Cours Hématologie INTRA Flashcards
A blood collection tube containing sodium fluoride and an oxalate inhibits coagulation by:
a) binding calcium, which is essential or the clotting mechanism
b) accelerating the action of antithrombin III
c) forming insoluble complexes with calcium ions
d) inhibiting the enzyme systems involved in glycolysis.
D
À la naissance, quelle est la propostion normale de HbF:HbA?
Environ 1:1
A low immature platelet fraction is found in thrombocytopenic patients with which disorder listed below?
a. Aplastic anemia
b. Idiopathic thrombocytopenic purpura
c. Increased peripheral platelet destruction
d. Monitoring after stem cell transplant
e. Recovery after chemotherapy
A
À partir de combien de semaines la chaines bêta est-elle produite ?
30 semaines (foetus)
À quel moment pouvons nous considérer la présence d’une thalassémie chez un patient?
On peut la considérer lorsque
1. Le nb de GR est ≥ à la limite supérieure de la normale.
2. Le VGM est < à ce qui est prévu par rapport à la [Hb].
3. L’indice de déviation du volume érythrocytaire (IDVE), les réticulocytes et la ferritine sont normaux.
4. Présences de certaines cellules (ex.: cellules cibles, cellules en faucille, sphérocytes , ovalocytes , cellules avec corps Howell jolly , etc.)
À quel type d’anémie est associé un désordre métabolique de la glucose phosphate isomérase?
anémies hémolytiques non sphérocytaire (héréditaire ou congénitale)
anémie hémolytique chronique avec présence de macrocytose et d’anisocytose, polychromes, de poikilocytose
À quelle voie métabolique appartient l’enzyme “Glucose-6-Phosphate déshydrogénase”?
Voie des hexokinases monophosphate (shunt des pentoses)
À quelle voie métabolique appartient l’enzyme “Glucose Phosphate isomérase”?
Voie d’Embden-Meyerhof
À quelle voie métabolique appartient l’enzyme “Glutathion reductase”?
Voie des hexoses monophosphates (Shunt des pentoses)
À quelle voie métabolique appartient l’enzyme “hexokinase”?
Voie d’Embden-Meyerhof
À quelle voie métabolique appartient l’enzyme “Pyruvate kinase”?
Voie d’Embden-Meyerhof
À quelle voie métabolique appartient l’enzyme “Pyruvate kinase”?
Voie d’Embden-Meyerhof
À quoi sert l’ARN résiduel des réticulocytes?
permet la synthèse de nouvelles molécules d’ Hb
À quoi sert les ATP produit dans les GR?
*À la phosphorylation du glucose
*À maintenir l’intégrité osmotique (pompe Na+/K+)
À quoi sert l’hémogramme?
- Premier examen biologique utilisé pour dépister, explorer et suivre la plupart des hémopathies
- Indications très nombreuses
- Principalement utilisé dans des conditions où le patient démontre
- Signes évoquant une diminution d’une ou de plusieurs lignées sanguine
- Syndrome anémique
- Syndrome hémorragique
- Syndrome infectieux
- Certaines situations systématiques ou bilans (grossesse, suivi thérapeutique, bilan pré ou post-op)
- Signes évoquant une diminution d’une ou de plusieurs lignées sanguine
À quoi sert l’hémogramme ?
dépister, explorer et suivre la plupart des hémopathies.
principalement utilisé dans des conditions où le patient démontre
* Des signes évoquant une diminution d’une ou plusieurs lignées sanguines (syndrome anémique (pâleur et/ou signes d’anoxie), syndrome hémorragique, syndrome infectieux (ex.: malaria))
* Certaines situations systématiques ou bilans (grossesse, médecine du travail, médecine de dépistage, bilans pré ou pos opératoires, suivis thérapeutiques).
À quoi servent les additifs dans les tubes de prélèvement ?
faciliter la fonction prévu (activé/ampecher la coagulation, conservation de l’échantillon)
An evacuated blood collection tube with a light blue stopper contains which of the following additives?
a) Heparin
b) EDTA
c) Sodium citrate
d) Sterile media or blood culture
C
Après combien de temps la crise hémolytique aiguë est-elle observée suite à la prise d’un agent déclencheur chez une personne ayant un déficit en glucose-6-phosphate déshydrogénase?
24-72h
Associer les principales anémies microcytaires et les résultats du bilan martial
- Anémie ferriprive
- Fer (B), Ferritine (B), TIBC (H)
- Anémie inflammatoire
- Fer (B), Ferritine (H), TIBC (B)
- Thalassémie et syndrome HbE, HbC
- Fer (N), Ferritine (N), TIBC (N)
- Réticulocytes (N-B)
- Évaluer Hb
- Anémie sidéroblastique
- Fer (H), Ferritine (H), TIBC (N)
Au niveau de quels types d’enzymes ont été décrite les anomalies du métabolismes des GR?
1.Des voies glycolytiques
2.Des enzymes du catabolisme des purines et pyrimidines
3.Membranaire :
*La pompe H+ ATP-dépendante
*Des enzymes modulant les phospholipides membranaires
*La méthémoglobine réductase
*Etc.
Pour quels processus la vitamine B12 est-elle essentielle?
- Essentielle à la formation du cerveau (myéline)
- Essentielle à la formation des RBS (Hb)
Beta-TM or transfusion-dependent thalassemia is mainly due to:
a. Double heterozygosity b1 mutation/b° mutation
b. Homozygosity for b° mutations
c. Homozygosity for b1 mutations
d. Double heterozygosity b1/db°
e. b°/aaa genotype
B
Citer les variables préanalytiques les plus courantes?
Position du patient et durée du garrot
Ordre des tubes et le bon tube pour le bon test
Le patient (age, médication,)
Temps entre prélevement et analyses
Condition de transport jusqu’au labo
Température/lumière
Nommer les 2 types de prélèvements de selles qui peuvent être analysés par le laboratoire
- Collecte de selle
- Évaluation ponctuelle (spot)
Le pot de collecte est différent selon le type de collecte
Combien de conformation d’Hb existe et quelles sont-elles et quelles sont leur principales caractéristiques?
2 conformations - R (relaxe oxy-Hb) et T (tendue desoxy-Hb)
L’oxy Hb est la forme relaxe (R) Hb : affinité de l’ Hb ↑ pour l’O2
La désoxy Hb est la forme tendue (T) Hb et est caractérisée par des liens électrostatiques entre des globines :
Son affinité↓ pour l’O2
Son affinité ↑ pour la 2,3-DPG qui à son tour ↑ davantage l’affinité de l’hème pour l’O2
Combien de gènes avons nous pour les différentes chaînes de globine et sur quels chromosomes les gènes sont-ils?
(chaine alpha, bêta, delta, gamma)
- Chaine alpha : 2 gènes sur chromosome 16
- Chaine beta : 1 gène sur chromosome 11
- Chaine delta : 1 gène sur chromosome 11
- Chaine gamma : 2 gènes sur chromosome 11
Combien de molécule d’Hb contient un GR et combien de molécules d’O2 sont transportés?
~ 250 x 10 6 molécules d’ Hb
transporte ~ 2 x10 9 de molécules d’O 2 c. à d. 8 atomes / groupement hème.
Combien de molécule d’hème contient une Hb?
4 molécules d’hème (1 hème par chaine de globine)
Combien de SU possède l’Hb?
4 SU
Combien de temps dure la maturation d’un RBC?
3 à 5 jours
Réticulocytes :
- 1-2 jours dans la moelle
- 1-2 jours en circulation avant de produire des RBC matures
Combien il y a de GR par mL?
4- 5 x 10 9 GR/mL
Comment appelle-t-on le matérieu inerte qui subit un changement temporaire de viscosité pendant la centrifugation? Quel est le principe de fonctionnement ?
Gel séparateur thixotrope.
Les propriétés physiques du gel changent selon si le tube est au repos ou s’il est centrifugé
- Repos : gel solide
- Centri : gel liquide
Densité du gel thixotrope intermédiaire aux cellules/caillots et au plasma/sérum
Comment calcule-t-on le TGMH?
