelles de la maladie

Answer 144

Chimiothérapie à haute dose * **HDMelphalan**

Answer 145

* Suivi de la ↓ de la [] de la protéine monoclonale * EPS * IFix Sérique lorsque paraprotéine n'est plus visible en EPS * Chaines légères libres (si associé au pic monoclonal) * Taux de plasmocytes dans la moelle * Ponctions lombaires dans le temps

Answer 146

* Réponse complète ferme (sCR) * Tout critère négatif incluant CLL neg * Absence de plasmocytes * Réponse complète (CR) * EPS et IFix S neg * \< 5% plasmocytes * Très bonne réponse partielle (VGPR) * Réduction \> 90% * Réponse partielle (PR) * Réduction \> 50%

Answer 147

**_Daratumumad_** : IgG kappa * Pic monoclonal visible en EPS et en IFix * Interfère en cas de réponse complète * À différentier du pic monoclonal * Imminuessais : * CLL : NON * HevyLyte : Impact léger (surestimation faible)

Answer 148

* **Leucémie lymphoïde chronique** * Cellules B à mémoire * En périphérie * **Leucémie lymphoblastique aiguë** * Précurseur lymphoïde * Sang et moelle osseuse * **Leucémie à cellules pré-B** * Cellules pré-B * En périphérie

Answer 149

***Tous les lymphomes se développent en périphérie*** * **Lymphome du manteau** * Cellule B naïve * **Lymphome diffus à grandes cellules** * Cellule B mature * **Lymphome de Burkitt** * Cellule B mature * **Lymphome de Hodgkin** * Cellule B germinale

Answer 150

Macroglobulinémie de Waldenström

Answer 151

**VRAI** Les lymphocytes B différenciés sont circulants

Answer 152

* Viscosité sérique augmentée : Agrégation des RBC via IgM cause * **Saignements excessifs** * **Hémorragies rétiniennes** * Cryoglobulinémie : Diminution de la perfusion des vaisseaux cause * **Phénomène de Raynaud** * **Nécrose des extrémités** * **Anémie hémolytique** * Neuropathie (5-40%) * Affecte autant les **fonctions motrice** que **sensitives** * Composante auto-immune : Opsonisation complément * **Hémolyse RBC** * Déposition tissulaire d'IgM * **Diarrhée** * **Malabsorption** * **Saignements** * **Grossissement des ganglions lymphatiques** * **Renflement de la rate (splénomégalie)**

Answer 153

**Rituximab** : Anti-CD20 (fortement exprimé sur les cellules B sécrétrices d'IgM)

Answer 154

**Dysprotéinémie à IgM** : surexpression d'IgM **_Dx Diff_** : * Macroglobulinémie de Waldenström (95% des cas) * Myélome à IgM (0,3% des myélomes) **_Test_** : Cytogénétique * Si présence de t(11;14) : Myélome à IgM * MW : Faible incidene de translocation des gènes des IgH \*\*Important de faire Dx Diff : Meilleur pronostic pour MW que pour MM

Answer 155

Syndrome associé au **dépôt d'amyloïde** * Dépôts tissulaires de complexes protéiques fibrillaires (avec repliement inadéquat, mais qui résiste à la protéolyse) * Polypeptide en feuillet bêta (10-15 mm de diamètre) * Environ 20 types de protéines connues * Transthyrétine * B2 microglobuline * Chaines légères libres...

Answer 156

**_Amyloïdose AL (amylose primitive)_** : maladie due à l'accumulation de chaînes légères d'immunoglobulines clonales ou de leurs fragments sous forme de dépôts d'amyloïde * Syndrome d'amyloïdose acquis * Atteinte multi-organes * Atteinte rénale et cardiaque importante

Answer 157

**VRAI** (60%)

Answer 158

**FAUX** Chaine lambda plus sujette à précipitation

Answer 159

**VRAI** Cible de choix en radio-imagerie **_Amyloïde P_** : * 100 kDa * Production hépatique exclusive * Protéine la plus abondante associée aux fibrilles

Answer 160

_Investigation_ : * Sérum : CLL, EPS, IFix, GAM * Urine : EP-U et IFix-U, protéinurie 24h ou indice prt/créat sur miction _Suivi_ : * Pic à EPS et CLL

Answer 161

Réabsorbées a/n des tubules * CLL doivent être très augmentées pour les voir apparaitre dans l'urine!

Answer 162

**_Maladie de déposition des chaines légères libres :_** * Maladie due à la précipitaiton a/n de la membrane basale de certains organes * ***Absence d'amyloïde*** * Précipitaiton implique la fraction constante des CLL * Organes atteints : * Rein (principal) * Coeur et foie * ***Atteint une population plus jeune (30-50 ans)***

Answer 163

_Amyloïdose_ : Présence d'amyloïde mis en évidence en pathologie avec rouge de Congo (fibrilles vertes insolubles en lumière polarisée) _Maladie dépôt CLL_ : Absence amyloïde

Answer 164

**FAUX** très rare

Answer 165

**_Maladie des chaines lourdes_** : Paraprotéinémie constituée uniquement d'une chaine lourde * Chaine lourde incompléte, généralement type alpha * Sx : * Infiltration intestinale * Malabsorption sévère * Touche les jeunes adultes

Answer 166

**Exclusive** : absence de chaine lourde sérique **Associée** : MM, MW, Amyloïdose AL (présence d'une paraprotéine Ig intacte avec excès de CLL)

Answer 167

* Investigation des gammapathies monoclonales * Caractérisation de la dysprotéinémie /urie monoclonale (typage de la paraprotéine) * Suivi des gammapathies (reprise d'une IFix) * Confirmation de la disparition de la paraprotéine * Confirmation de la réapparition (récidive) * Conversion de la gammapathie

Answer 168

_Combinaison de 2 principes analytiques :_ * Séparation des protéines par électrophorèse * Plusieurs pistes utilisées pour le même échantillon * Précipitation des protéines * 1ere piste : précipitation de toutes les protéines * Autres pistes : précipitation spécifique (IgG, IgA, IgM, kappa, lambda) * Révélation par coloration de précipités \*\*\****ATTENTION*** : Technique manuelle!! Possibilité d'erreurs de dépôt d'antisérum

