מיקרוביולוגיה: אבחון מולקולרי ועקרונות מעבדה

Question 1

מהי המוגבלות העיקרית של השיטה האבחונית המיקרוביולוגית הקלאסית ?

Answer 1

תיתכן עד ימים שלמים של גידול האורגניזמים ואבחון מלא לפי צביעה או תרביות

Question 2

מה היתרון של הבדיקה המולקולרית לאבחנה על פני השיטה הקלאסית?

Answer 2

אין צורך לגדל את החיידק או נגיף - מהירות ודיוק גבוהים יותר

עד 4 שעות

Question 3

מהן החסרונות הברורים של שיטות מולקולריות לאבחון מיקרוביולוגי?

Answer 3

מחיר פי 10 עד 100 ממחיר תרבית
מאמץ רב לפיתוח השיטה
אין בדיקות עוקבות אפשריות כמו בתרביות

Question 4

איך נראה גרף הגילוי של גורמי זיהום חדשים על ידי דגימות מולקולריות?

Answer 4

אקפוננציאלי

Question 5

מהן השיטות המולקולריות?

Answer 5

DNA-EXTRACTION PCR

Question 6

איזה סוג פולימראז משומש - PCR ?

למה?

Answer 6

TAQ-POLYMERASE

HEAT RESISTANT

Question 7

איזה חיידקים מתאימים מאוד לשימוש באבחנה מולקולרית?

Answer 7

תחת טיפול אניביוטי
פסטידיים
כשל גידול בתרבית
מצב מסכן חיים מיידי
בירור גנטי לתנגודת חיידקית

Question 8

איזה שימוש נרחב יש לאבחנה ביולוגית באופן המביט על האוכולסיה?

Answer 8

חקירות אפידימיולוגיות

Question 9

NESTED PCR
במה תורם לנו סבב נוסף
באבחון מולקולרי?
באיזה אורגניזם נהוג לעשות זאת? למה?

Answer 9

מגביר ספציפיות

לוקח זמן רב יותר - אספרגילוס

Question 10

כמה ביקורות נהוג לעשות בתהליך ה PCR ?

Answer 10

שלושה
שתיים שליליות
ואחת חיובית

Question 11

איזה שיטה תעזור לנו לברור בין זנים בתוך משפחה של בקטריות?

Answer 11

PCR-RFLP

Question 12

PCR-RFLP

מה יהיה ההבדל בין זן לזן במשפחה?

Answer 12

אורך שונה של גנים שירוצו לפי המסה למרחק שונה על גבי הגל אלקטרופורזיס

Question 13

איזה שיטה היא הרחבה ביותר בזיהוי מולקולרי?

Answer 13

PAN-PCR

Question 14

PAN-PCR

איזה אתר מטרה הוא מבין המקובלים ביותר לבדיקה של חיידקים באופן רחב? מה ההיתרונות בו?

Answer 14

גנים ריבוזומליים - 16 אס אר-דנא

חלקים רבים משותפים לכמעט כל החיידקים וגם חלקים ייחודיים וספציפים בגנים לזנים מסוימים.

Question 15

איזה קבוצות חשובות בזיהוי בעזרת PCR

לגבי סוג הטיפול

Answer 15

MDR - CRE, MRSA, VRE

Question 16

מה היתרון של הגישה הסינדרומית לעומת הגישה הגן-אקס במכשור של הפיסיאר?

Answer 16

מאפשר באותו זמן (2 שעות) פענוח של מספר מזהמים ולא אחד בודד!

Question 17

איזה שיטות מולקולריות עתידות לתפוס מקום יותר גדול באבחון?

Answer 17

NGS, WGS

Question 18

איזו שיטה מאפשרת זיהוי מולקולרי של וירוסי RNA ?

Answer 18

RT-PCR

Question 19

באיזה שלבים יש את מספר הטעויות הכי גדול במעבדה המיקרוביולוגית?

Answer 19

PRE-ANALYTICAL

לקיחת הדגימה והעברת הדגימה למעבדה

Question 20

הצוות הרפואי והסיעודי יהיה מעודכן בנוגע ל____
העבודה של המעבדה )רגישות, ספציפיות, דרך לקיחה
ומשלוח של דגימות).

Answer 20

הצוות הרפואי והסיעודי יהיה מעודכן בנוגע לשיטות
העבודה של המעבדה )רגישות, ספציפיות, דרך לקיחה
ומשלוח של דגימות).