TGMH = Hb / #RBC
Comment détecter une hémolyse in vivo ?
baisse d’haptoglobine dans le serum (consommation par le foie) est le meilleur signe d’hémolyse in vivo
Comment effectuer le principe de séparation des hémoglobines?
1) Isolement et lavage des GR à partir d’un prélèvement sur sang total. Pas un sérum ou un plasma!!!!
2) À partir d’une solution hémolysante, on effectue la libération de l’ Hb. P.S. : Un échantillon hémolysé est il problématique?
3) En électrophorèse capillaire, il y aura aspiration de l’ hémolysat par le système. Il faut se souvenir que les méthodes par gel ne sont pas soumises au même principe d’aspiration et de migration.
4) Les protéines (ici l’Hb) seront soumis à un courant électrique afin de favoriser la séparation des différents types d’Hb. La séparation de celles ci se fera en fonction des charges de chacune des Hb.
* Le temps de sortie de chaque Hb dépendra de la charge de chacune
* Permet la séparation des formes normales, des formes atypiques
* Possibilité d’obtenir des pics composés à partir de chaînes normales (ex. : HbH , Hb Bart’s)
Quel processus biochimique (voie) produit le 2,3-DPG?
Lors de la glycolyse (voie de Rappoport-Luebering)
Comment faire le Dx différentiel entre la drépanocytose HbSS et HbS/Bo-thalassémie?
- HbS/Bo-thalassémie
- RBC hypochromes microcytaires
- Taux de HbA2 augmenté
- HbSS
- RBC normocytaires
- Pas d’augmentation de l’HbA2
Comment faire pour mesurer les érythrocytes totaux?
- Impédance électrique (Méth de réf., la + ancienne et répandue)
- Cytométrie en flux (de + en + utilisée, progrès technologique)
Comment la ferritine est-elle dosée?
Méthode immunologique
- Variable d’une compagnie à l’autre
- Interférences Ab hétérophiles
- Précision diminue lorsque concentration élevée en ferritine
Comment le CO2 est-il transporté par l’Hb entre les tissus et les poumons?
- CO2 directement lié à Hb (HbCO2)
- CO2 transformé en HCO3- par l’anhydrase carbonique
- CO2 + H2O <=> H2CO3 <=> HCO3- + H+
- H+ + Hb <=> HHb
Comment le glucose entre-il dans les RBC?
Diffusion passive
Comment le PQDNS dépiste pour les syndromes drépanocytaires majeurs?
Dépistage par chromatographie de l’hémoglobine (HPLC) et confirmation par électrophorèse capillaire.
Comment le TIBC est-il dosé?
2 options :
- Calcul :
- TIBC = Fer + UIBC
- TIBC = 25,1 x transferrine
- Par mesure directe
- Excès de fer ajouté au sérum
- Liaison du fer aux sites libres
- Excès de fer enlevé avec colonne de silice ou résine échangeuse d’ions
- Dosage habituel du fer effectué
Comment l’expression de la transferrine est être liés à la quantité de fer dans l’organisme?
Lorsque les réserves de fer sont basses, l’expression de la transferrine est augmentée pour augmenter les chances de capter du fer
Où l’Hb est-elle synthétisée lors de l’érithropoïèse?
Synthèse de l’Hb dans les mitochondries dans le RBC en formation
Comment l’Hb est-elle quantifiée?
Quantification sur un automate :
- Lyse des RBC
- Ajout de cyanure de potassium : conversion des variants Hb en une seule forme stable (sauf SulfHb)
- Lecture à 540 nm
Interférence : Lipémie
Comment l’Hct est-il déterminé?
Calculé à partir de RBC et VGM :
Hct = RBC x VGM
Comment l’hypochromie est-elle identifiée (méthode)?
Méthode : coloration des RBC au MGG (coloration du fer) et observation au microscope.
- Couleur pâle des RBC (Contiennent moins d’Hb que normal)
Comment se nomme la transferrine lorsqu’elle n’est pas liée au fer?
L’apotransferrine
Comment se nomment les RBC ayant une forme en focilles?
Drépanocytes
Comment utilise-t-on le résultat du dosage des réticulocytes?
Taux de réticulocytes permet d’évaluer l’intensité de production des RBC par la moelle osseuse
- Différenciation d’une condition régénérative d’une condition non-régénérative
Compléter la phrase :
La __________ régule la synthèse des RBC aux reins via production de _____________
La PO2** régule la synthèse des RBC aux reins via production de **l’érythropoiétine (EPO)
Quel est le composé le plus important séctéré par les cellules synoviales?
Hyaluronate
- Donne la texture visqueuse au liquide synovial normal
- Utilisation de hyaluronidase pour éliminer visquosité avant de passer l’échantillon sur les multianalyseurs
Dans l’HbA (α2β2), l’hème a un anneau porphyrine lié à un atome de quoi a) de façon irréverssible ou réversible b) à une molécule de quoi c) ?
a) fer
b) réversible
c) O2
Dans l’HbA (α2β2), l’hème est lié à quelle ion qui donne la forme active de Hb humaine. On parle d’ oxy Hb (Interaction réversible avec O2)?
Fe2+
Dans l’HbA (α2β2), l’hème est lié à quelle ion qui donne la forme mét Hb (Interaction impossible avec O 2 , donc impossibilité de libérer l’O 2 aux tissus! Liaison avec ‘‘ OH –’’. (Taux normal de 1 à 2% chez l’humain sain)?
Fe3+
Dans l’HbA (α2β2), l’hème est liée à combien de globines
chacune des 4 globines
Dans quel ordre les tubes doivent-ils être prélevés?
- Hémoculture
- Bleu
- Jaune
- Rouge
- Vert
- Vert
- Lavande
- Gris
Hé Boy Jean-Rodrigue Viens Voir Le Garrot
Dans quelles circonstances la collecte 24h des urines est-elle indiquée?
- Lorsque la concentration sérique est trop faible
- Lorsqu’un prélèvement ponctuel ne permet pas d’avoir un bon reflet de l’analyte
Dans quelles circonstances utilise-t-on majoritairement l’Hct?
Lorsqu’il y a une interférence sur le dosage de l’Hb (Ex : lipémie)
- Évaluation des anémies + exacte en utilisant Hb que Hct
Dans quelles circonstances utilise-t-on majoritairement l’Hct?
Lorsqu’il y a une interférence sur le dosage de l’Hb (Ex : lipémie)
- Évaluation des anémies + exacte en utilisant Hb que Hct
Dans quelles conditions une urine 24h doit-elle être conservée pendant la collecte?
Pendant toute la durée de la collecte :
- Maintenir le contenant fermé
- Température : 2-8°C
- Conservation à l’abris de la lumière (certaines collectes)
Dans quels processus le folate est-il essentiel?
- Essentiel à la formation des purines et de certains acides aminés
- Essentielle à la formation des RBC
De quel type d’anémie souffrent les gens avec une drépanocytose HbS/Bo-thalassémie?
Anémie microcytaire
Décrire la courbe de dissociation de l’O2
L’effet du pH plasmatique à une pCO2 constant démontrant l’effet du pH sur la dissiciation de l’O2 à l’Hb. Un déplacement vers la droite indique une diminution de l’Hb pour l’O2. (et un déplacement vers la gauche une augmentation d’affinité)
Décrire la P50 de l’hémoglobine
Pression pO2 où l’hémoglobine est saturé à moitié avec l’oxygène - mesure du changement d’affinité pour l’Hb en raison des facteurs qui l’affectent.
Décrire la procédure à suivre avant un prélèvement de selle
- Fournir la documentation au patient (procédure du prélèvement)
- Fournir la liste des produits à éviter avant et pendant la collecte
- Informer le patient des Rx qu’il doit arrêter, le cas échéant
- En cas d’évaluation de la stéatorrhée, le patient doit suivre une diète recommantée
Décrire la procédure de collecte de salive
- Identifier la salivette (nom, DDN, #dossier)
- Laver les mains à l’eau savonneuse
- Ouvrir la salivette, retirer le tampon/cotton
- Mettre le tampon sous la langue
- Ne pas toucher avec les doigts
- Ne pas mastiquer
- Faire rouler sous la langue 2-3 mins (jusqu’à ce qu’il soit plein de salive)
- Remettre le tampon dans le contenant initial
- Touche le moins possible avec les doigts
- Remettre le bouchon
- Écrire date/heure de prélèvement sur l’étiquette
- Heure en système 24h
Quelle étape importante doit être suivie lorsqu’une collecte de sperme effectuée à domicile?