Answer 169

* Investigation et suivi des gammapathies monoclonales * Recherche d'excrétion de CLL * Urine 24h * Concentration de l'urine requise (\> 100x) \*\*Comme seulement indiqué pour présence de CLL, rapporter présence ou absence de protéinurie à CLL (si on voit autre chose, mais pas de CLL : absence de CLL) \*\*\*On sait déjà ce qu'on a comme protéine monoclonale a/n du sang quand on fait une IFix U

Answer 170

Présence de alpha-2 macroglobuline

Answer 171

* Échantillons décongelés et protéines précipitens * Apparence biclonale ou complexe d'Ig? * Solution : Résuction des ponts disulfures avec DTT ou B-OH

Answer 172

Les CLL vont comigrer avec les CL associées à la protéine monoclonale * Intensité CL \>\>\> que chaine lourde : suspecter présence de CLL * Il existe des Ab anti CL-libre * Dosage des CLL

Answer 173

* Problèmes techniques divers (technique manuelle) * Application, inversion, oubli... * Protéinurie à chaines légères vs rein fonctionnel * Sensibilité de la méthode * Gammapathie à IgE et IgD * Ne pas oublier que si GAM négatif, peut être protéine monoclonale D ou E * Équilibrage de la concentration des antisérums

Answer 174

_Combinaison de 2 principes analytiques :_ 1. Séparation des protéines par **électrophorèse** * Co-migration en alternance (petits puits): * Sérum de contrôle & sérum d’un patient 2. **Immunodiffusion** * Puits centraux (lignes) : Antisérums spécifiques (GAM, k, l) * Immunoprécipitation spécifique de chacune des classes d’immunoglobulines (IgG, IgA, IgM, kappa, lambda) * Immunoprécipitation avec antisérum polyvalent * Incubation 1 nuit / 4 °C 3. Révélation par coloration des immunoprécipités

Answer 175

* Rapidité * IFix : 3h * I-électro : 24h * Sensibilité * IFix : 0,2-0,5 g/L * I-électro : 5-10 g/L * Résolution * IFix : Très grande (séparation des clones) * I-électro : Arcs de précipitation * Interprétation * IFix : Facile * I-électro : Expérience requise

Answer 176

**Soustraction spécifique de chacun des isotype de chaine lourde et légère (1 puit chacun, effectué avant l'électrophorèse)** _Méthodes de soustraction disponibles :_ * Ab anti-Ig fixés sur les microparticules (sépharose) * Complexes immuns en milieu liquide avec mobilité électrophorétique accentuée (en pré-Alb) _Interprétation_ : * Recherche de la disparition de la paraprotéine au profil * (!) Les Ig monoclonales ET polyclonales disparaissent

Answer 177

Lorsqu'on fait les anti-kappa et anti-labda, la bande n'est pas complètement supprimée * En polyclonal, on a toujours 1/3 de lambda et 2/3 de kappa. Donc : * Dans soustraction kappa : reste 1/3 de la bande polyclonale (lambda seulement) * Dans soustraction lambda : reste 2/3 de la bande polyclonale (kappa seulement)

Answer 178

Daratumumab = IgG1 kappa \*\*TOUJOURS y penser quand un patient est connu pour un pic monoclonal et qu'il y a apparition d'un 2e pic

Answer 179

* Doser CLL * Dosage IgD et IgE totaux

Answer 180

Oui, peuvent l'être. Les méthodes de dosage IgD et IgE ne sont pas conçues pour des myélomes

Answer 181

* Ig formant des agrégats insolubles à \< 37°C * Resolubilisation réversible à \> 37°C * Avant étaient appelées Agglutinines froides * Associées à une panoplie de maladies lymphoprolifératives, auto-immunes et infectieuses * Peuvent affecter plusieurs systèmes, organes et vaisseaux sanguins (particulièrement les extrémités)

Answer 182

* Précipité formé sur le dussus du caillot, du gel séparateur ou du culot globulaire * Présentation amorphe, gélatineuse ou cristaux

Answer 183

**FAUX** La détection, quantification et caractérisation des cryoglobulines est imporante. Informations Dx et physiopathologiques utiles

Answer 184

* Peau : * Vasculite sustémique par obstruction vasculaire * Inflammation consécutive à leur déposition et à l'activation du complément * Purpura * Nécrose * Urticaire * Phénomère de Raynaud * SNC : * Neuropathie * Mononeurite * ACV * Reins : * Glomérulonéphrite membranoproliférative * Tractus gastro-intestinal : * Vasculite du tractus et douleur abdominale associée * Articulation et jointures : * Arthralgie

Answer 185

* Type 1 : * Ig monoclonale : IgG ou IgM * Plus souvent IgM, ensuite IgG3 puis IgA * Type 2 : * Ig mixte (polyclonale et monoclonale) * CIC : IgM monoclonale contre IgG polyclonales * désordre immun * Type 3 * Ig miste (polyclonal : complexe immun)

Answer 186

La cryoglobulinémie de type 1 (1 prt monoclonale seulement)

Answer 187

Infection chronique HCV

Answer 188

* Infections virale, bactérienne ou parasitaire chronique * Maladie auto-immune * Certains cancers \*\*Type 3 : Pas de protéine monoclonale

Answer 189

* Prélèvement dans un tube à chaud (37°C) * Transport au laboratoire dans un thermos (37-42°C) * Coagulation à 37°C * centrifugation non réfrigérée * Précipitation passive au frigo 72-96h * Centri et lecture du cryoprécipité * Lavage cryoprécipité avec saline froide * Resuspension dans NaCl 0,15M * Immunofixation

Answer 190

**_Cryoglobuline_** : * Précipite si \< 37°C * Observable dans plasma et sérum **_Cryofibrinogène_** : * Précipite si \< 4°C * Exclusivement dans plasma (pas de fibrinogène dans sérum(!))

Answer 191

* Ig précipitant à 50°C (réversible) * Généralement IgG * Associées avec le MM

Answer 192

Le suivi de la protéine monoclonale peut être difficile * Quantification variable étant donné la difficulté à obtenir 100% de la cryoglobuline (prélèvement)

Answer 193

**VRAI** Possible d'observer l'hétérogénéité de la protéine monoclonale grâce à une augmentation du pouvoir de résolution de la méthode (Ex : focalisation isoélectrique)

Answer 194

**Reprise de l'IFix avec un agent réducteur** * Les difficultés d'interprétation de l'immunofixation en raison de la polymérisation des protéines se rencontrent plus souvent avec l'IgM, molécule pentamérique de haut poids moléculaire mais peuvent même se voir avec les chaînes légères des immunoglobulines.