Question 21

צוות המעבדה יקבל מהצוות הרפואי והסיעודי __________ (מחלות רקע, טיפול תרופתי קבוע,
היסטוריה רפואית ).

Answer 21

צוות המעבדה יקבל מהצוות הרפואי והסיעודי מידע
לגביי המטופל (מחלות רקע, טיפול תרופתי קבוע,
היסטוריה רפואית ).

Question 22

שתן לתרבית יש לקחת מהמטופל לאחר חיטוי אזור מתן השתן,
איסוף שתן אמצעי ורצוי שתן ראשון של הבוקר. במידה והשתן
לא נאסף בצורה זו מתקבלות _____ _______ וקשה לקבוע
האם מדובר בזיהום אמיתי ומיהו הפתוגן.

Answer 22

שתן לתרבית יש לקחת מהמטופל לאחר חיטוי אזור מתן השתן,
איסוף שתן אמצעי ורצוי שתן ראשון של הבוקר. במידה והשתן
לא נאסף בצורה זו מתקבלות צמיחות מעורבות וקשה לקבוע
האם מדובר בזיהום אמיתי ומיהו הפתוגן.

Question 23

כמו כן לאחר נטילת הדגימה יש לשמור את השתן בקירור

לשלוח למעבדה בהקדם מאחר ותרבית שתן היא ברוב המקרים-

Answer 23

כמו כן לאחר נטילת הדגימה יש לשמור את השתן בקירור
לשלוח למעבדה בהקדם מאחר ותרבית שתן היא ברוב המקרים
כמותית

Question 24

כרבע מהבקבוקים שמגיעים למעבדה מגיעים ללא מספיק __ ואז יש סיכון של תשובה שלילית שגויה .

Answer 24

כרבע מהבקבוקים שמגיעים למעבדה מגיעים ללא מספיק דם ואז יש סיכון של תשובה שלילית שגויה .

Question 25

תרבית דם צריכה להילקח לאחר ____ של אזור הדקירה
למרות זאת עדיין תרביות דם מזוהמות ע”י חיידקים המהווים את
הפלורה של העור

Answer 25

תרבית דם צריכה להילקח לאחר חיטוי של אזור הדקירה
למרות זאת עדיין תרביות דם מזוהמות ע”י חיידקים המהווים את
הפלורה של העור

Question 26

שוב לזכור שלמידע שזורם מהמחלקה למעבדה

השפעה רבה על תהליך העבודה במעבדה למשל -

Answer 26

התאמת מצעי הגידול

הארכת פרוטוקול האינקובציה של התרבית

Question 27

מהן שתי הגישות הקלאסיות לזיהוי פתוגנים ?

Answer 27

משטח ישיר הכולל צביעה

זריעת הדגימה ע”ג מצעי גידול - בדיקת רגישויות ומטבוליזם

Question 28

מהן ההנחיות לגבי משך ההעברה של הדגימה אל המעבדה?

Answer 28

להעביר דגימות בהקדם האפשרי אם זמן העברה מעל
שעתיים, להשתמש בהתקן עם מצע העברה (או לשמור
(בקירור.
עד 24 שעות בכל מקרה.

Question 29

אילו דגימות אין לאכסן בקירור?

Answer 29

תרביות-דם, נוזל שדרה, דגימות מדרכי-

המין, עין, או אוזן תיכונה.

Question 30

מהן ההנחיות לסימון בדגימות למעבדה?

Answer 30

בטיחות וסימון – לגבי חומרים עם רמת סיכון גבוהה.

סימון נכון ומלא (שם, מס’ זיהוי, מקור, מען, תאריך) במדבקה

Question 31

דוגמאות לאיסוף תקין של דגימות מדרכי נשימה תחתונות?

Answer 31

כיח, ריר טרי המכיל תאי דלקת

Question 32

דוגמאות לאיסוף תקין של דגימות מדרכי השתן?

Answer 32

זרם אמצעי

SPA

Question 33

דוגמאות לאיסוף תקין של דגימות מדרכי עיכול?

Answer 33

צואה טרייה

חומר שנאסף באנדוסקופיה

Question 34

דוגמאות לאיסוף תקין של דגימות מדם ורידי?

Answer 34

דגימות מ2/3 איסופים שונים ביממה, לפני מתן אנטיביוטיקה

נפח: 20 מ”ל

Question 35

מהן יתרונות צביעת גרם:

Answer 35

שיטה מהירה -~ 5 דקות
יכולה לתמוך בבחירת אנטיביוטיקה
בקביעת סוגי תרביות לדגימה מסוימת
ובהשוואת ממצאים מדגימה לתוצאות בתרבית.