L’échantillon doit être conservé en contact avec la peau pentant le trasport. Une fois arrivé au laboratoire, l’échantillon doit être analysé immédiatment
- Temps et température de conservation critiques
Décrire la procédure pour la collecte urinaire de 24h. Donner 2 additifs pouvant être utilisés avec un exemple d’analyte. Donner aussi un exemple d’analyte ne nécessitant pas de préservatif. (problems related collecting 24-h urine specimens).
“1. au levet, uriner dans la toilette 2. Noter l’heure où vous urinez (c’est l’heure du début de la collecte, même si l’urine n’a pas étémise dans la cruche). 3. Pour TOUTES les urines subséquentes, receuillir les urines de la journée de la soir.e et de la nuit jusqu’au lendemain matin à l’heure où vous avez utiné la première fois (à l’étape 1). Pour ce faire utiliser un contenant propre et transvider lentement dans la cruche. 4. CONSERVER la cruche des urine Au FROID pendant tout ela durée de la collecte 24 (ex: dans le refrégérateur). 5. Le lendemain, à l’heure exacte du début de la collecte, receuillir une dernière fois l’urine (même si vous n’Avez pas envie).
Receuillir toute la quantité d’urine des 24h. ne pas contaminer avec selles ou papier hygiénique (NE PASURINER DIRECTEMENT DANS LA CRUCHE).
2 additifs: Thymol (microscopie), toluene (oxalate, cystine, lysine, ornithine, arginine), acide borique (Urea, glucose, cortisol, aldosterone, other
corticosteroids) HNO3 (trace de métaux) Na2CO3 (porphyrins, urobilinogen, uric acid) acide acétique (Aldosterone, Catecholamines, Serotonine,
5-hydroxyindoleacetic acid [5-HIAA], homovanillic acid/vanillylmandelic acid [HVA/VMA]). HCl (le plus commun et le plus utilisé).
Sans agent de conservation : pout test moléculaire d’agents infectieux”
Décrire la technique de prélèvement chez le nouveau-né (talon)
- Artérialisation (linge chaud 3 minutes)
- Nettoyer surface de la peau avec gaze 70% isopropanol
- Prélèvement à 2 personnes
- Une qui stabilise la jambe du bébé
- L’autre qui fait le prélèvement
- Profondeur < 2,5 mm sur les côtés extérieurs du talon
- Aiguille 22-23 G
- Essuyer la première goutte
- Remplir le microtube rapidement
- Éviter coagulation
- Éviter bulles d’air
- ID tubes (idéalement au début)
Décrire la technique de prélèvement chez l’enfant/l’adulte
- ID patient
- Gants
- Choisir veine
- Appliquer le garrot
- Désinfecter le site de ponction, laisser sécher
- Aiguille à un angle de 30°, piquer 1 cm en dessous de la saillie veineuse
- Déserrer le garrot (évite hémolyse)
- Remplir les tubes dans le bon ordre et adéquatement
- Inverser délicatement les tubes (5x)
- ID les tubes (idéalement au début)
Décrire le cycle de vie des réticulocytes avant de devenir un GR mature?
Séjournent environ 1-2 jours dans la moelle et sont libérés dans la circulation, puis après un autre 1-2 jours, ils perdent ce qu’ils leurs restent d’ARN
Décrire le principe d’impédence électrique.
Une cellule passera à travers la fente du tube et
provoquera un déplacement d’électrolytes qui modifiera le courant mesuré.
Décrire le principe de l’évaluation de l’Hb par électrophorèse capillaire (traitement de l’échantillon et principe de séparation)
- Isolement et lavage des RBC (sang total)
- Hémolyse des RBC
- Aspiration de l’hémolysat par le système
- Séparation des Hb via courant électroendoosmose
- Séparation en fonction des charges
- Permet la séparation des formes normales vs atypiques
- Profil final en 5 mins
Décrire le traitement à l’hydroxylurée.
Stimule la synthèse d’HbF. Cela permet de compenser la mutation survenue a/n de la chaîne beta lors de la drépanocytose. Ainsi, le transport de l’O 2 s’effectue normalement et le risque d’anoxie liée à la drépanocytose est limité.
Toutefois, l’augmentation du taux d’HbF est modérée et il se pourrait que la molécule intervienne par d’autres biais, comme une limitation de la réaction inflammatoire.
Décrire les conditions à respecter lors d’une collecte de selles
- Doit être effectuée dans un contenant fourni par le laboratoire
- Doit être dépourvue de contaminants (urine, eau de toilette)
- Éviter de contaminer l’extérieur du contenant
- Conserver à la température spécifiée (2-8°C)
Décrire les étapes préparatoires à une collecte de salive
Modifier la routine le moins possible, mais :
- 24h avant : pas d’exercice ou de stress intenses
- 12h avant : pas d’alcool
- 3h avant : À jeun (eau permise en quantité modérée)
- Pas de tabac, gomme, activité physique
- 1h avant : ne pas se brosser les dents
- 10 mins avant : Se rincer la bouche avec de l’eau
Ne pas stresser le patient (mesure du cortisol…)
Décrire les mécanismes impliquant le transport du fer entre les organes
- Les cellules réceptrices ont un récepteur membranaire de la transferrine
- Complexe transferrine/récepteur est internalisé dans une vésicule
- La vésicule s’acidifie et relâche le fer de la transferrine
- L’apotransferrine retourne à la membrane et est relâchée
- Le fer dans la cellule peut être utilisé ou entreposé sous forme de ferritine
Décrire l’hématopoïèse des érythrocytes
- Pronormoblastes
- Normoblastes basophiles
- Normoblastes polychromatiques
- Normoblastes orthochromatiques
- Réticulocytes (érythrocytes polychromatiques)
- Érythrocytes
Décrire l’impédence électrique
- Les cellules passent à travers une fente
- Les cellules sont dans un milieu conducteur
- Lorsque les cellules passent dans la fente, il y a une diminution du courant correspondante (ddp)
- Cellules passent normalement 1 à la fois
*Méthode de référence
Décrire le processus à suivre pour l’interprétation générale des lames de frottis sanguin
- Taille, forme, apparence des cellules
- Coloration des RBC (estimation de teneur en Hb)
- Différents types de WBC et leur % relatifs
Définir l’hématopoïèse.
Mécanisme par lequel l’organisme produit et remplace les éléments figurés du sang (les globules rouges (GR), les globules blancs (GB) et les plaquettes).
Définit le terme hémolyse
destruction des membranes des erythrocytes et relarguage conscéquent de l’hémoglobine
Définit le terme phlebotomie
processus de collect du sang
Définit le terme plasma
Le plasma est le composant non-cellulaire du sang complet sans coagulation après que les composantes cellulaires ont été retirées.