Answer 195

* Investigstion EPS * Typage de la dysprotéinémie (IFix/Isoustraction) * Dosage CLL sériques

Answer 196

Normalement : Kappa 2/3 et lambda 1/3 dans sérum En cas d'insuffisance rénale : Ratio modifié * Kappa (monomère) * Lamdba (dimère, 50 kDa) : ↓ Élimination des lambda * Ratio sanguin va devenir plutôt 1:1

Answer 197

**_CLL_** : * Librement filtées * Réasborption et catabolisme a/n tubulaire * Insuffisance rénale modifie le ratio kappa-lambda * Normal : 0,26 - 1,65 * Insuff rénale : 0,37 - 3,10

Answer 198

**FAUX** T1/2 CLL plus court que chaines lourdes. Pratique pour suivi Tx

Answer 199

VR k/l : 0,26-1,65

Answer 200

20 mg/jour (traces = normal)

Answer 201

* Mesure dans le sérum * Dosage en néphélémétrie * Sensibilité analytique doit être suffisance pour un dosage dans le sérum (mg/L) * Important pour reproductibilité des valeurs basses

Answer 202

**The binding Site (TBS)** : Ab polyclonal de mouton sur billes de polystyrène

Answer 203

**FAUX** Le suivi des patients doit toujours être effectué avec la même trousse

Answer 204

Permet de regarder la classification des patients avec les 2 méthodes de dosage des CLL (the binding site vs Siemens) * Siemens surestimes les lambda libres de façon générale p/r à TBS * Seuil de 0,8 = estimation de la relation moyenne ou forte * classification des ptx avec leur dosage p/r à VR pour chaque méthode 80% d'accord entre les 2 méthodes

Answer 205

* MGUS : Vérifier la présence de CLL associées à une paraprotéine * Valeur Px * Dosage pour vérifier émergence d'une sous-population clonale * Gammapathie à CLL exclusives (seul marqueur) : * Suivi de l'évolution de la maladie ou tu Tx * Diminution des examens urinaires * **Stratification du risque de transformation maligne**

Answer 206

1. Dépistage 2. Niveau de base des CLL au Dx * Valeur Px (stratification de risque) 3. Valeur de suivi quantitatif pour les pathologies suivantes: * Amyloïdose primaire AL * Myélome oligosécréteur

Answer 207

* Regarder le dosage de la créatinine * Si insuffisant rénal, VR changent : * VR normal : 0,26-1,65 * VR insuff rénale : 0,37-3,10 * Normal que le dosage individuel des CLL kappa et lambda augmente en cas d'insuffisance rénale

Answer 208

* Fonction glomérulaire rénale * Insuff rénale * Fonction tubulaire rénale * ↓ réabsorption = ↑ excrétion * Hypergammaglobulinémie polyclonale * Surestimation (hyper IgG ou IgA polyclonale) * Gammaglobulinémie oligoclonale * Polymérisation des CLL * Formation de complexes immuns interférant en néphélémétrie

Answer 209

Augmente les valeurs de CLL et l'indice de CLL * Dépend de l'intensité de la concentration de la polyclonalité * Dépend de la classe d'Ig

Answer 210

**Test à interpréter dans son contexte clinique** * Si patient atteint d'une situation particulière qui affecte les CLL, le dosage devrait être repris plus tard * Insuffisance rénale * Inflammation aiguë * Condition rhumatologique * Infection

Answer 211

Dosage des épitopes de jonction des IgHkappa et IgHlambda * Reconnait la jonction entre la chaine lourde et la chaine légère des Ab (a/n du domaine constant) * Peut reconnaitre spécifiquement : * IgA lambda * IgA kappa * IgG lambda * IgG kappa * IgM lambda * IgM kappa * Permet de voir l'indice IgHkappa/IgHlambda \*\*Reconnait les 2 chaines en même temps. VR de référence pour les Ig polyclonales Kappa et lambda de chaque isotype

Answer 212

**Peut permettre de suivre un patient atteint de myélome** * Évaluaiton de la maladie résiduelle * Permet ID "sCR : Réponse complète avérée" * Évaluation de la réponse * Suivi Tx : si l'indice IgH kappa/IgH lambda ne change pas, signe qu'il n'y a pas de Tx spécifique à la paraprotéine * Évaluation de la récidive * HevyLite peut permettre de voir une récidive alors que le pic monoclonal n'est plus visible en EP-S

Answer 213

* Élimination rénale (\< 60 kDa) * Réabsorption et catabolisme * Prt majeure dans urine = Albumine * Foie * Pertes pathologiques (urine, selles, peau, sang) * Catabolisme cellulaire

Answer 214

1. Transamination 2. Désamination (produit NH3) 3. Cycle de l'urée

Answer 215

**FAUX** Le plasma en contient plus : Contient le fibrinogène et les protéines de la coagulation [] prt sérum = 0,96 [] plasma

Answer 216

* Préalbumine : **0,25 g/L** * Albumine : **45 g/L** * A1AT : **1,5 g/L** * Alpha-1 glycoprotéine acide : **0,5 g/L** * Haptoglobine : **1,5 g/L** * Alpha-2 macroglobuline : **3 g/L** * Transferrine : **2,5 g/L** * Complément (C3/C4) : **1,2/0,4 g/L** * Ig (G/A/M) : **12/2/1 g/L**

Answer 217

Recherche de dysprotéinémies monoclonales

Answer 218

* S'assurer d'avoir le dosage des protéines totales * S'assurer que le dosage est juste * 1ere erreur : tube décongelé et non brassé

Answer 219

Différencier l'origine tissulaire de certaines isoenzymes * CK et LD : coeur vs muscle * PAL : foie vs os

Answer 220

1. **Traitement à la neuraminidase** * Clivage de l'acide sialique terminal de l'ALP hépatique * Change la charge de l'ALP (ac sialique = négatif) * négativité : osseuse \> hépatique 2. **Traitement à la chaleur** * Inactivation de ALP foie, os et intestin * ALP oncofoetale, foetale et placentaire résistent 3. **Ajout d'une lectine** * Lectine lie l'ALP osseuse * ALP osseuse retardée sur gel (reste à l'anode) * Permet séparation et quanfitication de ALP hépatique et macrohépatique * Déduction de ALP osseuse (calcul)

