VL 8: RNA-Prozessierung - mRNA Export und rRNA Flashcards
Was wird in welche Richtung transportiert? (Kern - Zytoplasma)
Aus Kern raus:
- mRNA
- tRNA
- pre-miRNA
- snRNA
In Kern hinein
- ribosomale Proteine
- snRNP
- Histone
- nuclear proteins
Wie sieht ein Kernporekomplex aus
sieht grob wie ein Basketballkorb aus
verdünnt sich nach innen
Cytoplasmafilamente erkennen Proteine die importiert werden sollen
Welche Bestandteile von mRNA-Partikeln sind wichtig für den Export?
5‘ cap and cap-Bindeproteine
3‘ poly−A-Schwanz and poly-A Bindeproteine
Spleißfaktoren
Generelle RNA-Bindeproteine (hnRNPs)
Die drei Schritte des Exports
- mRNP Assemblierung: aus dem Gen wird die reife mRNP (Anheftung Mex67, Prozessierung, Spleißen, Transkription)
- Translokation: Beförderung reifer mRNP aus dem Zellkern ins Zytoplasma
- mRNP Disassemblierung: reife mRNA wird translatiert (Abspaltung von Mex67)
Was macht Mex67?
assoziiert mit Nukleoporinen
ist in 75% aller mRNA-Exporte involviert
Disassemblierung ist wichtig für Direktionalität des Exports (kein Zurücklaufen in der Pore)
tRNAs und rRNAs zeigen ausgedehnte Selbstfaltung
?
Wie sieht die Sekundärstruktur der tRNA aus?
Kleeblatt-Struktur
Benennug der Arme im Uhrzeigersinn:
- Akzeptor Arm
- Phi-U-loop
- variabler loop (das kleine Ding)
- Anticodon-loop
- D-loop
Wie sieht die Tertiärstruktur der tRNA aus?
D-loop und Phi-U-loop werden über die Mitte gefaltet
Akzeptor-Arm wird nach rechts gefaltet
–> ergibt L-Form
Aminoacylierung
das Befestigen von Aminosäuren an tRNAs
Prozess der Aminoacylierung
- Schritt: Transfer von AMP
AS + ATP –> adenylierte AS + Pyrophosphat - Schritt: tRNA-Beladung durch Aminoacyl-tRNA-Synthetase:
adenylierte AS + tRNA –> Aminoacyl-tRNA + AMP
Nucleolus
Region im Zellkern in der die rRNA liegt
Welche Subdomänen findet man im Nucleolus?
FC = Fibrillar Centre GC = Granular Component DFC = Dense Fibrillar Component
Wie kommt es zur Struktur des Nucleolus?
Keine physikalische Barrieren (z.B. Membranen)
=> Veränderte Aufenthaltsdauer für
Komponenten der Ribosomenbiogenese
=> Der Nukleolus ist eine „kinetische
Struktur
Wie erkennen die snoRNAs die zu modifizierenden Basen in tRNAs und rRNAs?
Basen sind komplementär zu ihrer eigenen Sequenz
Wann geschieht die Basenmodifikation in tRNAs und rRNAs?
kotranskriptional
Wie und warum werden Basen in rRNA und tRNA modifiziert?
Wie: Sequenzspezifische Basenmodifikationen (Umwandlung von U zu Pseudo-U, Methylierung)
Warum: stabilisiert die Faltung
rRNAs werden im Nukleolus transkribiert und prozessiert
?
Was sind die Eigenschaftenvom genetischen Code?
- Triplettcode
- kommafrei, nicht überlappend
- eindeutig
- degeneriert
- universell
NPC - Was ist das?
Nuclear pore complex = kernporenkomplex
Wie ist die kernhüllmembran aufgebaut?
Äußere kernmembran
Perinukleärer raum
Innere kernmembran
Kernlamina
Was sind Nups?
= Nucleoporine
- Strukturproteine des NPC
- symmetrisch auf cytoplasmatischer und Kernseite verteilt
- kontaktieren die zu transportierenden lasten
Womit ist der mRNA-Export gekoppelt und warum?
Unreife mRNAs müssen im Kern bleiben, deswegen ist der Export gekoppelt mit
- transkription
- prozessierung
(- translation)
Was ist ein mRNP?
Messenger ribonucleoprotein partikel
welche Funktion hat dbp5?
Entfernt den promotor für mRNA-Export –> mex67 fällt ab –> verhindert Rückkehr in die pore
Helikase trennt das Bindeprotein von der mRNA
rRNA-Prozessierung
- Nukleasen schneiden prä-rRNA zurecht
- an der Basenmodifizierung sind snoRNA und Proteine beteiligt
Wo erfolgt die rRNA expression?
Im Nukleolus
Wie ist die struktur der rRNA?
Tannebaumstruktur :)
Was beinhaltet die sekundärstruktur der rRNA bei E. coli?
- zentrale domäne
- 3’ haupt- und 3’ nebendomäne
- 5’ domäne
Wie wird die tRNA prozessiert?
- verkürzen
- basenmodifikation
- eigtl spleißen
- Anheften des CCA-Endes
- Anbinden der AS
Wie viele Bindetaschen haben die Aminoacetyl-tRNA-Synthetasen?
3:
- als erstes binden eine spezifische AS und ATP an die Synthetase
- AS wird nach Bildung von AMP aktiviert und Pyrophosphat wird entlassen
- korrekte tRNA bindet an Synthetase und AS wird angehängt, AMP wird entlassen
- Die beladene tRNA wird entlassen
1 Tasche für AS
1 Tasche für ATP
1 Tasche für tRNA
Woran erkennt man eine korrekte tRNA ?
Akzeptorarm
Anticodon