Définit le terme variable préanalytique controlable
éléments affectant l’analyse où il est possible d’intervenir: exercice, dièt, posture, alitement prolongé, stresse, medication, alcool, tabagisme, consommation d’herbes naturelles
Définit le terme véniponcture
Toutes les étapes impliquant l’obtention d’un échantillon de sang approprié et identifier de la veine d’un patient
Décrire l’absorption de la vitamine B12
- Protéine salivaire lie la B12
- Complexe acheminé dans l’estomac
- Dans l’estomac, le facteur intrinsèque lie la Vit B12
- Absorption du complexe FI-B12 dans l’intestin
Discuter de l’éthiologie et de la physiopathologie de l’anémie pernicieuse
Éthiologie : Maladie auto-immune (vs cellules pariétales ou facteur intrinsèque)
Physiopathologie :
- Déficit en vitamine B12
- Érythropoïèse inefficace (RBC meurent dans la moelle osseuse)
- Anémie macrocytaire
Discuter de l’éthiologie et des signes/symptômes de la démyélinisation du SNC
Éthiologie :
- Déficience en Vit B12 (impliqués dans la synthèse des neurotransmetteurs)
- 75-90% des personnes avec déficit en B12
S/Sx :
- Perte de sensation au niveau des extrémités
- Spasmes musculaires et paralysie
- Confusion et désorientation
- Démence (lorsque très sévère)
Discuter de la régulation du fer
- Absorption du Fe2+ a/n duodénal
- Vit C importante pour convertir Fe3+ en Fe2+
- Entrée du Fe2+ via différents transporteurs
- Fer entreposé dans les cellules sous forme de ferritine
- Fer exporté du côté basal via la ferroportine
- La sortie du fer de l’entérocyte est contrôlée par l’hepcidine (synthétisée par le foie)
- Hepcidine bloque et dégrade la ferroportine
- L’ion Fe2+ est rapidement oxydé en Fe3+ par l’héphaestine
- Liaison de Fe3+ à l’apotransferrine pour former la transferrine
Discuter de la structure de la ferritine
- Coquille avec noyau de fer
- Coquille = apoferritine
- Composé de 24 chaines légères/lourdes
- Proportions chaînes H/L varie selon type cellulaire
- Fer entreposé sous forme de noyau cristallin
Discuter de l’élimination du folate
- Excrété dans la bile et réabsorbé par la circulation entérohépatique
- Le folate non lié est filtré par le glomérule et réabsorbé par le tubule proximal
- 0,5-1% du folate est excrété par jour (urine-fèces)
Discuter des effets d’une mauvaise conservation d’un échantillon pour un test de glucose
DIminution du glucose de 0,6 mmol/L par heure si la concentration initiale est entre 4,1 et 5,6
Discuter des effets d’une mauvaise conservation d’un échantillon de gaz sanguin
- PCO2 augmente 1 mmHg / heure (si 7,35-7,45)
- PO2 diminue 2 mmHg / heure (si > 80 mmHg)
- pH diminue 0,03 / heure (si 25-45 mmHg)
Discuter du préanalytique de la ferritine
- Sérum ou plasma
- Stabilité
- < 24h à 20-25°C
- 7 jours à 4-8°C
- > 1 an à -20°C
Discuter du préanalytique pour le dosage de la transferrine
- Dosage dans sérum, plasma ou sang total
- Stabilité
- 1 semaine 20-25°C
- 1 semaine 4°C
- 6 mois congelé à -20°C
Discuter du préanalytique pour le dosage de la vitamine B12
- Jeûne de 24h
- Pas de suppléments ni d’injections pendant 2 semaines avant prélèvement
- Sérum/plasma
- Stabilité
- 3 jours 20-25°C
- 7 jours 2-8°C
- > 3 mois -20°C
Discuter du préanalytique pour le dosage du fer
- Jeûne de 12h avant prélèvement
- Prélever avant midi
- Pas de suppléments de fer 24h avant dosage
- Sérum (pas de plasma EDTA)
- Stabilité :
- 1 semaine 20-25°C
- 3 semaines 2-8°C
- > 1 an congelé -20°C
Discuter du préanalytique pour le dosage du folate
- Jeûne de 8h
- Pas de suppléments d’acide folique pendant 2 semaines
- Plasma (pas EDTA)/sérum
- Sang total si folate intra-érythrocytaire
- Stabilité :
- 7 jours 2-8°C
- >30 jours congelé -20°C
Discuter du principe analytique pour le dosage du fer
- pH du sérum est diminué (milieu acide) pour libérer le Fe3+ de la transferrine
- Fe3+ réduit en Fe2+
- Fe2+ lie un chromogène pour former un complexe qui absorbe à 550 nm
- Chromogènes : Ferrozine ou bathopénanthroline
- Lire absorbance à 550 nm
- Interférence hémolyse
Dissociation of the reticulocyte count and the immature reticulocyte fraction is typical of which condition?
a. Acquired hemolytic anemia
b. Blood loss
c. Chronic renal disease
d. Dyserythropoietic anemia
e. Iron deficiency anemia
D
Donc la FSC permet de:
1.D’évaluer la quantité de GR dans le sang : Érythrocytes et Hct
2. D’évaluer la grosseur du GR : VGM
3. D’évaluer la quantité, la teneur et la concentration
d’ Hb dans les GR via :
* l’ Hb
* le CGMH
* le TGMH
4. D’évaluer l’intensité de production des GR :
Réticulocytes
5.D’évaluer les autres types cellulaires sanguines GB
et plaquette
Donner l’ordre d’affinité pour l’O2 selon la quantité d’Hb
Hb < Hb (O2) < Hb (O2)2 < Hb (O2)3 < Hb (O2)4
Donner un exemple de cycle circadien, circanuel, infradien et ultradien
- Circadien : Cortisol
- Circanuel : Vitamine D
- Infradien : Cycle menstruel
- Ultradien : Hormone de croissance
donnez quelques exemples d’Hb instables.
- Hb Genova
- Hb Köln
- Hb Bristol
- Hb Seattle
Est-ce que dans l’hémoglobinose C il y a des cellules cibles?
oui (30-100%)
Est-ce que dans l’hémoglobinose E il y a des cellules cibles?
oui
Est-ce que dans l’hémoglobinose H il y a des cellules cibles?
oui
For urine collections, which of the following is true?
a) Samples should be kept at room temperature for a timed collection.
b) Special identification of the patient may be required for forensic purposes.
c) Identification of added preservative does not need to be communicated to the patient because all are safe.
d) For a 24-hour collection, the patient may collect into a rinsed milk jug and then pour the sample into the provided container at the end of the collection period.
e) No special handling is required because of collection preservative if the sample is sent to another laboratory.”
B
For which disorder is the reticulocyte hemoglobin content most useful?
a. Acquired hemolytic anemia
b. Blood loss
c. Megaloblastic anemia
d. Monitoring response with erythropoietin
e. Uncomplicated chronic renal disease
D
Hb Bart hydrops fetalis results from:
a. Point mutations of 3 a genes
b. Deletion of two a genes
c. Deletion of four a genes
d. Deletion of three a genes
e. Deletion of two a genes/b°
C
Vrai ou faux : Les troubles hématologiques affectent directement l’hématopoïèse
VRAI
Hemolysis is defined as:
a) increased lipids in the blood that give the serum a milky appearance.
b) excess bilirubin in serum that give it a greenish-yellow appearance
c) plasma that has been allowed to clot over time
d) damage to red blood cell membranes leading to release off the contents of red cells into the plasma.
D
Identify the correct tube (additive)/biochemical action below:
a) Lavender (EDTA)/anticoagulated specimen that will limit effects on cell morphology
b) Light blue (ACD)/chelation of calcium to allow effective coagulation testing
c) Red (no additive, no gel)/serum sample that can be sampled directly by many analyzers
d) Light green/no gel/sodium–heparin tube that can be used to prevent any further cellular activity that might affect analytes such as glucose
A
Identify the incorrect scenario related to specimen collection below.
a) Ask a parent to name a pediatric patient
b) Ask an adult patient to state his or her name and another identifier
c) Show the patient or parent the labeled tube after collection is complete
d) Check the room and bed number of the patient to be collected and proceed with collection
e) Per any local policy, contact a translation service if your patient has been identified either in the electronic system or personally as non–local speaking.
C
Quelle est la première indication d’une anémie macrocytaire?
Présence de neutrophiles hypersegmentés ou de macro-ovalocytes dans le frottis sanguin
VGM > 100 fL
L’anémie se définit comment?
(Hb)
taux d’Hb < à la normale
La FSC permet d’évaluer :
- La quantité de RBC dans le sang : Hct, RBC
- La grosseur des RBC : VMG
- La quantité, la teneur et la concentration dans les RBC : Hb, CGMH, TGMH
- L’intensité de production des RBC : Réticulocytes
- D’évaluer les autres types de cellules sanguines : WBC, plaquettes
La glucose-6-Phosphate déshydrogénase est la première enzyme de quelle voie?
Voie des hexoses monophosphates (shunt des pentoses)
La liaison d’une molécule d’O2 à l’ Hb : Diminu ou augmente l’affinité des autres sites pour l’O 2 (comparativement à la forme T) ?? (ce phénomène de ‘‘tout ou rien’’ est appelé : coopérativité !!!)
augmente
La polycythémie se définit comment?