Answer 221

**FAUX** Correspond à une ALP exprimée a/n des canules hépatiques

Answer 222

**VRAI** Ex : Lipase +++ et Amylase nulle Perte d'activité de l'amylase (macroenzyme)

Answer 223

1. **Dosage sérique de l'A1AT (néphélé) et CZE-HR** 2. **Génotypage** si * AAT \< 1,15 g/L et CZE-HR normale * AAT \< 2 g/L et CZE-HR inflammatoire 3. **Phénotypage** si * Discordance entre dosage et génotypage

Answer 224

Focalisation isoélectrique

Answer 225

Le génotypage investigue seulement 2 variants causant un déficit en A1AT : Variant S et variant Z * Le phénotypage permet d'observer la présence d'un variant associé à un déficit en A1AT (autre que S ou Z) * Migration différentielle des variants p/r à A1AT MM

Answer 226

* Concentration d'une urine 24h de 1 à 100x * Application de 3-5 µL d'urine concentré

Answer 227

La présence d'**albumine**. * Toujours faire une bandelette urinaire * Si l'albumine n'est pas visible : erreur manuelle ou interférence

Answer 228

* Protéinurie normale : Alb seulement * Protéinurie glomérulaire : Prt de MW \> Alb * Sélective : quelques prt * Non-sélective : Plusieurs prt de MW élevé * Protéinurie tubulaire : Prt MW \< Alb * Chaines légères libres : MW \< Alb ***\*\*Sens de migration : MW élevé -\> Mw faible (Anode -\> Cathode)***

Answer 229

* Composition du sérum, mais 200x moins concentré * **B2-transferrine** : présence discrète ds LCR vs absente du sérum en condition normale * 60-80% du glucose sanguin

Answer 230

La B2-transferrine ne contient pas d'acides sialiques

Answer 231

* Sang artériel filtré par la barrière hématoencéphalique : * Production du LCR par filtration sélective * Réabsorption du LCR par les villosités arachnoïdiennes * Production de sang veineux a/n des sinus

Answer 232

1. Hémato : * Numération cellulaire 2. Biochimie * Protéines et glucose (P/r à éch sanguin) 3. Microbiologie : * Culture et coloration * Analyse de sédiments

Answer 233

* Recherche de bande oligoclonale d'IgG intrathécale * Toujours faire un sérum en parallèle pour comparer les patrons * Recherche patron qui est absent du sérum * Focalisation isoélectrique * Bandes IgG oligoclonales : * Sclérose en plaque si \> 2 bandes * Atteinte infectieuse systémique (CMV, HIV, syphillis)

Answer 234

* Électrophorèse des protéines pour échantillon sanguin et liquide d'écoulement (nasal/oreille) * Agarose ou capillaire * Présence de B2-transferrine dans le liquide d'écoulement Dx pour une fistule

Answer 235

* Neurofilaments ↑ * Amyloïde ↓ (précipite pour former plaques) * Tau ↑

Answer 236

* Choc septique * Trauma * Syndrome de détresse respiratoire * Brulure * Angio-oedème

Answer 237

**FAUX** Déshydratation. HyperAlb transitoire (hémoconcentration)

Answer 238

* Analbuminémie congénitale * Maladie inflammatoire * Malabsorption * dénutrition * Pertes rénales (atteinte glomérulaire) * Pertes GI * maladie inflammatoire * Hémorragie digestive * Diarrhée profuse * Perte par la peau * Redistribution corporelle pathologique * oedème, ascite * Compensation pour augmentation de la pression oncotique

Answer 239

* Néphélémétrie * Bromocrésol vert ou pourpre * Électrophorèse

Answer 240

1. Activité ferroxydase * Oxydation de Fe2+ → Fe3+ 2. Transport du Cu

Answer 241

L'haptoglobine a une activité **_bactériostatique_** puisqu'elle lie d'Hb libre et previent l'utilisation du **_fer_** par les **_bactéries_**

Answer 242

Protéine de phase aigue positive qui prévient la perte de fer en captant l'hème libérée

Answer 243

* Évaluation du statut nutritionnel * t1/2 = 2 jours (reflet changement rapide)

Answer 244

**_Augmentation_** : * Maladie rénale chronique * Néphropathie diabétique * Tx à l'aspirine **_Diminution_** : * Dénutrition * Maladie hépatique * Inflammation aiguë

Answer 245

* Transporteur DMT1 a/n apical * Transport du fer ferreux à l'intérieur de la cellule intestinale (entérocyte) * Ferroportine a/n basolatéral * Transport du fer ferreux vers la circulation * Fer ferreux oxydé en Fe3+ puis transporté par transferrine * Hephaestine, Céruloplasmine * Hepcidine : * Rétrorégule l'expression des Ferroportine et DMT1 lorsque les réserves de fer sont adéquates ## Footnote ***\*\*Absorption intestinale facilitée par : Alcool, Vit C, fructose, absorption antagonisée par calcium***

Answer 246

**VRAI** t1/2 7-8 jours, influencée par statut nutritionnel

Answer 247

* Réactant de phase aiguë NÉGATIF * Synthèse régulée par la biodisponibilité du fer * Fer ↑ : transferrine ↓ * Fer ↓ : transferrine ↑

Answer 248

**Saturation associée à différentes pathologies selon si elle est faible ou élevée** * **_Saturation élevée_** : surcharge en fer * Hémochromatose * surcharge en fer * Anémie (hémolytique) * Polytransfusion * **_Saturation basse_** : Déficit en fer * Anémie ferriprive * Grossesse * Perte en fer * Inflammation * Infection

Answer 249

Indiqué pour détecter une carence en fer (plutôt que le fer)

Answer 250

La **_ferritine_** est l reflet des réserves corporelles en fer

Answer 251

Par CZE-HR: * Saturation : augmentation de la bosse juste avant Tf

Answer 252

**_Anémie ferriprive :_** * Transferrine : ↑ * Fer, ferritine, Sat Tf : ↓ **_Hémochromatose_** : * Fer, Sat Tf, ferritine : ↑ * Transferrine : ↓ **_Anémie hypoproliférative_** : * Fer, transferrine, ferritine : ↓ * Sat Tf : +/- normale

Answer 253

* Inflamamtion * Maladie hépatique chronique * Malnutrition * Pertes protéiques (syndrome néphrotique) * Atransférrinémie congénitale

Answer 254

**_Augmentée_** : * A1AT * Haptoglobine * Complément * CRP * AAG **_Diminuée_** : * Albumine * Transferrine * Transthyrétine * RBP

