Aula 18 - Núcleo Celular

Question 1

Hematoxilina

Answer 1

Corante básico

Evidência componentes ácidos (basofilos)

Question 2

Método de feulgen

Answer 2

Método para corar as moléculas de DNA no núcleo

Hidrólise com ácido clorídrico
Remoção de DNA
Grupos aldeídos livres 
Reação com reagente de Schiff (PAS)
Moléculas de DNA coradas a vermelho

Question 3

DAPI

Answer 3

corante fluorescente azul
Marca núcleos
Usado em imunofluorescencia e Microscopia de fluorescência

Question 4

Isolamento do núcleo

Answer 4

Ultracentrifugacao: o núcleo vai ser o primeiro a sedimentar

Purificação da fração: depois faz-se centrifugação contra gradiente de concentração de sacarose

Question 5

TEM

Answer 5

Permite visualização de:

Invólucro nuclear
Heterocromatina perinuclear e perinucleolar

Question 6

Cromatina constitutiva

Answer 6

Região do DNA que está sempre condensada em todas as células

Question 7

Domínios de heterocromatina + lâmina

Answer 7

Passam a estar associados ao nucleolo

Question 8

Método da contrastação regressiva de EDTA

Answer 8

EDTA: liga e retira catioes bivalentes

Permite ver ribonucleoproteinas

Regiões claras: ricas em DNA, junto do nucleolo e a periferia do núcleo
Regiões escuras: ricas em RNA

Question 9

Funções do nucleolo

Answer 9

Síntese de rRNA
Montagem de Subunidade de ribossomas
Formação e amadurecimento de ribonucleoproteinas por exemplo a telomerase, que é responsável pela replicacao das extremidades dos telomeros

Question 10

Molécula de rna + componente proteica de telomerase

Answer 10

Feita no nucleolo

Question 11

Bromouridina

Answer 11

Integra se no RNA
Ligada a anticorpo fluorescente
Permite localizar os focos de transcrição

Question 12

TEM permite localizar

Answer 12

Fibrilas pericromaticas

Grânulos pericormaticos

Question 13

Fibrilas pericromaticas

Answer 13

Locais de transcrição onde é sintetizado o mRNA e o tRNA no nucleoplasma pela RNA polimerase II e III

Question 14

Grânulos pericromatinicos

Answer 14

Contém transcriptos primários da RNApolimerase II que não sofreram splicing

Question 15

Grânulos intercromatinicos

Answer 15

Locais de reserva de pequenos RNA’s (fatores de splicing que não estão a ser usados)

Question 16

Corpo espiralado ou de Cajal

Answer 16

Constituído por coilina e fibrihina
Contém scaRNA’s

Intervém no:
Amadurecimento e reciclagem dos pequenos RNA’s

Question 17

Corpos nucleares PML

Answer 17

Responsável por:
Ativação de mecanismos de reparação do DNA
Amadurecimento de p53
Modificação de fatores de transcrição

Question 18

Isolamento da matriz celular/ nucleoesqueleto

Answer 18

Detergente: remove as membranas do núcleo
DNAases - enzimas que degradam o DNA
Tampões de alta e baixa força ionica

Question 19

Invólucro nuclear

Answer 19

Bicamada fosfolipidica + lâmina nuclear fibrosa +complexos poro nuclear (CPN) que permitem passagem de moléculas citoplasma-núcleo

A membrana ext do no núcleo está em continuidade física com o RER

Question 20

CPN (complexos poro nuclear)

Answer 20

Comunicação entre citosol e nucleoplama
Difusão passiva
Simetria octaedrica

LBR (receptores e lamina B) e a empina vão estabilizar a lâmina nuclear

Question 21

Nucleoporinas

Answer 21

Estruturais: formam complexo Y (structural nucleoproteins - scNUP)
Membranares: ligam-se as membranas do invólucro nuclear
FG: apresentam prolongamentos const p resíduos de fenilalanina e glicina

Question 22

Carioferinas

Answer 22

Interagem com resíduos FG (fenilalanina e glicina) para permitir passagem de moléculas maiores

Importinas e exportinas

Question 23

Importação nuclear

Answer 23

Molécula + importina
Importação
Importina + RAN GTP que leva importina de volta para citosol
GTP passa a GDP

Question 24

Exportação nuclear

Answer 24

Exportinas reconhecem sinal NES (nuclear export signal)

Question 25

Transporte das subunidades dis ribossomas e tRNA

Answer 25

Exportina T- medeia transporte de tRNA

Exportina 1- medeia transporte das subunidades dos ribossomas

Question 26

Transporte do mRNA

Answer 26

Não depende de RAN GTP

Question 27

Enzima dbp5

Answer 27

Funciona como helicase

No citoplasma dissocia o mRNA das proteínas a que está associado com gasto de ATP