(Hb)
taux d’Hb > à la normale
La synthèse de quel variant d’Hb est entravaé dans une beta-thalassémie?
HbA
Le dosage des érythrocytes totaux servent pour l’évaluation de quels autres paramètres/indices de l’hémogramme?
- Hct
- VGM
- TGMH
Le dosage des érythrocytes totaux servent pour l’évaluation de quels autres paramètres/indices de l’hémogramme?
- Hct
- VGM
- TGMH
Le gène de la glucose phosphate isomérase est sur quel chromosome?
Chromosome 19
Le gène de la glucose-6-Phosphate déshydrogénase est sur quel chromosome?
Le chromosome X
Lequel des variant de l’Hb est souvent découvert fortuitement lors d’une grossesse par exemple?
L’HbH (un variant qui n’est pas vraiment un variant puisqu’il n’est pas issus d’une mutation sur la chaine bêta, mais plutôt d’une alpha-thalassémie avec 3 gènes inactifs sur 4)
Les conditions pré-analytiques sont nombreuses et influencent les tests effectués au laboratoire de biochimie clinique. Nommer au moins 2 conditions pré-analytiques reliées au patient (variables et invariables), 2 conditions reliées au prélèvement et 2 conditions reliées à la composition du spécimen (endogène).
“Patient : Diet (ex : betterave = urine rouge, suppléments de biotin peut interféré avec immuno essai), ethnie, âge et genre.
Prélèvement : moment du prélèvement (matin, à jeun,), position du corps et du garrot,
Composition : urine vs sang vs salive
Les différentes classes de déficit en glucose-6-phosphate déshydrogénase sont classées selon quel paramètre?
Leurs effets cliniques :
- Classe I : mutations de la classe des anémies hémolytiques non sphérocytaires chroniques
- Classes II à IV
L’Hb varie en fonction de quels paramètres (propre au patient) ?
- Sexe (F > H)
- Âge (Augmente avec l’âge <65 ans)
- Période de la journée (soir diminué)
- Conditions environnementales
- Conditions physiologiques et physiopathologiques
L’HbH a-t-elle une affinité plus faible ou plus élevée pour l’O2 (p/r à HbA)?
Plus forte
L’hypochromie est associée à quelles conditions?
- Anémie ferriprive
- Thalassémies (RBC augmentés pour palier au manque d’Hb)
- Possibilité de problème technique si CGMH faible pour plusieurs patients
List the general effects on analytes caused by prolonged venous occlusion with a tourniquet.
augmentation du potassium, protéines totales, fer, lactate (idéalement sans garrot)
List the general effects on analytes caused by pumping a fist before venipuncture:
Augmentation de la concentration du potassium, phsophate, calcium et lactate
Diminution du pH
Lors de l’évaluation de l’Hb par électrophorèse capillaire, l’Hb est séparée en fonction de quels paramètres?
Électroendoosmose
- Charge de l’Hb
- Taille de l’Hb
- Force ionique
- pH du tampon
- Nature du support
Lorsqu’on interprète une FSC, à quel moment faut-il considérer la présence d’une thalassémie?
- # RBC > LSN
- VGM < p/r à Hb
- DVE, ferritine et réticulocytes normaux
- Réticulocytes augmentés si beta-thal majeure
- Présence de certains types cellulaires atypiques :
- Cellules cibles
- Faucilles
- Ovalocytes
- Sphérocytes
- Cellules avec corps d’Howell Jolly
L’ Hb libère l’O 2 au niveau des tissus, car :
- La pression partielle en O 2 est ↓
- L’affinité de l’ Hb pour l’O 2 est ↓
L’Hb se sature en O 2 au niveau des capillaires pulmonaires, car :
pO2 est ↑
L’affinité de l’Hb pour l’O2 est ↑
MCV of , < 80 is seen in which of the following entities?
a. Iron deficiency anemia
b. Thalassemia
c. Lead poisoning
d. Some cases of anemia of chronic inflammation
e. All of the above
E
Nommer 2 maladies causées par un déficit en Vit B12
- Anémie pernicieuse
- Démyélinisation du SNC
Nommer 3 enzymes de la voie des hexoses monophosphates
- Glucose-6-phosphate déshydrogénase
- Phosphogluconate déshydrogénase
- Glutathion réductase
- Glutathion synthase
Nommer 4 enzymes de la voie d’Embden-Meyerhof
- Hexokinase
- Glucose phosphate isomérase
- Phosphofructokinase
- Fructose diphosphate aldolase
- Triosephosphate isomérase
- Phosphoglycerate kinase
- Diphosphoglycérate mutase
- Pyruvate kinase
Nommer d’autres matrices pouvant être prélevées et analysées
- Cheveux
- Ongles
- Moelle osseuse
- Biopsie
Nommer des agents oxydants qui peuvent déclancher une crise hémolytique chez une personne atteinte d’un déficit en glucose-6-phosphate déshydrogénase
- Rx (aspirine, quinolones, sulfamides)
- Fèves (haricots de fava)
- Soya
- Pollen
- Infection aiguë
- Légumes ou boisson contenant de la quinine
Nommer des causes d’anémies non-mégaloblastiques non-régénératives
Anémie causée par :
- Alcoolisme
- Hypothyroïdie
- Maladie hépatique
- Anémie sidéroblastique
- Aplasie des RBC
Nommer des caractéristiques de l’évaluation de l’Hb de l’électrophorèse sur capillaire
- Les Hb se déplacent en fonction de leur charge, de la taille de la molécule, de la force ionique, du pH du tampon et de la nature du support.
- Bonne performances pour doser les principales Hb, ainsi que les fractions mineures (HbA2 et F).
- Technique ayant moins d’interférences associées aux différents variants d’Hb.
- Bonne séparation entre l’HbA2 et l’HbC comparativement à l’approche par HPLC.
- Peut nécessiter une autre technique de confirmation (électrophorèse capillaire, séquençage d’ADN).
Nommer des caractéristiques de l’évaluation de l’Hb sur gel d’agarose
- La structure spatiale de l’Hb dépend de la nature et de la séquence des acides amines constituant les chaines.
- Les Hb se déplacent en fonction de leur charge, de la taille de la molécule, de la force ionique, du pH du tampon et de la nature du support.
- Les variants de l’ Hb sont dus a des mutations de certains acides amines entrainant des charges de surface différentes et donc des mobilités différentes en électrophorèse.
Nommer des caractéristiques de l’évaluation de l’Hb sur HPLC
- séparées par un gradient de tampons de force ionique et de pH croissants.
- Identification présomptive des variants les plus courants (HbS ,HbC ) faite par leur temps d’élution à l’intérieur de « fenêtres » définies par le manufacturier. Il existe quelques livres de références pour l’interprétation des profils.
- D’autres variants pouvant coéluer avec les Hb anormales.
- Peut nécessiter une autre technique de confirmation(électrophorèse capillaire, séquençage d’ADN).
Nommer des conséquences cliniques en cas d’anomalies liées aux RBC
-
Troubles anémiques (diminution de Hb)
- S/Sx : pâleur, fatigue, faiblesse
- Hémolyse : Destruction précoce des RBC (réticulocytes +++)
- Drépanocytose (anémie falciforme) : polymérisation de l’HbS suite à une désoxygénation (hypoxie)
- Polycythémie (nbre RBC augmenté)
- Polycythémie vraie : trouble de la moelle osseuse (rare)
- Polycythémie secondaire : réponse à un apport en O2 limité
- Cyanose : coloration bleutée (peau, muqueuse) lorsque le sang contient > 5% de déoxy-Hb
Nommer des considérations à prendre en compte lors du pré-analytique
- Vérification de l’identité du patient (double ID)
- État du patient (+/- jeûne)
- Prélèvement (type de contenant à utiliser)
- Intégrité du spécimen (centri lumiète, T°)
- Étiquettage des échantillons prélevés
- Vérification des recommandations pré-prélèvement (arrêt de Rx, consommation d’aliments, …)
- Distribution et enregistrement des demandes (envoi au labo)
- Au labo : centri, aliquot, pré-Tx
Nommer des exemples d’anémies microcytaire
- Anémie ferriprive
- Anémie associée à des maladies chroniques
- Moins de production de l’Hème?