Answer 255

* Acétate de cellulose : charge * Agarose : charge * PAGE : Taille et charge * SDS-PAGE : taille * CZE : Charge * Focalisation isoélectrique : pI

Answer 256

* Tampon à pH élevé : Tampon barbital pH 8,6 * Les protéines sériques sont majoritairement chargées négativement * Charge globale négative différente * Migration des protéines à des vitesses différentes * Les ions du tampon sont impliquée dans l'établissement du pH et du transport du courant électrique

Answer 257

* Augmentation de la force ionique = masque la macromolécule face au champ électrique * Augmente la résolution * Diminue la vitesse de migration * Produit de la chaleur * Refroidissement du système nécessaire ## Footnote ***\*\*Force ionique mise à profit en CZE-HR***

Answer 258

**µ = l\*d / (t\*V)** ## Footnote **vitesse migration (l/t) / force du champ électrique (V/d)** * l = distance parcourue * d = longueur du gel * t = temps d'électrophorèse * V = voltage du système **Unités : cm²/Vs** **µ = Q /6 πnr** * Q = Charge nette de la molécule * n = viscosité du milieu * r = rayon ionique de la molécule

Answer 259

Les électrophorèses sont généralement effectuées à **_intensité_** constant, mais en clinique on les fait à **_voltage_** constant

Answer 260

Seul mode électrophorétique où les molécules migrent de l'anode vers la cathode * à pH basique (8,6 tampon barbital), le support solide contient des silanols libres déprotonés (O-) * Il se forme 3 couches ioniques différentes : * Une couche ionique positive STATIQUE à la surface du support solide * Stern Layer * Une couche de diffusion où il y a plus de cations que d'anions * Une couche mobile ou les cations = anions * Les couches statique et de diffusion étant davantage composées d'ions positifs, les anions dans la couche mobile seront davantage retenus que les cations * Crée un fort mouvement de solution (cation) vers la cathode (en sens contraire du champ électrique)

Answer 261

Combinaison de la chromatographie et de l'électrophorèse

Answer 262

**_Chromatographie_** : * RÉsolution pas optimale * Absorption de protéines * Dénaturation de protéines **_Électrophorèse sur gel_** : * Temps d'exécution important * coloration nécessaire (semi-quantitaitf) * +/- Répétabilité

Answer 263

* Automatisé * Détection en cours d'analyse (détecteur UV) * Quantitatif * Reproductibilité de séparation

Answer 264

* Dosage de la Tf, saturation Tf, fer * SI estimation

Answer 265

* États cliniques mixtes plus facile à investiguer * Capacité de détection d'un faible pic monoclonal * Permet distinction d'un patron oligoclonal * Déficience en AAT : Meilleure exactitude clinique * Migration différentielle des variants potentiellement observable * Reconnaissance de conditions qui peuvent influencer [] AAT * quantification possible * Permet de différencier hémolyse in vivo de in vitro * Complexe Hb-Hapto observable (bosse avant alpha2-macro) * Meilleure exactitude pour ID syndrome néphrotique * ↑ modérée alpha2 macro * Permet d'estimer quantitativement la transferrine * Saturation de la transferrine visible * Permet l'étude du complément * C3 instable -\> C3d * ↓ C3 avec ↑ C3d = complément dégradé * ↓ C3 sans ↑ C3d = pas d'↑ du complément

Answer 266

* Automatisé * Grande quantité d'info sur plusieurs prt spécifiques * Grand nbre d'état clinique percevables, identifiables ou confirmé * Résolution accrue * Sensibilité accrue * Exploitation hors gammapathie * Anémie ferriprive * Anémie chronique, surcharge en fer * Hémolyse intravasculaire

Answer 267

* En alpha 1 : Agent de contrastre et lipémie * En bêta-gamma : CRP et fibrinogène

Answer 268

**_Syndrome néphrotique_** * Albumine : ↓ * Alpha 1 : N * Alpha 2 : ↑ (alpha2 macro ↑, remplace Alb) * bêta : ↑ * Gamma : ↓ **_Inflammation aiguë :_** * Albumine : ↓ * Alpha 1 : ↑ * Alpha 2 : ↑ * bêta : N-↑ * Gamma : N

Answer 269

* Compétitif : Ag\* * Non-compétitif : Ab\*

Answer 270

**_Phase homogène :_** * Phase liquide * Aucune séparation requise * Plus rapide * Plus facile à automatiser **_Phase hétérogène :_** * Phases solide/liquide * Étapes de séparation du complexe immun marqué du marqueur libre * Lavage * Précipitation * Plus long

Answer 271

**FAUX** TRÈS majoritairment inversement proportionnel, mais pas toujours

Answer 272

Utilisation d'un isotope radioactif pour détecter et quantifier la réaction immunologique Ac-Ab * Courbe réponse : % de lié sur total (inversement prop)

Answer 273

**_Avantages RIA :_** * Meilleure sensibilité analytique que la néphélométrie * Peu d'effet de HIL sur le signal * Marquage a peu d'effet sur les molécules * Ab conserve son immunoréactivité lorsque marqué * Ag est faiblement altéré par le marquage radioactif

Answer 274

**_Désavantages RIA :_** * Phase hétérogène requise (séparation nécessaire) * Réactifs instables (t1/2 des radioisotopes) * Surveillance étroite de la courbe d'étalonnage * Validation biochimiste * Hétéroscédasticité * Technique manuelle * répétitif : blessures techno * Formation * Délai de réponse * Retrait préventif * Permis et mesures de radioprotection * Gestion des radioisotopes (déchets, stockage, ...) * Besoin d'un compteur gamma * Alternativec non-isotopiques encouragées (ALARA) * Fournisseurs ont abandonné trousses

Answer 275

**CV variable le long de la courbe réponse** * EN opposition avec homoscédasticité : même précision, même SD sur toute la courbe

Answer 276

Méthode qui utilise la propriété catalytique d'une enzyme pour détecter et quantifier la réaction immunologique Ab-Ag * Des conjugués stables Ab-Enzyme ou Ag-Enzyme doivent être préparés **sans altérer la réactivité immunologique** * Production d'un signal via l'activité enzymatique du marqueur * Production d'un produit détectable par photométrie

Answer 277

* Horse Radish Peroxidase * Phosphatase alcaline * Bêta-galactosidase * Glucose-6-phosphate déshydrogénase

