Uso diagnóstico de anticuerpos Flashcards
Sistema inmune innato
Rápido inespecífico
Cuales son las barreras físicas del sistema inmune
Piel y mucosa
Sistema inmune adaptativo
Lento y específico
Qué célula secreta anticuerpos?
células plasmáticas <– linfocitos B
Células de la inmunidad adaptativa
Linfocitos B- céls plasmáticas
Linfocitos T - como efectores
Para que nos sirven los anticuerpos diagnósticos
Identificar patógenos
Saber los componentes de la sangre
¿Qué es ELISA?
Test inmunológico muy sensitivo
¿Para qué se utiliza ELISA?
Para la detección y cuantificación de:
- Anticuerpos
- Antígenos
- Proteínas
- Glucoproteínas
- Hormonas
Proteína elaborada por las células plasmáticas en respuesta a un antígeno
Anticuerpo
Composición anticuerpo
Se compone de:
* 2 cadenas pesadas (variable, puesta por linfocito B)
* 2 cadenas lígeras (constante)
Cada cadena pesada se une a la ligera mediante puente disulfuros.
¿A qué se une un anticuerpo?
A un solo antígeno específico
¿Para qué el linfocito B pone una cadena pesada diferente?
Es específico a cada parte de un microorganismo
¿Qué tipo de anticuerpos se utilizan?
De origen monoclonal
¿Cómo se logra realizar un ELISA?
Realizando complejos antígeno-anticuerpo
Cómo funciona la técnica ELISA
detecta antígenos específicos con anticuerpos marcados
Molécula ajena o tóxica para el organismo que, una vez dentro del cuerpo, induce en éste una respuesta inmunitaria
Antígeno
¿Qué provocan los antígenos dentro del cuerpo?
Formación de anticuerpos
¿Qué se requiere para realizar un ELISA? (4)
Anticuerpos primario y/o secundario
Antígeno
Buffer
Cromógeno o sustrato
Pasos generales para realizar un ELISA (4)
- Recubrimiento
- Bloqueo
- Detección
- Lectura final
¿Con qué se hace el recubrimiento?
Con un antígeno o anticuerpo
¿Con qué se hace normalmente el bloqueo?
Con la adición de albúmina de suero bovino [BSA]
¿Para qué sirve el bloqueo?
Para evitar que en las incubaciones se unan a la placa, de forma inespecífica otras moléculas que podrían interferir con los resultados
ELISA directo
- El antígeno se inmoviliza sobre una placa
- Se añaden anticuerpos primarios antígeno de interés con una enzima
- Se pone el sustrato de la enzima para que reaccione–> señal visible (cambia color)
- Ciclos de lavado intermedios
Funciones de la ELISA directo
Analizar la respuesta inmunológica
Baja sensibilidad
Mucho ruido de fondo ya que las proteínas y antígenos se quedan en el fondo
ELISA indirecto
- Se inmoviliza el antígeno sobre una placa
- Se pone un anticuerpo primario antígeno de interés (sin marcar) (sin la enzima)
- Se pone un anticuerpo secundario para el primer anticuerpo marcado con la enzima
- Se añade el sustrato reacciona con la enzima y te da una señal visible
- Ciclos de lavado intermedios