- Traits thalassémiques
- Variants de l’Hb
- Bêta-thalassémie (-/-)
- Seulement HbF avec forte affinité pour O2
- Syndrome de l’HbE
- Syndrome de l’HbC
- Anémie sidéroblastique
- Défaut de synthèse de l’hème
- Incapacité à fixer le fer
- Elliptocytose
- RBC en forme d’éllipse (anomalie du cytosquelette)
- Pyropoïkilocytose
- Fragilité des RBC
Nommer des variables non-contrôlables reliées au patient
- Âge, sexe, ethnie, obésité
- Stress, fièvre, cycle menstruel
- Grossesse, cécité
- Transfusion ou infusion de liquide (soluté)
- Facteurs environnementaux (soleil, altitude, T° ambiante)
Nommer des variables reliées au patient qui sont contrôlables avant le prélèvement
- Stress
- Position/posture
- Alimentation
- Tabagisme
- Alcool
- Rx
- Herbes naturelles
- Exercice
Nommer différentes interférences pré-analytiques en lien avec le prélèvement par le personnel soignant
- Garrot :
- Stase prolongée augmente certains analytes (protéines, fer, lactate)
- Soluté du patient :
- Dilution de l’échantillon si prélevé dans la ligne de soluté (normalement flush 2 tubes avant)
- Interférence associée à la composition du soluté
- Hémolyse de l’échantillon
- Mauvaise technique de prélèvement (LDH, K+ augmentés)
- Hémolyse in vivo
- Récipient incorrecte pour l’échantillon
- Transfert de tube
- Échantillon avec volume insuffisant
- Dilué si additif dans le tube
- Volume insuffisant pour effectuer toutes les analyses demandées
(*) aussi délai de manipulation de l’échantillon et conservation des échantillons (plus pour le labo)
Nommer différents prétraitements que peuvent subir les échantilllons lors de leur arrivée au laboratoire
- Centrifugation
- Décantation (séparation)
- Aliquotage
- Extraction
- Précipitation
- Ajustment du pH
Nommer différentes causes d’anémie macrocytaire
- Anémie de Biermer (pernicieuse)
- Gastrectomie
- Désordre génétique de synthèse d’ADN
- Rx interférant avec synthèse d’ADN
- Diète pauvre en B12
- Maladie de l’iléon
- Prolifération bactérienne des bactéries intestinales
- Malabsorption de la B12 associée aux Rx
- Diète pauvre en folates
- Grossesse
- Hémolyse chronique
- Résection jéjunale
Nommer différents types d’anémie normocytaire
- Hémolyse
- Anémie hémorragique
- Insuffisance rénale (synthèse EPO)
- Insuffisance hépatique
- Insuffisance endocrinienne
- Déficience en fer récente
- Aplasie des RBC
- Syndrome myélodisplasique
- Désordre d’infiltration (leucémie, myélome, myélofibrose, métastases)
Nommer différents types de liquides pouvant être prélevés (5)
- LCR
- Liquide synovial
- Salive
- Sperme
- Sueur
- Lait maternel
- Amniotique
- Sucs gastriques
Nommer différents types d’échantillons sanguins
- Capillaire
- Artériel
- Veineux
Nommer différents types d’échantillons urinaires
- Aléatoire
- Collecte (8, 12, 24h)
- Première urine du matin
Nommer et décrire les 3 principales voies métabolique des GR
1.Voie glycolytique d’Embden-Meyerhof (glycolyse anaérobie): voie glycolytique qui transforme une molécule de glucose en pyruvate. L’objectif ici est de générer l’ATP et le NADH.
2.Voie des hexoses monophosphates (shunt des pentoses) : production de (NADPH) utilisée pour la réduction du glutathion. Le NADPH est un cofacteur essentiel de la glutathion réductase, l’enzyme qui réduit le glutathion oxydé (GSSG) en glutathion réduit (GSH). Ce dernier est essentiel au maintien de l’état redox de la cellule.
3.Voie de Rappoport-Luebering : Voie contournée de la glycolyse. permet la production de 2,3-DPG qui permet de moduler l’affinité de l’Hb pour l’O2.
Nommer et décrire les 5 conséquences cliniques d’anomalies associées aux GR
1.Troubles anémiques : ↓ de l’Hb ce qui entraîne fatigue, pâleur, faiblesse, etc.
2. Hémolyse : destruction des GR survenant précocement (<120 jours)
3. Drépanocytose ou ‘‘ Sickle Cell ’’ (anémie falciforme) : polymérisation de l’HbS (variant d’Hb) suite à une désoxygénation (Hypoxie !!!)
4. Polycythémie ↑ du nb de GR
* Polycythémie vraie : rare trouble de croissance de la moelle osseuse.
* Polycythémie secondaire : réponse à un apport d’O2 limité attribuable au tabagisme et à un séjour à haute altitude.
5. Cyanose : coloration bleutée que prend la peau et les muqueuses lorsque le sang contient plus de 5% d’Hb désoxygénée.
Nommer et décrire les différentes formes d’hémoglobines
Pour chacune des hémoglobines ci-dessous, identifier celles qui peuvent transporter efficacement l’oxygène.
Carboxyhémoglobine (COHb): forme d’hémoglobine combiné au monoxyde de carbone et inapte au transport de l’oxygen
Désoxyhemoglobine (HHb): forme d’hémoglobine non lié à l’oxygène
Méthémoglobine (MetHb): produit de l’oxydation dans lequel le fer est passé de l’état ferreux à ferris (Fe3+) incapable de fixer l’oxygène
Oxyhémoglobine(O2Hb): forme d’hémoglobine liée à l’oxygène
Sulfhémoglobine (SHb) Forme d’hémoglobine liées irréversiblement à l’hydrogène sulfuré suite à l’exposition à des composés soufrés.
Cyanométhémoglobine: Produit de la transformation in vitro de l’hémoglobine par l’acide cyanhydrique
Nommer la seule enzyme de la voie Rappoport-Luebering
Diphosphoglycérate mutase
Nommer les 5 erreurs pré-analytiques les plus fréquentes
- Volume insuffisant dans le tube
- Erreur d’idenfitication du patient
- Mauvais tube/contenant utilisé
- Erreur de test prescrit sur les requêtes
- Tube vide ou manquant
Nommer les causes d’anémie macrocytaires associées un déficit en folate
- Grossesse
- Diète pauvre en folate
Nommer des causes d’anémies mégaloblastiques qui ne sont pas associées à un déficit en B12 et folate
- Désordre génétique de synthèse de l’ADN
- Rx interférant avec la synthèse d’ADN
Nommer les anémies normocytaires non-régénératives
- Anémie dûe à une maladie rénale, hépatique et insuffisance de la thyroïde
- Aplasie des RBC
- Anémie dûes à un déficit en fer (ferriprive, associée à une maladie chronique)
- Anémie causée par un syndrome d’infiltration
Nommer les anémies normocytaires régénératives
- Hémolyse
- Anémie hémorragique
Nommer les différentes causes d’une anémie sidéroblastique
- Héréditaire
- Acquise (alcool, intoxication Pb/Zn, Rx)
- Désordre myéloprolifératif
- Incapacité à lier le fer malgré un taux de fer normal
- Défaut de synthèse de l’hème
Nommer les différentes étapes du circuit schématique des échantillons
- Question clinique
- Requête d’analyses
- Prélèvement du patient
- Envoi au labo
- Réception et identification
- Analyse
- CQ
- Recueil des résultats
- Interprétation des résultats
- Compte rendu (rapport d’analyse)
- Dx si possible
Nommer les différentes étapes du préanalytique (jusqu’à l’étape analytique)
- Demande d’analyse
- Préparation du patient
- Prélèvement
- Acheminer échantillon au labo
- Gestion de l’échantillon jusqu’à l’analyse
Nommer les différentes méthodes électrophorétiques pour l’évaluation de l’Hb
- Électrophorèse capillaire
- HPLC
- Électrophorèse sur gel (agarose, isofocalisation, acétate de cellulose)
Nommer les différents anticoagulants utilisés comme additifs dans les tubes de prélèvement
- EDTA (di ou tripotassiques)
- Citrate
- Héparine (sodium ou lithium)
Nommer les différents types d’Hb chez l’adulte et les pourcentages associés
- HbA (alpha2-Bêta2) : 97%
- HbF (alpha2-gamma2) : < 1%
- HbA2 (alpha2-delta2) : 1,5-3%
Nommer les principales interférences analytiques qui conduisent à l’hyperchromie (Faux +)
- Hyperlipidémie
- Patient traité avec forte concentration d’héparine
- Cryoglobulinémie
- RBC > 75 000 / cm3
Nommer les règles d’auto-vérification de l’hémogramme (règle des 3)
- Hb x 3 = HCT +/- 3%
- RBC x 3 = Hb
- Hct x 100 000 = RBC
* si non concordance : taille, forme en cause?