Answer 278

* **CEDIA** : Cloned enzyme donor immunoassay * bêta-galactosidase * Homogène * **EMIT** : Enzyme multiplied immunoassay technique * Glucose-6-phosphate déshydrogénase * Homogène * **ELISA** : Enzyme-linked immunosorbent Assay * Hétérogène

Answer 279

**EMIT** : Enzyme multiplied immunoassay technique * Un Ag est marqué avec une enzyme * Lorsque Ag\* lié à Ab (Ag\*-Ab), l'enzyme n'a pas d'activité (aucun signal) * Lorsque l'analyte est présent (Ag), il y a compétition et libération de Ag\* de Ab lié. Production de signal * Signal inversement proportionnel * Méthode en **phase homogène** * Méthode **compétitive** ***\*Surtout utilisé pour dosage Rx et dépistage drogues de rue (urine)***

Answer 280

**_Avantages :_** * S'adapte aux analyseurs de chimie générale (photométrie) * Fabrication peu couteuse * Largement utilisée **_Désavantages :_** * Dosage limité aux petites molécules (Rx, stéroïdes, vitamines)

Answer 281

**CEDIA** : Cloned enzyme donor immunoassay * L'enzyme est en 2 fragments. Elle devient active lorsque les 2 fragments sont réunis * bêta-galactosidase ou phosphatase alcaline * 1 fragment est lié à Ag (ED-Ag) * Si ED-Ag est lié à un Ab, pas de signal * Analyte compétitionne avec ED-Ag pour Ab. * Signal directement proportionnel [analyte] * Méthode **homogène compétitive** *\*Méthode possible grâce au génie génétique (clonage)*

Answer 282

**_2 principes possibles :_** 1. Ab lié à support solide et Ag\* compétitionne avec analyte. (COMPÉTITIF) 2. Ag lié à support solide (via Ab) et utilisation d’un Ab\* (formation d’un sandwich, NON-COMPÉTITIF) Dans tous le cas, c'est un immunoessais **hétérogène**

Answer 283

**_Avantages_** : * Essais adaptés aux immuno-analyseurs à haute cadence **_Désavantage_** : * essai hétérogène : Plus long!

Answer 284

**FAUX** Chimiluminescence et fluorescence parmi les méthodes de détection des plus sensibles!

Answer 285

Phénomène d**'émission de photons à partir d'un atome ou d'une molécule dans un état électronique excité**. En retournant à son état fondamental à partir de son état excité, l'**énergie perdue se transforme en photon** * **Bioluminescence** : É produite par rxn enzym dans des organismes vivants * **Chimiluminescence** : É est apportée par une rxn chimique exothermique * **Photoluminescence** : É provient de l'absorption de photon (inclu fluorescence et phosphorescence)

Answer 286

Utilisation d'un marqueur fluorescent pour détecter et quantifier la réaction immunologique (Ab-Ag) * Fluorophore est excité à une longueur d'onde donnée (courte et énergétique) et réémet à une longueur d'onde plus longue et moins énergétique * Méthode en **phase homogène**

Answer 287

* Fluorescéine * Rhodamine * Europium

Answer 288

1. Fluorescence polarisée (FPIA) 2. Time-resolved fluorescence

Answer 289

**FPIA** : Fluorescent polarisation immunoassay * Mesure d’émission de fluorescence polarisée lorsque fluorophore excité avec lumière polarisée * Ag\* (\*=fluorophore) seul = fluorescence non-polarisée (rotation libre) * Ag\*+Ab=Ag\*-Ab : Émission de fluorescence polarisée (rotation lente) * Analyte compétitionne avec Ag\* pour Ab * Signal inversement proportionnel [analyte] * Méthode **compétitive homogène**

Answer 290

Utilisation d'un marqueur chimiluminescent pour détecter et quntifier la réacrtion immunologique (Ag-Ab)

Answer 291

* Ruthénium * Ester d'acridinium

Answer 292

**ECLIA** : Electrochimiluminescence immunoassay * Immunoessais **hétérogène non-compétitif** * 2 Ab spécifiques à Ag : Formation d'une sandwich * Liaison à un support solide (billes magnétiques avec streptavidine) * "quasi-homogène" * Complexe immun concentré vers une électrode (particule paramagnétique) : oxydation du \* et Émission lumière * Ruthénium émet de la lumière ***(!) Aussi possible d'être compétitif***

Answer 293

**LOCI** : Luminescent Oxygen Channeling Immunoassay * **Homogène non compétitif** * 2 Ab qui reconnaissent Ag * 1 Ab lié à une particule "sensibilisateur" * 1 Ab lié à une particule chimiluminescente * Lorsque particules sensibilisateur et chimiluminescente à proximité via liaison Ab:Ag:Ab, signal luminescent * Irradiation UV pour produire oxygène singulet * O2 singulet active particule chimiluminescente et produit chimiluminescence (mesurée) * Directement proportionnel

Answer 294

Biotine-streptavidine

Answer 295

La normalisation est importante pour : * Évaluer et suivre la concentration d'un constituant A chez un patient dans n'importe quel labo

Answer 296

* Conditions pré-analytiques différentes * Appareils différents * Principes d'analyse différents * VR différentes * Unités de meure différentes

Answer 297

* Traçabilité métrologique * Justesse de mesure * Accréditation * Comparabilité des résultats et des VR * Guides de pratique cliniques (seuils de décision médicale) * Sécurité des Ptx * Confiance du public * Harmonisation SIL et DSQ

Answer 298

* Protocoles de laboratoire * Technologie, traçabilité et commutabilité * Prélèvement, stabilisation et conservation des éch * Rapport d'analyse et transmission des résultats * Nom des tests * Unités, VR, Vc

Answer 299

Propriété d'un résultat de mesure selon laquelle ce r**ésultat peut être relié à une référence (étalon international, matériel de référence)** par l'intermédiaire d'une **chaîne ininterrompus** et documentée d'étalonnages sont chacun contribue à l'**incertitude de mesure** * _Chaine de traçabilité métrologique_ : Succession d'étalons et d'étalonnages qui est utilisée pour relier un résultat de mesure à une référence

Answer 300

Matériau dont les propriétés physiques et/ou chimiques sont suffisamment bien déterminées pour permettre son utilisation dans : * Étalonnage des instruments * Validation des méthodes * Assignation de valeurs (fabricants) * Évaluation de la comparabilité de résultats

Answer 301

Matériel de référence certifié : Matériel de référence accompagné d'une documentation délivrée par un organisme faisant autorité et fournissant une ou plusieurs valeurs de propriétés spécifiées avec les incertitudes et les traçabilités associées

Answer 302

Propriété d'un matériau de référence qui **indique dans quelle mesure le matériau imite les caractéristiques d'échantillons cliniques typique**s dans les procédures de mesure pour un mesurande indiqué \*\*Même justesse que s'il s'agit d'un échantillon patient (pour avoir confiance en nos contrôles!) \*\*CQi/e doivent être commutables aux échantillons patients!

