Aula 6 - Replicação Do DNA Flashcards
DNA primase/ DNA pol alpha
Sintetiza primers RNA polimerase (doesn’t make sense)
RNase H
Enzima que remove e degrada primers de RNA
Nick
Interrupção na cadeia de DNA por falta de lig fosfodiester entre nucleotideos
DNA ligase
Fecha nick
Estabelece lig fosfodiester
Adição de primers
Procarioticas: primase
Eucarioticas: primase/ DNA polimerase alpha
Formação de cadeias
Procarioticas: DNA polimerase III
Eucarioticas:
Cadeia lagging- DNA polimerase σ
Cadeia leading - DNA polimerase ε
Helicase
6 subunidades
Quebra pontes de H com gasto de ATP
Single stranded dna binding proteins
Ligam a cadeia simples
Mantém abertura da dupla hélice
Proteínas estabilizadoras da DNA polimerase
PCNA (proliferating cell nuclear antigen)
RFC (replication factor C)
PCNA
liga DNA polimerase a cadeias de DNA
Com gasto de ATP
Forma anel heterotrimerico
(Procarioticas: sliding-clamp protein)
RFC
Estabiliza a ligação da PCNA
Com gasto de ATP
(Procarioticas: clamp-loading protein)
Topoisomerase
Forma nicks, alivia sobreenrolamento
Topoisomerase I
Quebra lig fosfodiester na cadeia simples
Rotação de DNA
Sem gasto de energia volta a fechar
Topoisomerase II
Quebra da dupla cadeia de DNA
Separação das cadeias duplas durante divisão celular
Modelo de replicacao
DNA primases RNA polimerase + PCNA + RFC DNA helicase Single stranded binding proteins Topoisomerase RNase H
Mecanismo de reparação
Permitem que só 1 em cada 10^9 nucleotideos sejam incorporados incorretamente
Verificação/proofreading das DNA polimerases
Mecanismo de Mismatch repair
Proofreading da DNA polimerase
Primeiro centro ativo: polimeriza 5’->3’
Segundo centro ativo: polimeriza 3’->5’ , exonuclease
No vírus a forquilha de replicacao
Vai crescendo nos dois sentidos
Bidirecional e simétrico
Origem de replicacao nas bactérias
Seq rica em adenina e timina
São metiladas para não replicar 2 vezes
Está ligada a proteína inibidora q bloqueia acesso a proteínas iniciadoras
Replicacao em Eucarioticas
Múltiplas OR
Mais lento que bactérias
50 nuc/s
Cascatas de sinalização
Regulação de várias OR em simultâneo
ORC (origin recognition complex)
Complexo proteico ligado a OR em células eucarioticas
Junta com proteínas CDC6 e CDT1
Cinase CDK
Ativada perto da fase S
Fosforila proteínas do complexo, desagragando-as
Permite atividade de helicase
Ativa em simultâneo origens de replicacao
Fábricas de replicacao
Focos de ORs
Quem replica primeiro?
Cromatina menos condensada replica antes de heterocromatina
Regiões que são transcritas ativamente
As últimas são os telomeros e o centromero - nao codificantes
O que acontece aos nucleossomas na replicacao?
Os conjuntos de histonas H3/H4 mantém-se unidos e dividem-se equitativamente
Os conjuntos H2A e H2B dissociam-se completamente
São sintetizadas novas histonas
Chaperones de histonas
Trazem as novas histonas
NAP
CAF. ?.?
Reader-writer complex
Lê modificação de histonas H3/H4 que vem da célula mãe
Transferem grupos metilo e acetilo para q genoma mantenha características de modificação de histonas
Telomerase
Enzima com ação transcriptase reversa
Integra sequência de RNA complementar a da extremidade final do telomero, e produz DNA
Forma-se então novo primer e novo fragmento de Okazaki
Evita encurtamento dos telomeros
Células embrionárias/ células estaminais
Há telomerase
São capazes de replicar indefinidamente
Com diferenciação essa capacidade reduz
Células somáticas
Pouca telomerase
Número de replicators limitado
Células senescentes (em envelhecimento)
Quase não tem telomerase
Telomeros tendem a desaparecer
Pode haver fusão de cromossomas o que leva a morte celular
Células tumorais
Muitas tem telomerase
São capazes de se dividir indefinidamente