Nommer l’ordre des tubes à respecter lors du prélèvement. Expliquer ce qui le distingue (additifs), le mécanisme d’action, l’utilité et les analyses à proscrire. (List five different commonly used blood collection devices (vacuum test tubes) and the nature and function of their additives. For each collection device type, provide examples of analytes that they are commonly used for, and examples of analytes they cannot be used for and the rationale for this decision. (CACB anal 2002 Bi))
- Tubes Hémoculture / tubes sans additif
- Tubes de coagulation
- Sérum avec ou sans gel
- Héparine avec ou sans gel
- EDTA
- Pour le glucose (fluorure de Na+)
- Autres types de tubes
Nommer quelques analyses qui sont affectées par la prise d’un repas (augmentation de leur concentration)
- CHOL
- TRIG
- pH
- gastrine
- glucose
- GH
- Insuline
- Ca ionisé
Nommer quelques analyses qui sont affectées par la prise d’un repas (diminution de leur concentration)
- Phosphore/phosphate
- Potassium
- Chlorures
Nommer quelques analyses qui sont affectées par le jeûne (diminution de leur concentration)
- Glucose
- Insuline
- pH
- HCO3
- urée
- GFR
- Cortisol urinaire
- pCO2
Nommer quelques analyses qui sont affectées par le jeûne (augmentation de leur concentration)
- Corps cétoniques
- Acides gras libres
- glycérol
- TRIG
- Cholestérol
- Lipolyse, cétogenèse
Nommer un agent qui stimule et un qui inhibe l’activité de la ALA synthétase
- Stimulant : EPO
- Inhibant : Hb
Nommez des associations dans les drépanocytoses?
”* Fréquent : HbS et β Thalassémie (β0 ou β+) ou HbC
* Plus rares : Hb SO Arab ; HbSD ; HbSE ; HbS Lepore”
Nommez les principales formes d’Hb anormales qui sont formées en quantités importantes et dont la synthèse n’est pas entravée lorsque les chaines alpha sont déficitaires.
l’HbH (β4)
L’Hb Bart’S (γ4)
Où est synthéthisé l’Hb?
mitochondrie des GR en formation
Où le folate est-il mis en réserve dans le corps?
RBC et hépatocytes (50/50)
Où s’effectue l’hématopoïèse (foetale et adulte)?
*Foetale : sac vitellin (tissu conjonctif mésoblastique) jusqu’au 2 ième mois, puis le foie et la rate jusqu’au 6 ième mois, pendant qu’à partir du 4 ième mois s’installe l’hématopoïèse osseuse.
*Adulte : Moelle osseuse limitée aux os courts, os plats, têtes des os longs:
1)Crâne; 20%
2)Thorax (sternum, côtes, vertèbres, clavicules,omoplates); 30%
3)Rachis lombaire et ceinture pelvienne (sacrum, os iliaques); 40%
4)Fémur; 10%
Patients should be cautioned against pumping their fists after the tourniquet is applied because
a) it may or may not cause venous stasis, which is not under the control of the collector.
b) it will affect the chemical interaction between the additive in the tube and the patient’s blood.
c) metabolic activity of the blood and muscles will affect analytes such as potassium and calcium through effects on pH and possibly creatine kinase.
d) it will affect the distribution of analytes between plasma and serum.
C
Pourquoi et comment le VGM peut-il être utilisé pour identifier des interférences en biochimie?
Le VGM est un paramètre très stable (+/- 3 fL en 5 jours)
- Permet d’identifier la justesse de l’échantillon en validation (ID erreur patient)
- Excellent indicateur pour le prélèvement dans un soluté
- VGM très augmenté
Propidium iodide staining is useful in determining which parameter?
a. Cell viability
b. Granularity index
c. Lymphocyte index
d. Neutrophil count
e. Platelet clumping
A
Qu’est-ce que le VGM et à quoi sert-il?
Volume Globulaire Moyen (VGM) et est l’ndice des GR le plus utile de sa catégorie
*Normocytaire (VGM normal)
*Microcytaire (VGM diminué)
*Macrocytaire (VGM augmenté)
Le VGM est la valeur moyenne du volume de chaque GR établie à partir d’une courbe de distribution
de ceux ci (ex : méthode par impédance)
*Permet de guider le biochimiste clinique lors de sa validation de rapports dans différents secteurs dont celui de la biochimie générale. En effet, le suivi du VGM permet d’identifier la justesse de l’échantillon en validation.
*Le VGM est un paramètre très stable (en condition normal, le VGM, lorsque comparé à sa valeur antérieur, ne devrait pas changer de plus de ±
3fL sur une période de 5 jours).
* Excellent indicateur que le prélèvement a été fait dans une ligne de soluté.
*Il est noter que certains facteurs peuvent ou ↓ le VGM, mais lesquels?
Qu’est-ce que le TGMH et à quoi sert-il?
Teneur Globulaire Moyenne en Hémoglobine (TGMH)
Cela correspond à la quantité moyenne d’Hb contenue dans un seul GR
Intérêts :
*Sert à la classification de l’anémie (selon l’OMS)
*État hypochromique vs état normochromique
*Indice ayant un peu moins d’utilité clinique, car il suit typiquement les variations du VGM
Qu’est-ce que une hémoglobinopathie qualitative et décrivez la en donnant des exemples.
variants de l’ Hb
Modifications héréditaires structurelles de chaînes isolées d’ Hb (liées à des mutations des gènes). Il existe plus de 1000 variants de l’ Hb .
*Drépanocytose : HbSS
*Hémoglobinose SC : HbSC
*Hémoglobinose C : HbCC
* Hémoglobinose E : HbEE
* Etc.
Qu’est-ce que une hémoglobinopathie quantitative et décrivez la en donnant des exemples.
Thalassémies
Groupe de maladies héréditaires caractérisées par la ↓ ou l’absence de production des chaînes de globines
*Thalassémie-β ↓ synthèse de chaîne β
*Thalassémie-α ↓ synthèse de chaîne α
*Thalassémie-δ ↓ synthèse de chaîne δ
Qu-est-ce qui stimule et inhibe la synthèse de l’Hb?
Inhibée par l’Hb elle même
Stimulée par l’érythropoïétine
Quelle est le type d’anémie lorsqu’il y a déficience en l’une des 2 isoenzymes d’hexokinase?
Anémie hémolytique avec présence d’anisocytose
Que ce passe-t-il d’un point de vu métaboliques chez les patients déficient en hexokinase?
Le glucose n’est pas métabolisé en G-6-P
Que ce passe-t-il (clinique) lorsqu’il y a déficience pour les deux enzymes de la synthèse du gluthation (gamma-glutamyl cystéine synthase et glutathion synthétase (GSH-S))?
Anémie hémolytique chronique (aggravée par la prise de médicaments ou d’aliments oxydants).
Que contient un GR adulte “normale”?
(Hb)
~97% d’HbA : composé de 2 chaînes α et 2 chaînes β (α2β2)
~1,5 - 3,6% d’ HbA 2 : composé de 2 chaînes α et 2 chaînes δ (α2δ2)
<1% d’HbF : composé de 2 chaînes α et 2 chaînes γ(α2γ2)
Que permet d’évaluer la mesure des érythrocytes totaux?
l’hématocrite, du VGM et du TGMH
Que peut être la cause d’une diminution du TGMH?