Answer 303

* Hémolyse * Ictère * Lipémie * Ab et Auto-Ab anti-analyte * Protéine de liaison * Ab hétérophiles * HAAA : Ab humaine anti-animaux * Réactivité croisée (molécules apparantées)

Answer 304

* Additifs ajoutés aux échantillons en cours d'analyse * Ab administrés aux Ptx (Tx) * Rx * Suppléments alimentaires et produits naturels * Substances radioactives ou fluorescentes présentes dans l'échantillon * Rémanence (carryover) * Additifs utilisés dans la fabrication des tubes de prélèvements

Answer 305

**FAUX** * Essais immunométriques (non-compétitifs) * Néphélémétrie * Turbidimétrie

Answer 306

Ab qui réagissent contre différentes parties de l'Ab réactif de la méthode immunologique (faible affinité) * Ab naturels ou auto-immuns

Answer 307

Ab qui reconnait la partie Fab de l'Ab de la méthode * Interférence avec la partie des sites de liaison à l'Ag

Answer 308

* Facteur rhumatoïde * Ab itiodype * Ab anti-animaux

Answer 309

* Peuvent interférer en créant un pont entre l'Ab de capture et l'Ab marqué (fausse augmentation) * Peuvent interférer en neutralisant un ou les 2 Ab empêchant leur réaction (fausse diminution)

Answer 310

**_Ab anti-animaux :_** * Interférence plus facile à bloquer * Ajouter aux réactifs des protéines sériques de même source animale que celle des Ab **_Ab hétérophiles :_** * Interférences plus difficiles à bloquer * Ab peuvent réagir avec plusieurs types d'Ab

Answer 311

**_Ab anti-animaux :_** * Ab spécifiques produits chez des individus après une exposition à des préparations d'origine animale ou suite à un contact prolongé avec des animaux **_Ab hétérophiles :_** * Ab naturels non spécifiques présents chez tous les individus * Certains types sont associés à des maladies auto-immunes

Answer 312

**_Ab anti-animaux :_** * Ab dirigés **spécifiquement** contre les protéines d'espèce animale en cause * **Affinités élevées** * Peuvent interférer dans **tous les types d'IE** **_Ab hétérophiles :_** * Ab de **faible affinité** * Généralement **pas spécifiques** * Interfèrent surtout dans les Ie de type **immunométriques**

Answer 313

**Environ 0,05%**. Peut être plus, peut être moins * Dépend aussi de la population/clientèle de l'hôpital * Ex : beaucoup de maladie auto-immune, hopital en région avec des agriculteurs...

Answer 314

* Dépister l'erreur * Résultat incohérent avec la clinique (CLINICIEN) * Dilutions sériées qui ne concordent pas (LABO) * Différente avec une autre technique * Confirmer le bon résultat * Résultat alternatif conforme à la clinique * Éliminer l'interférence * Techniques physiques ou agents bloquants * *\*Certaines compagnies ont déjà des agents bloquants dans leur préparation*

Answer 315

* Par **élimination** des Ab avant dosage * Ultracentri * Chauffage 90°C * PEG * Par blocage **non-spécifique** des Ab pendant le dosage * Globulines non immunes * Sérum animal (\> 2 espèces) * Dilution sériées avec sérum animal * Par blocage **spécifique** des Ab pendant le dosage * Ig anti Ab hétérophile et HAMA * IgG monoclonales de souris anti IgM humaines

Answer 316

* Radioactivité dans le spécimen * Augmentaiton pathologique de l'enzyme utilisée dans un EIA (Ex : PAL) * Ab anti-ruthénium * Substances fluorescentes ou atténuantes en FIA * Substances atténuantes dans les CIA

Answer 317

Biotine exogène peut interférer avec le système de détection utilisant la liaison biotine-streptavidine * Interférences peuvent causer des profils pathologiques! * TSH dosée en sandwich. Biotine = fausse diminution du signal. Signal directement proportionnel. TSH diminuée * T4L dosée en compétitif. Biotine = fausse diminution du signal. Signal inversement proportionnel. T4L augmentée * **Dx d'hyperthyroïdie crée par une interférence à la biotine!!!**

Answer 318

* Déficience génétique en biotinidase * Maladies métaboliques mitochondriales * Crampes chez les hémodialysés * Sclérose en plaque évolutive * Syndromes de malabsorption * Nutrition parentérale totale

Answer 319

* **Monovalente** : Liaison de 1 molécule avec 1 seul site de liaison * **Bivalente** : Liaison de 2 molécules différentes (1 par site de liaison) * **Monogame** : Liaison de 1 molécule avec les 2 sites de liaison

Answer 320

* **Immunogène** : Toute molécule qui suscite une réponse adaptative après injection chez un hôte * **Antigène** : Molécule qui réagit avec les sites de reconnaissance antigénique d'un Ab

Answer 321

* **Épitope conformationnel** : Dénaturation = perte de l'épitope complet ou partiel (repliement) * **Épitope linéaire** : Dénaturation n'affecte pas l'épitope * **Néo-épitope** : Créé par protéolyse (dénaturation et apparition de la réactivité antigénique)

Answer 322

De larges complexes immuns se produisent lorsque **_l'anticorps_** est en quantité suffisante, alors que de petits complexes immuns se forment lorsque **_l'antigène_** est en excès

Answer 323

**_Affinité_** : * Représente la force d'attraction d'un Ab pour un site Ag particulier * 1 seul site de liaison * Intensité du lien d'un Ab avec un Ag **_Avidité_** : * Représente la force de liaison entre un sérum polyclonal et une macromolécule poly Ag * Intensité globale du lien de l'ensemble des sites de liaison d'un Ab pour un Ag * Somme de l'affinité de chaque site de liaison à un Ab