Question 36

מהי השיטה באפייון מטבולי של חיידק? מה נעשה במהלך חלק זה?

Answer 36

נזהה תבניות של תגובות חיוביות ושליליות לשם זיהוי ואבחון האורגניזם.
תבניות כאלה יצרו פרופיל מטבולי שהוא כלי אבחוני!

Question 37

דוגמאות לפרופילים מטבוליים בקטריות?

Answer 37

• חיידקים מהירי גידול ממשפחת חיידקי המעיים
• חיידקים גרם שליליים הגדלים לאט ואינם מהמשפחה
  הנ”ל.
• אנאירובים

Question 38

מה ההבדל בין האפיון המטבולי שמבוצע על ידי ערכה אוטומטית לעומת ערכה ידנית?

Answer 38

המערכות הידניות מתבססות על הכישורים האנאליטיים
של איש המעבדה לקריאה ולפרשנות של בעוד שמערכות
אוטומטיות מציעות גישה ללא-מגע יד אדם (מלבד שלבי
ההכנה) ומאפשרת זמן פנוי לפעילויות אחרות

Question 39

על איזה סוג של ערכה מדובר לפי היתרונות המוצגים? אוטומטי/ידני

-מערכת ניהול בסיס נתונים רחב
-רמת איכות ודיוק גבוהים
-הפנלים ]כרטיסי בדיקה[ כוללים 43 – 48 מבחנים ביוכימיים.
-תוצאות לאחר: 4 , 10 , 48 שעות בהתאם לסוג הכרטיס.
-אפשרות למתן תשובות בזמן אמת למחשב השולח.
דווח על ממצאים חריגים.

Answer 39

אוטומטי

Question 40

מדובר בשיטה פיזיקאלית בה יורים קרן לייזר לעבר חיידקים ההופכים ליונים עם תצריף יוני סגולי לכל חיידק וחיידק. כך נוצר מעין “כרטיס ביקור” יוני של החיידקים בצורת גרף, כשציר ה- x הוא זמן הטיסה\גודל המולקולה וציר ה- y הוא כמות המולקולות מאותו הגודל.
על איזה בדיקת מעבדה מיקרוביולגית מדובר?

Answer 40

Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight (MALDI-TOF)
Mass Spectrometry

Question 41

Antibiotic Susceptibility Testing
איזה שיטות משפיעות על כך?
מה הנתון אליו נכוון בבדיקה זו?

Answer 41

שיטת הדיפוזיה באגר
שיטת המהילה
מכוון למציאת - MIC!

Question 42

MIC Minimum Inhibitory concentration

הגדרה ?

Answer 42

הריכוז הקטן ביותר של אנטיביוטיקה נתונה, המעכב
צמיחת חיידק נבדק בתנאי ניסוי מוגדרים ומבוקרים.
התוצאות מבוטאות ב – m g/ ml .

Question 43

MBC Minimal Bactericidal Concentration

הגדרה ?

Answer 43

הריכוז הקטן ביותר של אנטיביוטיקה נתונה, המשמיד
חיידק נבדק בתנאים מוגדרים ומבוקרים.
התוצאות מבוטאות ב – m g/ ml .

Question 44

מהו עיקרון הבדיקה של - E-TEST ?

Answer 44

מבוסס על שילוב של 2 השיטות הנ”ל: מהילה ודיפוזיה.
- יקבע בהתאם ל MIC
.אורך הסולם, במקום שהאליפסה מתאחדת עם הרצועה
QUANTITATIVE TEST

Question 45

אתה בודק את הריכוז המינימלי הדרוש (MIC) של אמפיצילין לטיפול ב-E.coli באמצעות disc diffusion method. מה נכון בנוגע לבדיקה?

1. שטח האינהיביציה (inhibition zone) גדל ככל שהחיידק עמיד יותר לאנטיביוטיקה.
2. שטח האינהיביציה (inhibition zone) בהתחלה גדל, וכעבור מספר ימים עם העלאת ריכוז האנטיביוטיקה בדיסק, קטן.
3. שטח האינהיביציה (inhibition zone) גדל ככל שהחיידק רגיש יותר לאנטיביוטיקה.
4. אמפיצילין אינו יעיל לטיפול ב-E.coli ולכן בדיקה זו אינה מתאימה לצורך קביעת ה-MIC.

Answer 45

3. שטח האינהיביציה (inhibition zone) גדל ככל שהחיידק רגיש יותר לאנטיביוטיקה.