Carence en :
*Fer
*Cuivre
*Pyridoxine (vitamine B6)
*Vitamine C
Que peut-on doser spécifiquement au laboratoire de biochimie dans le cas d’un déficit en glucose phosphate isomérase?
Le NADPH
- Dosage colorimÉtrique à 340 nm
Que peut-on observer lors du frottis sanguin chez une personne atteinte de la maladie de l’HbSC?
- Cellules cibles
- Cellules repliées
- Parfois drépanocytes
- Parfois cellules contiennent des cristaux d’Hb (HbC)
Que peut-on observer sur le frottis d’un patient atteint d’hémoglobinose C?
- Cellules cibles (30-100%)
- Cristaux d’Hb
- RBC normocytaires
Que peut-on observer sur le frottis d’un patient atteint d’une hémoglobinose H?
- RBC balles de golf
- RBC microcytaires
- Fragments de RBC
- Cellules cibles
Que peut-on observer sur l’électrophorèse de l’Hb chez une personne atteinte de la maladie de l’HbSC?
Les pics de HbC et HbS sont équimolaires à l’électrophorèse
Que se passe-t-il au laboratoire pour un désordre en hexokinase?
FSC:
* Réticulocytes↑
* VGM ↑
* Anisocytose, polychromes et poikilocytose
* Analyse moléculaire et génotypage (conseil génétique)
* Évaluation des autres causes rares d’anémie hémolytique non sphérocytaire héréditaire chronique
Que signifie “anisocytose”?
Anomalie de taille
- Microcytes
- Macrocytes
Que signifie “poïkilocytose”?
Anomalie de forme
Que signifie “variant de l’Hb”?
C’est une modification héréditaire structurelle de chaines isolées de l’Hb (mutation gènes)
Que veut-on dire par une variation circanuelle?
Un analyte qui a une variation cyclique et prévisible d’environ 1 an (+/- 2 mois). Ex : Vit D
Que’est- ce que le CGMH et à quoi sert-il?
Concentration Globulaire Moyenne en Hémoglobine (CGMH)
Cela correspond à la Hb ] moyenne retrouvée dans 1000 mL de GR
Intérêts : Permet d’identifier une hypochromie d’une normochromie . On a une hypochromie, si la valeur est < 325 g/L (ceci est toutefois très rare).
Quel autre nom donne-t-on à un déficit en glucose-6-phosphate déshydrogénase?
Favisme
Quel autre test biochimique supplémentaire peut-on effectuer pour supporter un diagnostic de déficit en glucose-6-phosphate déshydrogénase? Quel détail ce dosage peut-il nous fournir?
Le dosage de la glucose-6-phosphate déshydrogénase
- L’activité résiduelle de la G-6-PD permet de classifier le type de déficit
- Classe I : < 10% résiduelle, anémie sévère, hémolyse chronique
- Classe II : < 10% résiduelle, anémie sévère, hémolyse intermittante
- Classe III : 10-60% résiduelle, anémie modérée, hémolyse suite à un stress oxydant
- Classe VI : 60-150% résiduelle, pas de déficit
- Classe V : > 150% résiduelle, activité accrue
Quel avantage procure le glutathion (vis-à-vis l’Hb)?
Il protège l’Hb et d’autres protéines érythrocytaires contre les dommages de la peroxydation.
Quel enzyme est reponsable de : Réaction bidirectionnelle entre le glucose et le fructose (G-6-P F-6-P). Donc, permet le recyclage des produits de la voie des hexoses monophosphates (shunt des pentoses) en G-6-P.
Glucose phosphate isomérase
Quel est l’effet sur le glucose et le potassium si un échantillon de sang total est mis à 4°C versus 25°C avant la centrifugation?
Potassium sort des cellules à 4°C car pompe Na-K-ATPase ne fonctionne pas pour remettre le K+ dans les cellules donc valeur augmentée
Le glucose est consommé 0,6 mmol/L/heure donc diminué
Quels sont les symptômes cliniques lors d’un désordre de glucose phosphate isomérase?
*Anémie hémolytique variant de modérée à sévère
*L’état chronique génère une anémie importante :
-Jaunisse
-Fatigue
-Splénomégalie
-Cholécystite
-Etc.
*Atteintes neurologiques, retard mental et ataxie mixte sensorielle
Quel est l’intérêt de mesurer les érythrocytes totaux?
*Dx de certaines anémies (ex : anémie ferriprive vs anémie microcytaire de patients thalassémique).
* Anémie ferriprive : dimunution du nb de GR proportionnel à la [Hb]
* Anémie microcytaire Thalassémie : nb de GR (N ou augmenté) relativement au degré d’anémie (représenté par la [Hb])
Quel est l’ordre de prélèvement pour les ponctions articulaires (liquide synovial)?
1.Tube hépariné et stérilisé (microbiologie/culture et coloration de Gram)
2.Tube hépariné ou EDTA (pour le décompte cellulaire)
3.Tube hépariné* ou EDTA* (pour les autres tests, ex.: cristaux)
4.Tube avec NaF (pour analyse du glucose)
Quel est l’ordre de prélèvement pour les ponctions de LCR?
1- biochimie et sérologie car moins affecté par contamination par le sang et les bactéries
2- microbiologie
3- décompte cellulaire
“Quel est la définition de :
a) Patient admis
b) Patient inscrit
c) Patient inscrit-urgent
d) Patient enregistré “
a) Patient admis : patient qui est sur un lit (hospitalisation/hébergement)
b) Patient inscrit : patient inscrit pas à l’urgence pas de lit (ex : chirurgie d’un jour) (pas d’hébergement/hospitalisation)
c) Patient inscrit-urgent : représente exclusivement les usagers inscrits au Service de l’urgence.
d) Patient enregistré : regroupe les usagers recevant des services de type externe aux fins de diagnostic médical se présentant dans un centre de prélèvement.
Quelle est la forme des GR et pourquoi est-ce utile d’avoir cette forme?
disque biconcave (permet optimiser les échanges gazeux) (30% plus de surface qu’une cellule sphérique)
La forme biconcave des GR favorise l’échange d’O2 et de CO 2 a/n des poumons ou des tissus avec l’Hb
Quel est la préparation du patient pour un prélèvement de cortisol salivaire?
pas d’exercise physique intense 24h avant, pas d’alcool 12h avant, à jeun 3h avant, ne pas se brosser les dents 1 h avant. le soir au couché, on rince la bouche avec de l’eau 10 min avant, habituellement sur 2 jours pour faire une moyenne. NE PAS STRESSER le patient
1- Identification du tube (nom date de naissance #dossier)
2- laver les mains
3- ouvrire salivette et retirer tampon en le manipulant le moins possible avec les mains
4- mettre tampon sous la langue (éviter de toucher avec les doigts) et laisser s’impiber completement en le faisant rouler (sans le macher!)
5-remettre dans le contenant (le manipuler avec les doigts le moins possible) et refermer le bouchon
6-inscrire date et heure de collecte
Quel est la voie de synthèse de l’ATP de GR?
glycolyse anaérobique
Quel est l’autre nom de la vitamine B12?
Cobalamine
Quel est l’autre nom pour l’acide folique?
Vitamine B9
Quel est l’avantage de l’évaluation de l’Hb par HPLC p/r aux autres méthodes?
Immense base de données (ID variants avec temps de rétention)
Quel est l’avantage principal de l’électrophorèse capillaire par rapport à l’HPLC pour évaluer l’Hb?
Bonne séparation de HbC et HbA2
Quel est le % d’HbS présent s’il y a 1 gène alpha actifs chez des patients hétérozygotes pour la mutation drépanocytaire?
17-25%
Quel est le % d’HbS présent s’il y a 2 gènes alpha actifs chez des patients hétérozygotes pour la mutation drépanocytaire?
25-30%
Quel est le % d’HbS présent s’il y a 3 gènes alpha actifs chez des patients hétérozygotes pour la mutation drépanocytaire?
30-35%
Quel est le calcul pour le CGMH?
CGMH : Hb / Hct