Answer 324

* **Titre** : inverse de la dilution maximale d'un anti-sérum qui produit une réaction positive * Ex : Dilution 1/16 produit une rxn + et dilution 1/32 produit rxn - (titre = 16)

Answer 325

**VRAI** Plusieurs Ab de spécificité différente, plusieurs sites de liaison. Avidité = somme de l'affinité de chaque Ab

Answer 326

La sensibilité analytique d'un immuno-essais augmente si **_l'affinité_** entre l'Ab et Ag augmente

Answer 327

* **Force ionique** de la solution (↑ FI = ↑ dissociation) * Type de **cations** * Plus le rayon du cation est grand, plus grand est son effet d'inhibition du complexe Ag-Ab * **Polymères** utilisés * ↑ MW polymère = ↓ solubilité des protéines * + polymère est gros, + il prend de place et + les protéines sont collées = favorise précipitation (↓ solubilité)

Answer 328

**VRAI** Elle s'équilibre toujours (pas constant/fixe)

Answer 329

La **spécificité** d'un Ab (capacité à réagir seulement avec la substance d'intérêt)

Answer 330

**_Ab monoclonaux :_** * Dirigés contre un épitope unique **_Ab polyclonaux :_** * Plusieurs épitopes reconnus * Risque de réactivité croisée

Answer 331

* "qualité" de l'Ab (type, réactivité, affinité, avidité) * "qualité" de l'Ag (Intégrité, stabilité, complexes) * Réactions croisées * Défauts de l'Ag (structure, instabilité, inhibition, liaison) * Défauts de l'Ab (variation inter-lots, source, stabilité, temps de réaction) * Effet crochet

Answer 332

1. Reconnaissance et liaison entre Ab et Ag * Réversible 2. Développement d'un réseau Ag-Ab * Rapport moléculaire entre Ag et Ab important pour formation du réseau (excès de l'un ou l,autre inhibe formation du réseau) * 2-3 Ab pour 1 Ag 3. Précipitation du complexe après atteinte d'une grandeur critique * Zone d'équivalence = précipitation

Answer 333

**Courbe d'Heidelberg** : Courbe de précipitation Ag-Ab * Zone en excès d'Ab * Zone d'équivalence ([Ab] = 2 x [Ag]) * Réarrangement continu du réseau * Réseau maximal * Zone d'excès d'Ag

Answer 334

**_Milieu liquide :_** * Néphélémétrie * Turbidimétrie **_Milieu gélifié :_** * Immunodiffusion radiale

Answer 335

**_Principe de la méthode d'Ouchterlony_** : * Visualisation de la liaison Ab-Ab dans un milieu gélifié * Agar ou agarose 1% * Application de l'Ag et de l'Ab dans des puits individuels * Diffusion des réactifs en fonction de leur concentration dans les puits * Concentration initiale de Ab et Ag critique * + [] augmente, plus diffuse loin * Formation d'un complexe Ab-Ag * Bande de précipitation formée au point d'équivalence * Formé lorsqu'il y a un léger excès d'Ab (2:1) * Temps réponse souvent de 48-72h

Answer 336

* 2 Ag placés dans 2 puits différents * Migration en présence d'un 3e puit contenant un Ab **_Résultats_** : * S'il y a identité entre les 2 puits contenant les Ab, les deux arcs de précipitations issus de deux puits voisins se rejoignent (Ne se croisent pas) * Si deux arcs de précipitations issus de deux puits voisins se croisent, cela signifie que les deux puits contenaient des antigènes différents et que le sérum de l’individu était séropositif pour ces deux antigènes

Answer 337

**_Technique d'immunoprécipitaiton quantitative_** * Milieu gélifié (agarose 1%) * Ab incorporés dans le gel * Dépôt de l'Ag dans un puit * Diffusion passive de l'Ag dans l'agarose * Sortie de l'Ag du puit lente * Plusieurs cycles de solubilisation et formation du précipité à mesure que l'Ag migre (modification du ratio Ab/Ag) * Relation linéaire entre la concentration de l'Ag et le diamètre de l'anneau de précipitaiton * Arrêt de migration provoqué par épuisement de l'Ag dans le puits * Plus l'Ag a migré, plus l'arc de précipitation est faible * Temps d'atteinte de l'équilibre : 48-72h * Mesure du diamètre après 72h

Answer 338

**Les Ag ou les Ab sont sur une particule** * Billes enrobées d'Ag/Ab * Taille du réseau augmenté grâce à la particule * Réseau qui précipite rapidement

Answer 339

**FAUX** Agglutination = Plus sensible que immunoprécipitation

Answer 340

* Dynamique de la réaction Ag-Ab est modifiée dû à la liaison à une particule * Favorise les interactions moléculaires Ag-Ab * Force de la rxn augmentée * Sensibilité analytique augmente (LOD plus faible)

Answer 341

**_Dispersion de Rayleigh_** * Énergie absorbée = Énergie réémise (même longueur d'onde) * Sans perte d'énergie

Answer 342

**VRAI** * Dispersion de Rayleigh (taille \< 1/10 de lambda) * Dispersion dans tous les sens * Dispersion de Rayleigh-Debye (taille entre lambda et 1/10 de lambda) * Dispersion renforcée vers l'avant * Dispersion de Mie (Taille \>\>\> lambda) * Dispersion renforcée vers l'avant **Important pour le design des méthodes de détection (néphélémétrie vs turbidimétrie)**

Answer 343

**_Néphélémétrie_ : Mesure de la lumière dispersée à un angle autre que 180° par rapport à la lumière incidente** * Lumière dispersée par les complexes immuns formés en cours de rxn * Angle idéal = 15° ou 30° (vers l'avant) * La sensibilité augmente lorsque l'angle de mesure se rapproche du chemin lumineux * Mesure en mode cinétique ou en point final

Answer 344

**_Point final :_** * Mesure lorsque l'atteinte d'un état de pseudo-équilibre de la rxn * Plus long pour la mesure * Plus à risque de l'excès d'Ag **_Mode cinétique :_** * Mesure où la vitesse de réaction est maximale * Dans les premières minutes * Plusieurs modes * Variation de l'augmentation du signal dans le temps. Mesure à 2 temps fixes * Mesure de la vitesse de la rxn à différents temps

Answer 345

* **Turbidité** : * Fausse ↑ * Augmente dispersion de la lumière * **Effet crochet** * Fausse ↓ * **Ab interférents** * Variable * Peut bloquer ou augmenter formaiton du réseau de complexe immun

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